Published August 1, 2023
| Version v1
Publication
Dried serum spots on pre-punched filter paper discs are ready-to-use storage and shipping devices for blood-borne antigens and antibodies
Creators
- 1. University of Rostock
- 2. University of Ghana
- 3. Hochschule Bonn-Rhein-Sieg
- 4. Kiel University
Description
Dried serum spots that are well prepared can be attractive alternatives to frozen serum samples for shelving specimens in a medical or research center's biobank and mailing freshly prepared serum to specialized laboratories. During the pre-analytical phase, complications can arise which are often challenging to identify or are entirely overlooked. These complications can lead to reproducibility issues, which can be avoided in serum protein analysis by implementing optimized storage and transfer procedures. With a method that ensures accurate loading of filter paper discs with donor or patient serum, a gap in dried serum spot preparation and subsequent serum analysis shall be filled. Pre-punched filter paper discs with a 3 mm diameter are loaded within seconds in a highly reproducible fashion (approximately 10% standard deviation) when fully submerged in 10 μl of serum, named the "Submerge and Dry" protocol. Such prepared dried serum spots can store several hundred micrograms of proteins and other serum components. Serum-borne antigens and antibodies are reproducibly released in 20 μl elution buffer in high yields (approximately 90%). Dried serum spot-stored and eluted antigens kept their epitopes and antibodies their antigen binding abilities as was assessed by SDS-PAGE, 2D gel electrophoresis-based proteomics, and Western blot analysis, suggesting pre-punched filter paper discs as handy solution for serological tests.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
يمكن أن تكون بقع المصل المجففة التي يتم تحضيرها جيدًا بدائل جذابة لعينات المصل المجمدة لعينات الرفوف في البنك الحيوي للمركز الطبي أو البحثي وإرسال المصل الطازج بالبريد إلى المختبرات المتخصصة. خلال مرحلة ما قبل التحليل، يمكن أن تنشأ مضاعفات غالبًا ما يكون من الصعب تحديدها أو يتم تجاهلها تمامًا. يمكن أن تؤدي هذه المضاعفات إلى مشاكل في التكاثر، والتي يمكن تجنبها في تحليل بروتين المصل من خلال تنفيذ إجراءات تخزين ونقل محسنة. مع طريقة تضمن التحميل الدقيق لأقراص ورق الترشيح مع مصل المتبرع أو المريض، يجب سد فجوة في تحضير بقعة المصل المجفف وتحليل المصل اللاحق. يتم تحميل أقراص ورق الترشيح المثقوبة مسبقًا بقطر 3 مم في غضون ثوانٍ بطريقة قابلة للتكرار بشكل كبير (حوالي 10 ٪ انحراف معياري) عند غمرها بالكامل في 10 ميكرولتر من المصل، يسمى بروتوكول "الغمر والجفاف". يمكن لهذه البقع المصلية المجففة المحضرة تخزين عدة مئات من الميكروغرامات من البروتينات ومكونات المصل الأخرى. يتم إطلاق المستضدات والأجسام المضادة التي يحملها المصل بشكل متكرر في محلول شطف 20 ميكرولتر في غلة عالية (حوالي 90 ٪). حافظت المستضدات المجففة المخزنة في بقعة المصل والأجسام المضادة على قممها اللاصقة والأجسام المضادة وقدراتها على ربط المستضدات كما تم تقييمها من قبل SDS - PAGE، والبروتين القائم على الرحلان الكهربائي ثنائي الأبعاد، وتحليل البقعة الغربية، مما يشير إلى أقراص ورق الترشيح المثقوبة مسبقًا كحل مفيد للاختبارات المصلية.Translated Description (French)
Les taches de sérum séchées qui sont bien préparées peuvent être des alternatives attrayantes aux échantillons de sérum congelés pour stocker des échantillons dans la biobanque d'un centre médical ou de recherche et envoyer le sérum fraîchement préparé à des laboratoires spécialisés. Au cours de la phase pré-analytique, des complications qui sont souvent difficiles à identifier ou qui sont entièrement négligées peuvent survenir. Ces complications peuvent entraîner des problèmes de reproductibilité, qui peuvent être évités dans l'analyse des protéines sériques en mettant en œuvre des procédures de stockage et de transfert optimisées. Avec une méthode qui assure un chargement précis des disques en papier filtre avec le sérum du donneur ou du patient, un vide dans la préparation des taches de sérum séché et l'analyse du sérum subséquente doivent être comblés. Les disques en papier filtre préperforés d'un diamètre de 3 mm sont chargés en quelques secondes de manière hautement reproductible (écart type d'environ 10 %) lorsqu'ils sont complètement immergés dans 10 μl de sérum, appelé protocole « Submerge and Dry ». Ces taches sériques séchées préparées peuvent stocker plusieurs centaines de microgrammes de protéines et d'autres composants sériques. Les antigènes et les anticorps transmis par le sérum sont libérés de manière reproductible dans 20 μl de tampon d'élution avec des rendements élevés (environ 90 %). Les antigènes séchés stockés par endroits et élués dans le sérum ont conservé leurs épitopes et leurs anticorps, leurs capacités de liaison à l'antigène, comme l'ont évalué SDS-PAGE, la protéomique basée sur l'électrophorèse sur gel 2D et l'analyse par Western blot, suggérant des disques de papier filtre pré-perforés comme solution pratique pour les tests sérologiques.Translated Description (Spanish)
Las manchas de suero seco que están bien preparadas pueden ser alternativas atractivas a las muestras de suero congelado para archivar muestras en el biobanco de un centro médico o de investigación y enviar por correo suero recién preparado a laboratorios especializados. Durante la fase preanalítica, pueden surgir complicaciones que a menudo son difíciles de identificar o se pasan por alto por completo. Estas complicaciones pueden conducir a problemas de reproducibilidad, que pueden evitarse en el análisis de proteínas séricas mediante la implementación de procedimientos optimizados de almacenamiento y transferencia. Con un método que garantice una carga precisa de los discos de papel de filtro con suero del donante o del paciente, se llenará un vacío en la preparación de la mancha de suero seco y el posterior análisis del suero. Los discos de papel de filtro preperforados con un diámetro de 3 mm se cargan en cuestión de segundos de una manera altamente reproducible (aproximadamente 10% de desviación estándar) cuando se sumergen completamente en 10 μl de suero, denominado protocolo "Sumergir y Secar". Dichas manchas de suero seco preparadas pueden almacenar varios cientos de microgramos de proteínas y otros componentes del suero. Los antígenos y anticuerpos transmitidos por el suero se liberan de forma reproducible en 20 μl de tampón de elución con altos rendimientos (aproximadamente el 90%). Los antígenos almacenados en manchas y eluidos en suero seco mantuvieron sus epítopos y anticuerpos en sus capacidades de unión al antígeno, como se evaluó mediante SDS-PAGE, proteómica basada en electroforesis en gel 2D y análisis de transferencia Western, lo que sugiere que los discos de papel de filtro preperforados son una solución útil para las pruebas serológicas.Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- بقع المصل المجففة على أقراص ورق الترشيح المثقوبة مسبقًا هي أجهزة تخزين وشحن جاهزة للاستخدام للمستضدات والأجسام المضادة المنقولة بالدم
- Translated title (French)
- Les taches de sérum séchées sur les disques de papier filtre pré-perforés sont des dispositifs de stockage et d'expédition prêts à l'emploi pour les antigènes et les anticorps transmissibles par le sang
- Translated title (Spanish)
- Las manchas de suero seco en los discos de papel de filtro preperforados son dispositivos de almacenamiento y envío listos para usar para antígenos y anticuerpos transmitidos por la sangre
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W4383336669
- DOI
- 10.1016/j.jim.2023.113519
References
- https://openalex.org/W1890681121
- https://openalex.org/W1975612476
- https://openalex.org/W1979844622
- https://openalex.org/W1991546863
- https://openalex.org/W1992572871
- https://openalex.org/W2016590529
- https://openalex.org/W2016973128
- https://openalex.org/W2043411860
- https://openalex.org/W2061938657
- https://openalex.org/W2077542033
- https://openalex.org/W2080117639
- https://openalex.org/W2095789290
- https://openalex.org/W2100837269
- https://openalex.org/W2110741523
- https://openalex.org/W2159199970
- https://openalex.org/W2315142897
- https://openalex.org/W2342061609
- https://openalex.org/W2548601919
- https://openalex.org/W2593746507
- https://openalex.org/W2617782119
- https://openalex.org/W2746682477
- https://openalex.org/W2767590919
- https://openalex.org/W2806920537
- https://openalex.org/W2811474238
- https://openalex.org/W2907341899
- https://openalex.org/W2951624582
- https://openalex.org/W2952466446
- https://openalex.org/W2989655039
- https://openalex.org/W3010324162
- https://openalex.org/W3011553004
- https://openalex.org/W3080462344
- https://openalex.org/W3125736948
- https://openalex.org/W3133206820
- https://openalex.org/W3157586375
- https://openalex.org/W3162656888
- https://openalex.org/W3204716615
- https://openalex.org/W3207838239
- https://openalex.org/W4221128588
- https://openalex.org/W4246507410
- https://openalex.org/W4362520021