Published September 4, 2013
| Version v1
Publication
Open
Detection of A. phagocytophilum and E. chaffeensis in Patient and Mouse Blood and Ticks by a Duplex Real-Time PCR Assay
Creators
- 1. Harbin Medical University
- 2. National Institute for Communicable Disease Control and Prevention
Description
Human granulocytic anaplasmosis (HGA) and human monocytic ehrlichiosis (HME) are emerging, tick-borne, zoonotic infectious diseases caused by Anaplasma phagocytophilum and Ehrlichia chaffeensis, respectively. Early diagnosis is essential for rapid clinical treatment to avoid misdiagnosis and severe patient outcomes. Simple, sensitive and reliable diagnostic methods are urgently needed. In this study, we developed a duplex real-time PCR assay targeting the A. phagocytophilum ankA gene and the E. chaffeensis TRP120 gene, respectively. The lowest limit of detection of the duplex real-time PCR assay was 100 copies of the targeted A. phagocytophilum ankA gene and the E. chaffeensis TRP120 gene per reaction, and the specificity was 100%. Detection in blood DNA samples from the acute stage of illness for 22 HGA cases and 8 HME cases indicated that the duplex real-time PCR assay was more sensitive than the nested PCR assay. The infection of Citellusundulatus Pallas with A. phagocytophilum and E. chaffeensis was first confirmed in Xinjiang Province and the positive rate was 3.1% for A. phagocytophilum, 6.3% for E. chaffeensis and 3.1% for co-infection with both pathogens. The rates of A. phagocytophilum and E. chaffeensis infection of D. silvarum ticks collected from Shanxi Province were 8.2% and 14.8%, respectively, and the co-infection rate was 3.3%. The rates of A. phagocytophilum and E. chaffeensis infection in H. longicornis ticks collected from Shandong Province were 1.6% and 6.3%, respectively, and the co-infection rate was 1.6%.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
يظهر كل من داء الكريات الحبيبية البشري (HGA) وداء الإرليخيات الوحدوي البشري (HME)، وهما من الأمراض المعدية الحيوانية المنشأ التي تنقلها القراد والتي تسببها البلعمة الكشمية (Anaplasma phagocytophilum) والإرليخية القشرية (Ehrlichia chaffeensis)، على التوالي. التشخيص المبكر ضروري للعلاج السريري السريع لتجنب التشخيص الخاطئ والنتائج الوخيمة للمريض. هناك حاجة ماسة إلى طرق تشخيصية بسيطة وحساسة وموثوقة. في هذه الدراسة، قمنا بتطوير اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل مزدوج في الوقت الفعلي يستهدف جين A. phagocytophilum ankA وجين E. chaffeensis TRP120، على التوالي. كان الحد الأدنى للكشف عن اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل المزدوج في الوقت الفعلي هو 100 نسخة من جين A. phagocytophilum ankA المستهدف وجين E. chaffeensis TRP120 لكل تفاعل، وكانت الخصوصية 100 ٪. أشار الكشف في عينات الحمض النووي للدم من المرحلة الحادة من المرض لـ 22 حالة HGA و 8 حالات HME إلى أن اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل المزدوج في الوقت الفعلي كان أكثر حساسية من اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل المتداخل. تم تأكيد إصابة سيتيلوسوندولاتوس بالاس بـ A. phagocytophilum و E. chaffeensis لأول مرة في مقاطعة شينجيانغ وكان المعدل الإيجابي 3.1 ٪ لـ A. phagocytophilum و 6.3 ٪ لـ E. chaffeensis و 3.1 ٪ للعدوى المشتركة مع كلا مسببي الأمراض. كانت معدلات عدوى A. phagocytophilum و E. chaffeensis لقراد D. silvarum التي تم جمعها من مقاطعة شانشي 8.2 ٪ و 14.8 ٪ على التوالي، وكان معدل الإصابة المصاحبة 3.3 ٪. كانت معدلات عدوى A. phagocytophilum و E. chaffeensis في قراد H. longicornis التي تم جمعها من مقاطعة شاندونغ 1.6 ٪ و 6.3 ٪ على التوالي، وكان معدل الإصابة المصاحبة 1.6 ٪.Translated Description (French)
L'anaplasmose granulocytaire humaine (HGA) et l'ehrlichiose monocytaire humaine (HME) sont des maladies infectieuses zoonotiques émergentes, transmises par les tiques, causées par Anaplasma phagocytophilum et Ehrlichia chaffeensis, respectivement. Un diagnostic précoce est essentiel pour un traitement clinique rapide afin d'éviter les erreurs de diagnostic et les conséquences graves pour les patients. Des méthodes de diagnostic simples, sensibles et fiables sont nécessaires de toute urgence. Dans cette étude, nous avons développé un test PCR en temps réel duplex ciblant le gène ankA d'A. phagocytophilum et le gène TRP120 d'E. chaffeensis, respectivement. La limite la plus basse de détection du test PCR en temps réel duplex était de 100 copies du gène ankA ciblé d'A. phagocytophilum et du gène TRP120 d'E. chaffeensis par réaction, et la spécificité était de 100 %. La détection dans des échantillons d'ADN sanguin au stade aigu de la maladie pour 22 cas de HGA et 8 cas de HME a indiqué que le test PCR en temps réel duplex était plus sensible que le test PCR imbriqué. L'infection de Citellusundulatus Pallas par A. phagocytophilum et E. chaffeensis a été confirmée pour la première fois dans la province du Xinjiang et le taux positif était de 3,1 % pour A. phagocytophilum, 6,3 % pour E. chaffeensis et 3,1 % pour la co-infection avec les deux agents pathogènes. Les taux d'infection par A. phagocytophilum et E. chaffeensis des tiques de D. silvarum prélevées dans la province du Shanxi étaient de 8,2 % et 14,8 %, respectivement, et le taux de co-infection était de 3,3 %. Les taux d'infection par A. phagocytophilum et E. chaffeensis chez les tiques H. longicornis prélevées dans la province du Shandong étaient de 1,6 % et 6,3 %, respectivement, et le taux de co-infection était de 1,6 %.Translated Description (Spanish)
La anaplasmosis granulocítica humana (HGA) y la ehrlichiosis monocítica humana (HME) son enfermedades infecciosas zoonóticas emergentes, transmitidas por garrapatas, causadas por Anaplasma phagocytophilum y Ehrlichia chaffeensis, respectivamente. El diagnóstico precoz es esencial para un tratamiento clínico rápido a fin de evitar diagnósticos erróneos y resultados graves para los pacientes. Se necesitan con urgencia métodos de diagnóstico sencillos, sensibles y fiables. En este estudio, desarrollamos un ensayo de PCR en tiempo real dúplex dirigido al gen ankA de A. phagocytophilum y al gen TRP120 de E. chaffeensis, respectivamente. El límite más bajo de detección del ensayo de PCR en tiempo real dúplex fue de 100 copias del gen ankA de A. phagocytophilum dirigido y el gen TRP120 de E. chaffeensis por reacción, y la especificidad fue del 100%. La detección en muestras de ADN sanguíneo de la etapa aguda de la enfermedad para 22 casos de HGA y 8 casos de HME indicó que el ensayo de PCR en tiempo real dúplex era más sensible que el ensayo de PCR anidado. La infección de Citellusundulatus Pallas con A. phagocytophilum y E. chaffeensis se confirmó por primera vez en la provincia de Xinjiang y la tasa positiva fue del 3,1% para A. phagocytophilum, del 6,3% para E. chaffeensis y del 3,1% para la coinfección con ambos patógenos. Las tasas de infección por A. phagocytophilum y E. chaffeensis de las garrapatas D. silvarum recolectadas en la provincia de Shanxi fueron del 8,2% y 14,8%, respectivamente, y la tasa de coinfección fue del 3,3%. Las tasas de infección por A. phagocytophilum y E. chaffeensis en garrapatas H. longicornis recolectadas de la provincia de Shandong fueron 1.6% y 6.3%, respectivamente, y la tasa de coinfección fue 1.6%.Files
journal.pone.0074796&type=printable.pdf
Files
(208.7 kB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:839b5974b345eda9053441f93f3ebc1a
|
208.7 kB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- الكشف عن A. phagocytophilum و E. chaffeensis في دم المريض والفأر والقراد عن طريق فحص تفاعل البوليميراز المتسلسل المزدوج في الوقت الفعلي
- Translated title (French)
- Détection d'A. phagocytophilum et d'E. chaffeensis dans le sang et les tiques du patient et de la souris par un test PCR duplex en temps réel
- Translated title (Spanish)
- Detección de A. phagocytophilum y E. chaffeensis en sangre y garrapatas de pacientes y ratones mediante un ensayo de PCR dúplex en tiempo real
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W2042582575
- DOI
- 10.1371/journal.pone.0074796
References
- https://openalex.org/W1735414357
- https://openalex.org/W1963845047
- https://openalex.org/W1967169621
- https://openalex.org/W1982451357
- https://openalex.org/W2006153151
- https://openalex.org/W2027354650
- https://openalex.org/W2047357395
- https://openalex.org/W2052050574
- https://openalex.org/W2060961438
- https://openalex.org/W2063929291
- https://openalex.org/W2068817817
- https://openalex.org/W2079938034
- https://openalex.org/W2091524646
- https://openalex.org/W2095675389
- https://openalex.org/W2099005713
- https://openalex.org/W2105162343
- https://openalex.org/W2106509761
- https://openalex.org/W2111191227
- https://openalex.org/W2112517692
- https://openalex.org/W2114215760
- https://openalex.org/W2114449759
- https://openalex.org/W2120295864
- https://openalex.org/W2127900907
- https://openalex.org/W2131608013
- https://openalex.org/W2140330056
- https://openalex.org/W2149116483
- https://openalex.org/W2150426811
- https://openalex.org/W2159835636
- https://openalex.org/W2167208380
- https://openalex.org/W2339594268
- https://openalex.org/W2431213904