Published September 7, 2018 | Version v1
Publication Open

Long-term apoptosis-related protein expression in the diabetic mouse ovary

Creators

  • 1. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
  • 2. Universidad Maimónides

Description

Emerging evidence has shown that oocytes from diabetic ovaries exhibit delayed maturation, mitochondrial dysfunction and meiotic defects, which are related increased apoptosis. The main objective of the present study was to analyze the apoptosis pathways activated during follicular loss at multiple time points in a diabetic mouse model. Twenty BALB/c mice were used in this study, and diabetes mellitus was induced by streptozotocin injection. Three diabetic and two control animals were sacrificed on days 15, 20, 70 and 80 posttreatment. The ovaries were then removed; one was used for follicular counting, TUNEL, immunohistochemistry and immunofluorescence, while the other was used for Western blot analysis. The proteins studied were BAX, BCL2, t-BID, FAS, FASL, active caspase 8, active caspase 9 and active caspase 3. Follicular apoptosis decreased over time, with the highest values observed at 15 days posttreatment. Granulosa cells were positive for active caspase 3, which showed constant expression levels at all time points. FAS, FASL, t-BID and active caspase 8 showed strong cytoplasmic immunostaining in the oocytes and granulosa cells of the diabetic mice, with significant increases observed at 15, 20 and 70 days posttreatment. BAX expression was slightly higher in the diabetic mouse ovaries than in the control ovaries at 15, 20 and 70 days posttreatment, whereas the highest active caspase 9 expression was at observed 20 days posttreatment. Low BCL2 protein levels were detected in the diabetic mouse ovaries at all time points. This study describes for the first time the behavior of apoptosis-related proteins in the diabetic mouse ovary and shows not only that the FAS/FASL pathway contributes to follicular loss but also that antral follicles are the most affected.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

أظهرت الأدلة الناشئة أن البويضات من المبيض السكري تظهر نضجًا متأخرًا، واختلال وظيفي في الميتوكوندريا وعيوب انتصافية، والتي ترتبط بزيادة الاستماتة. كان الهدف الرئيسي من هذه الدراسة هو تحليل مسارات موت الخلايا المبرمج التي تم تنشيطها أثناء فقدان الجريبات في نقاط زمنية متعددة في نموذج الفأر السكري. تم استخدام عشرين من فئران BALB/c في هذه الدراسة، وتم تحفيز مرض السكري عن طريق حقن الستربتوزوتوسين. تم التضحية بثلاثة من مرضى السكري واثنين من حيوانات التحكم في الأيام 15 و 20 و 70 و 80 بعد العلاج. ثم تمت إزالة المبيضين ؛ تم استخدام واحد للعد الجريبي، TUNEL، الكيمياء النسيجية المناعية والفلورة المناعية، في حين تم استخدام الآخر لتحليل البقعة الغربية. كانت البروتينات التي تمت دراستها هي BAX و BCL2 و t - BID و FASS و FASL و caspase 8 النشط و caspase 9 النشط و caspase 3 النشط. انخفض موت الخلايا المبرمج الجريبي بمرور الوقت، حيث لوحظت أعلى القيم في 15 يومًا بعد العلاج. كانت الخلايا الحبيبية إيجابية لـ caspase 3 النشط، والتي أظهرت مستويات تعبير ثابتة في جميع النقاط الزمنية. أظهر FAS و FASL و t - BID و caspase النشط 8 تلطيخًا مناعيًا سيتوبلازميًا قويًا في البويضات والخلايا الحبيبية للفئران المصابة بالسكري، مع ملاحظة زيادات كبيرة في 15 و 20 و 70 يومًا بعد العلاج. كان تعبير BAX أعلى قليلاً في مبيضات الفئران المصابة بداء السكري منه في المبيضات الضابطة في 15 و 20 و 70 يومًا بعد العلاج، في حين كان أعلى تعبير نشط لـ caspase 9 في 20 يومًا بعد العلاج. تم اكتشاف مستويات منخفضة من بروتين BCL2 في مبيضات الفئران المصابة بالسكري في جميع النقاط الزمنية. تصف هذه الدراسة لأول مرة سلوك البروتينات المرتبطة بالموت المبرمج في مبيض الفأر السكري وتظهر ليس فقط أن مسار FASL/FASL يساهم في فقدان الجريبات ولكن أيضًا أن جريبات الغار هي الأكثر تضررًا.

Translated Description (French)

Des preuves émergentes ont montré que les ovocytes des ovaires diabétiques présentent une maturation retardée, un dysfonctionnement mitochondrial et des défauts méiotiques, qui sont liés à une augmentation de l'apoptose. L'objectif principal de la présente étude était d'analyser les voies d'apoptose activées lors de la perte folliculaire à plusieurs moments dans un modèle de souris diabétique. Vingt souris BALB/c ont été utilisées dans cette étude, et le diabète sucré a été induit par injection de streptozotocine. Trois animaux diabétiques et deux animaux témoins ont été sacrifiés les jours 15, 20, 70 et 80 après le traitement. Les ovaires ont ensuite été prélevés ; l'un a été utilisé pour le comptage folliculaire, TUNEL, l'immunohistochimie et l'immunofluorescence, tandis que l'autre a été utilisé pour l'analyse par Western blot. Les protéines étudiées étaient BAX, BCL2, t-BID, FAS, FASL, caspase 8 active, caspase 9 active et caspase 3 active. L'apoptose folliculaire a diminué au fil du temps, les valeurs les plus élevées ayant été observées 15 jours après le traitement. Les cellules de la granulosa étaient positives pour la caspase 3 active, qui présentait des niveaux d'expression constants à tous les moments. FAS, FASL, t-BID et caspase 8 active ont montré une forte immunocoloration cytoplasmique dans les ovocytes et les cellules de la granulosa des souris diabétiques, avec des augmentations significatives observées 15, 20 et 70 jours après le traitement. L'expression de BAX était légèrement plus élevée dans les ovaires de souris diabétiques que dans les ovaires témoins 15, 20 et 70 jours après le traitement, alors que l'expression de caspase 9 active la plus élevée était observée 20 jours après le traitement. De faibles niveaux de protéine BCL2 ont été détectés dans les ovaires de souris diabétiques à tous les moments. Cette étude décrit pour la première fois le comportement des protéines liées à l'apoptose dans l'ovaire de souris diabétique et montre non seulement que la voie FAS/FASL contribue à la perte folliculaire, mais aussi que les follicules antraux sont les plus touchés.

Translated Description (Spanish)

La evidencia emergente ha demostrado que los ovocitos de los ovarios diabéticos presentan retraso en la maduración, disfunción mitocondrial y defectos meióticos, que están relacionados con el aumento de la apoptosis. El objetivo principal del presente estudio fue analizar las vías de apoptosis activadas durante la pérdida folicular en múltiples momentos en un modelo de ratón diabético. En este estudio se utilizaron veinte ratones BALB/c y se indujo diabetes mellitus mediante inyección de estreptozotocina. Se sacrificaron tres animales diabéticos y dos de control los días 15, 20, 70 y 80 después del tratamiento. Luego se extirparon los ovarios; uno se utilizó para el recuento folicular, túnel, inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, mientras que el otro se utilizó para el análisis de transferencia Western. Las proteínas estudiadas fueron BAX, BCL2, t-BID, FAS, FASL, caspasa activa 8, caspasa activa 9 y caspasa activa 3. La apoptosis folicular disminuyó con el tiempo, con los valores más altos observados a los 15 días después del tratamiento. Las células de la granulosa fueron positivas para la caspasa 3 activa, que mostró niveles de expresión constantes en todos los puntos temporales. FAS, FASL, t-BID y caspasa activa 8 mostraron una fuerte inmunotinción citoplasmática en los ovocitos y células granulosas de los ratones diabéticos, con aumentos significativos observados a los 15, 20 y 70 días después del tratamiento. La expresión de BAX fue ligeramente mayor en los ovarios de ratones diabéticos que en los ovarios de control a los 15, 20 y 70 días después del tratamiento, mientras que la expresión más alta de caspasa 9 activa se observó a los 20 días después del tratamiento. Se detectaron niveles bajos de proteína BCL2 en los ovarios de ratones diabéticos en todos los puntos temporales. Este estudio describe por primera vez el comportamiento de las proteínas relacionadas con la apoptosis en el ovario de ratón diabético y muestra no solo que la vía FAS/FASL contribuye a la pérdida folicular, sino también que los folículos antrales son los más afectados.

Files

journal.pone.0203268&type=printable.pdf

Files (21.5 MB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:4abb8272b6271ca41809b1c1db838007
21.5 MB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
تعبير البروتين المرتبط بالاستماتة على المدى الطويل في مبيض الفأر السكري
Translated title (French)
Expression à long terme des protéines liées à l'apoptose dans l'ovaire de souris diabétique
Translated title (Spanish)
Expresión de proteínas relacionadas con la apoptosis a largo plazo en el ovario de ratón diabético

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2891186709
DOI
10.1371/journal.pone.0203268

Is supplement to
https://openalex.org/W4315797997 (Other)
https://openalex.org/W31185521 (Other)
https://openalex.org/W3031715813 (Other)
https://openalex.org/W2369124635 (Other)
https://openalex.org/W2361549486 (Other)
https://openalex.org/W2355292438 (Other)
https://openalex.org/W2163499613 (Other)
https://openalex.org/W2142208128 (Other)
https://openalex.org/W2090048090 (Other)
https://openalex.org/W1976948039 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
Argentina

References

  • https://openalex.org/W1787488570
  • https://openalex.org/W1950806555
  • https://openalex.org/W1964948989
  • https://openalex.org/W1977178308
  • https://openalex.org/W1980836434
  • https://openalex.org/W2008199204
  • https://openalex.org/W2017278386
  • https://openalex.org/W2019856376
  • https://openalex.org/W2020267609
  • https://openalex.org/W2041447827
  • https://openalex.org/W2064568420
  • https://openalex.org/W2078181183
  • https://openalex.org/W2079476910
  • https://openalex.org/W2084912135
  • https://openalex.org/W2111974690
  • https://openalex.org/W2114308118
  • https://openalex.org/W2121974974
  • https://openalex.org/W2122801878
  • https://openalex.org/W2124974255
  • https://openalex.org/W2126060958
  • https://openalex.org/W2132778480
  • https://openalex.org/W2138302361
  • https://openalex.org/W2142237503
  • https://openalex.org/W2148125367
  • https://openalex.org/W2149745618
  • https://openalex.org/W2152284014
  • https://openalex.org/W2157803698
  • https://openalex.org/W2161624529
  • https://openalex.org/W2166406815
  • https://openalex.org/W2221938935
  • https://openalex.org/W2229285487
  • https://openalex.org/W2320355255
  • https://openalex.org/W2471605942
  • https://openalex.org/W2479340653
  • https://openalex.org/W2573884300