Published January 1, 2014
| Version v1
Publication
Open
Partial Purification of Integral Membrane Antigenic Proteins from<i>Trypanosoma evansi</i>That Display Immunological Cross-Reactivity with<i>Trypanosoma vivax</i>
- 1. Simón Bolívar University
- 2. Instituto de Estudios Avanzados
Description
Trypanosoma evansi and Trypanosoma vivax, which are the major causative agents of animal trypanosomosis in Venezuela, have shown a very high immunological cross-reactivity. Since the production of T. vivax antigens is a limiting factor as this parasite is difficult to propagate in experimental animal models, our goal has been to identify and isolate antigens from T. evansi that cross-react with T. vivax. Here, we used the Venezuelan T. evansi TEVA1 isolate to prepare the total parasite lysate and its corresponding cytosolic and membranous fractions. In order to extract the T. evansi integral membrane proteins, the particulate portion was further extracted first with Triton X-100, and then with sodium dodecyl sulfate. After discarding the cytosolic and Triton X-100 solubilized proteins, we employed sedimentation by centrifugation on linear sucrose gradients to partially purify the sodium dodecyl sulfate-solubilized proteins from the Triton X-100 resistant particulate fraction of T. evansi. We obtained enriched pools containing polypeptide bands with apparent molecular masses of 27 kDa, 31 kDa, and 53 kDa, which were recognized by anti-T. vivax antibodies from experimentally and naturally infected bovines.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
أظهرت المثقبية إيفانسي والمثقبية النشيطة، وهما العاملان المسببان الرئيسيان لداء المثقبيات الحيواني في فنزويلا، تفاعلًا مناعيًا عاليًا جدًا. نظرًا لأن إنتاج مستضدات T. vivax هو عامل مقيد حيث يصعب انتشار هذا الطفيل في النماذج الحيوانية التجريبية، فقد كان هدفنا هو تحديد وعزل المستضدات من T. evansi التي تتفاعل مع T. vivax. هنا، استخدمنا عزل T. evansi TEVA1 الفنزويلي لتحضير المحلل الطفيلي الكلي والكسور الخلوية والغشائية المقابلة له. من أجل استخراج بروتينات غشاء T. evansi المتكامل، تم استخراج الجزء الجسيمي أولاً باستخدام Triton X -100، ثم باستخدام كبريتات دوديسيل الصوديوم. بعد التخلص من البروتينات المنحلّة بالخلايا وبروتينات تريتون X -100 المذابة، استخدمنا الترسيب عن طريق الطرد المركزي على تدرجات السكروز الخطية لتنقية البروتينات المنحلّة بكبريتات دوديسيل الصوديوم جزئيًا من جزء الجسيمات المقاوم لـ Triton X -100 من T. evansi. حصلنا على أحواض مخصبة تحتوي على أشرطة عديد الببتيد ذات كتل جزيئية ظاهرة تبلغ 27 كيلو دالتون و 31 كيلو دالتون و 53 كيلو دالتون، والتي تم التعرف عليها من قبل الأجسام المضادة لـ T. vivax من الأبقار المصابة تجريبيًا وطبيعيًا.Translated Description (French)
Trypanosoma evansi et Trypanosoma vivax, qui sont les principaux agents responsables de la trypanosomose animale au Venezuela, ont montré une réactivité croisée immunologique très élevée. Étant donné que la production d'antigènes de T. vivax est un facteur limitant car ce parasite est difficile à propager dans des modèles animaux expérimentaux, notre objectif a été d'identifier et d'isoler des antigènes de T. evansi qui réagissent de manière croisée avec T. vivax. Ici, nous avons utilisé l'isolat vénézuélien T. evansi TEVA1 pour préparer le lysat parasitaire total et ses fractions cytosoliques et membranaires correspondantes. Afin d'extraire les protéines membranaires intégrales de T. evansi, la partie particulaire a été extraite d'abord avec du Triton X-100, puis avec du dodécylsulfate de sodium. Après avoir éliminé les protéines solubilisées dans le cytosol et le Triton X-100, nous avons utilisé la sédimentation par centrifugation sur des gradients linéaires de saccharose pour purifier partiellement les protéines solubilisées dans le dodécylsulfate de sodium de la fraction particulaire résistante au Triton X-100 de T. evansi. Nous avons obtenu des pools enrichis contenant des bandes polypeptidiques avec des masses moléculaires apparentes de 27 kDa, 31 kDa et 53 kDa, qui ont été reconnues par des anticorps anti-T. vivax provenant de bovins infectés expérimentalement et naturellement.Translated Description (Spanish)
Trypanosoma evansi y Trypanosoma vivax, que son los principales agentes causantes de la tripanosomosis animal en Venezuela, han mostrado una reactividad cruzada inmunológica muy alta. Dado que la producción de antígenos de T. vivax es un factor limitante, ya que este parásito es difícil de propagar en modelos animales experimentales, nuestro objetivo ha sido identificar y aislar antígenos de T. evansi que reaccionan de forma cruzada con T. vivax. Aquí, utilizamos el aislado TEVA1 de T. evansi venezolano para preparar el lisado parasitario total y sus correspondientes fracciones citosólicas y membranosas. Para extraer las proteínas integrales de membrana de T. evansi, la porción particulada se extrajo adicionalmente primero con Triton X-100 y luego con dodecilsulfato de sodio. Después de descartar las proteínas citosólicas y solubilizadas en Triton X-100, empleamos la sedimentación por centrifugación en gradientes lineales de sacarosa para purificar parcialmente las proteínas solubilizadas en dodecilsulfato de sodio de la fracción particulada resistente a Triton X-100 de T. evansi. Obtuvimos grupos enriquecidos que contenían bandas de polipéptidos con masas moleculares aparentes de 27 kDa, 31 kDa y 53 kDa, que fueron reconocidas por anticuerpos anti-T. vivax de bovinos infectados experimental y naturalmente.Files
965815.pdf.pdf
Files
(16.0 kB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:2ee697bc85fbda160a02700b6b408f56
|
16.0 kB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- التنقية الجزئية للبروتينات المستضدية الغشائية المتكاملة من<i>المثقبية إيفانسي التي</i> تعرض التفاعل المناعي المتبادل مع<i>المثقبية النشيطة</i>
- Translated title (French)
- Purification partielle des protéines antigéniques membranaires intégrales de<i>Trypanosoma evansi</i>qui présentent une réactivité immunologique croisée avec<i>Trypanosoma vivax</i>
- Translated title (Spanish)
- Purificación parcial de proteínas antigénicas de membrana integral de<i>Trypanosoma evansi</i>que muestran reactividad cruzada inmunológica con<i>Trypanosoma vivax</i>
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W2113201262
- DOI
- 10.1155/2014/965815
References
- https://openalex.org/W1837231284
- https://openalex.org/W1977687273
- https://openalex.org/W1981394186
- https://openalex.org/W1986152331
- https://openalex.org/W1992760440
- https://openalex.org/W1997625507
- https://openalex.org/W2012786494
- https://openalex.org/W2019835723
- https://openalex.org/W2020640685
- https://openalex.org/W2027097213
- https://openalex.org/W2029002152
- https://openalex.org/W2032806950
- https://openalex.org/W2049671958
- https://openalex.org/W2049903398
- https://openalex.org/W2057811269
- https://openalex.org/W2065233446
- https://openalex.org/W2079251454
- https://openalex.org/W2081470604
- https://openalex.org/W2084213093
- https://openalex.org/W2085366255
- https://openalex.org/W2100837269
- https://openalex.org/W2101108802
- https://openalex.org/W2105688902
- https://openalex.org/W2114275860
- https://openalex.org/W2120000841
- https://openalex.org/W2124874120
- https://openalex.org/W2141466247
- https://openalex.org/W2156429640
- https://openalex.org/W2156691397
- https://openalex.org/W2157974457
- https://openalex.org/W2169065781
- https://openalex.org/W2338409588
- https://openalex.org/W4253182055
- https://openalex.org/W4293247451