Published November 27, 2012
| Version v1
Publication
Open
Sequential Activation of Classic PKC and Estrogen Receptor α Is Involved in Estradiol 17ß-D-Glucuronide-Induced Cholestasis
Creators
- 1. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
Description
Estradiol 17ß-d-glucuronide (E17G) induces acute cholestasis in rat with endocytic internalization of the canalicular transporters bile salt export pump (Abcb11) and multidrug resistance-associated protein 2 (Abcc2). Classical protein kinase C (cPKC) and PI3K pathways play complementary roles in E17G cholestasis. Since non-conjugated estradiol is capable of activating these pathways via estrogen receptor alpha (ERα), we assessed the participation of this receptor in the cholestatic manifestations of estradiol glucuronidated-metabolite E17G in perfused rat liver (PRL) and in isolated rat hepatocyte couplets (IRHC). In both models, E17G activated ERα. In PRL, E17G maximally decreased bile flow, and the excretions of dinitrophenyl-glutathione, and taurocholate (Abcc2 and Abcb11 substrates, respectively) by 60% approximately; preadministration of ICI 182,780 (ICI, ERα inhibitor) almost totally prevented these decreases. In IRHC, E17G decreased the canalicular vacuolar accumulation of cholyl-glycylamido-fluorescein (Abcb11 substrate) with an IC50 of 91±1 µM. ICI increased the IC50 to 184±1 µM, and similarly prevented the decrease in the canalicular vacuolar accumulation of the Abcc2 substrate, glutathione-methylfluorescein. ICI also completely prevented E17G-induced delocalization of Abcb11 and Abcc2 from the canalicular membrane, both in PRL and IRHC. The role of ERα in canalicular transporter internalization induced by E17G was confirmed in ERα-knocked-down hepatocytes cultured in collagen sandwich. In IRHC, the protection of ICI was additive to that produced by PI3K inhibitor wortmannin but not with that produced by cPKC inhibitor Gö6976, suggesting that ERα shared the signaling pathway of cPKC but not that of PI3K. Further analysis of ERα and cPKC activations induced by E17G, demonstrated that ICI did not affect cPKC activation whereas Gö6976 prevented that of ERα, indicating that cPKC activation precedes that of ERα. Conclusion: ERα is involved in the biliary secretory failure induced by E17G and its activation follows that of cPKC.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
يحفز استراديول 17 ß - d - glucuronide (E17G) ركود صفراوي حاد في الفئران مع الاستيعاب الداخلي لمضخة تصدير الملح الصفراوي لناقلات القناة (Abcb11) والبروتين المرتبط بمقاومة الأدوية المتعددة 2 (Abcc2). تلعب مسارات البروتين الكلاسيكي كيناز C (cPKC) و PI3K أدوارًا تكميلية في ركود صفراوي E17G. نظرًا لأن الاستراديول غير المقترن قادر على تنشيط هذه المسارات عبر مستقبلات هرمون الاستروجين ألفا (ERα)، فقد قمنا بتقييم مشاركة هذا المستقبل في المظاهر الركودية الصفراوية لاستراديول المستقلب الغلوكوروني E17G في كبد الفئران المنقى (PRL) وفي مقاطع خلايا الكبد الفئران المعزولة (IRHC). في كلا النموذجين، قام E17G بتنشيط ERα. في PRL، قلل E17G من تدفق الصفراء إلى أقصى حد، وحالت إفرازات ثنائي نيترو فينيل الجلوتاثيون، والتاوروكولات (ركائز Abcc2 و Abcb11، على التوالي) بنسبة 60 ٪ تقريبًا ؛ منع الإعطاء المسبق لـ ICI 182،780 (ICI، مثبط ERα) تمامًا تقريبًا هذه الانخفاضات. في IRHC، قلل E17G من التراكم الفجوي القنوي للفلوريسين cholyl - glycylamido (ركيزة Abcb11) مع IC50 من 91±1 ميكرومتر. زاد ICI من IC50 إلى 184±1 ميكرومتر، وبالمثل منع الانخفاض في التراكم الفجوي للقناة لركيزة Abcc2، الجلوتاثيون- ميثيل فلوريسين. كما منعت ICI تمامًا إزالة التوطين الناجم عن E17G لـ Abcb11 و Abcc2 من غشاء القناة، سواء في PRL و IRHC. تم تأكيد دور ERα في استيعاب الناقل القنوي الناجم عن E17G في خلايا الكبد ERα - knocked - down المستزرعة في شطيرة الكولاجين. في IRHC، كانت حماية ICI مضافة إلى تلك التي ينتجها مثبط PI3K wortmannin ولكن ليس مع تلك التي ينتجها مثبط cPKC Gö 6976، مما يشير إلى أن ERα تشارك مسار الإشارات لـ cPKC ولكن ليس لـ PI3K. أظهر المزيد من التحليل لتنشيط ERα و cPKC الناجم عن E17G، أن ICI لم يؤثر على تنشيط cPKC في حين أن Gö6976 منع تنشيط ERα، مما يشير إلى أن تنشيط cPKC يسبق تنشيط ERα. الاستنتاج: تشارك ERα في فشل الإفراز الصفراوي الناجم عن E17G ويتبع تنشيطه فشل cPKC.Translated Description (French)
L'estradiol 17ß-d-glucuronide (E17G) induit une cholestase aiguë chez le rat avec une internalisation endocytaire de la pompe d'exportation de sel biliaire des transporteurs canaliculaires (Abcb11) et de la protéine 2 associée à la multirésistance aux médicaments (Abcc2). La protéine kinase C classique (cPKC) et les voies PI3K jouent des rôles complémentaires dans la cholestase E17G. Étant donné que l'œstradiol non conjugué est capable d'activer ces voies via le récepteur des œstrogènes alpha (ERα), nous avons évalué la participation de ce récepteur dans les manifestations cholestatiques du métabolite glucuronidé de l'œstradiol E17G dans le foie perfusé de rat (PRL) et dans les couplets hépatocytes isolés de rat (IRHC). Dans les deux modèles, E17G a activé ERα. Dans le PRL, l'E17G a diminué au maximum le débit biliaire et les excrétions de dinitrophényl-glutathion et de taurocholate (substrats Abcc2 et Abcb11, respectivement) d'environ 60 % ; la pré-administration de ici 182 780 (ici, inhibiteur de l'ERα) a presque totalement empêché ces diminutions. Dans l'IRHC, l'E17G a diminué l'accumulation vacuolaire canaliculaire de cholyl-glycylamido-fluorescéine (substrat Abcb11) avec une CI50 de 91±1 µM. Ici a augmenté la CI50 à 184±1 µM et a également empêché la diminution de l'accumulation vacuolaire canaliculaire du substrat Abcc2, la glutathion-méthylfluorescéine. Ici a également complètement empêché la délocalisation induite par l'E17G de l'Abcb11 et de l'Abcc2 de la membrane canaliculaire, à la fois dans le PRL et l'IRHC. Le rôle de l'ERα dans l'internalisation du transporteur canaliculaire induite par l'E17G a été confirmé dans les hépatocytes knocked-down ERα cultivés en sandwich de collagène. Dans l'IRHC, la protection de l'ici était additionnelle à celle produite par la wortmannine, un inhibiteur de la PI3K, mais pas à celle produite par Gö6976, un inhibiteur de la cPKC, ce qui suggère que l'ERα partageait la voie de signalisation de la cPKC mais pas celle de la PI3K. Une analyse plus approfondie des activations de l'ERα et de la cPKC induites par l'E17G a démontré que l'ici n'affectait pas l'activation de la cPKC alors que Gö6976 empêchait celle de l'ERα, indiquant que l'activation de la cPKC précédait celle de l'ERα. Conclusion : ERα est impliqué dans la défaillance sécrétoire biliaire induite par E17G et son activation suit celle de cPKC.Translated Description (Spanish)
El estradiol 17ß-d-glucurónido (E17G) induce la colestasis aguda en ratas con internalización endocítica de los transportadores canaliculares bomba de exportación de sales biliares (Abcb11) y proteína 2 asociada a la resistencia a múltiples fármacos (Abcc2). Las vías clásicas de la proteína quinasa C (cPKC) y PI3K desempeñan funciones complementarias en la colestasis de E17G. Dado que el estradiol no conjugado es capaz de activar estas vías a través del receptor de estrógeno alfa (ERα), evaluamos la participación de este receptor en las manifestaciones colestásicas del metabolito glucuronidado de estradiol E17G en hígado de rata perfundido (PRL) y en pareados de hepatocitos de rata aislados (IRHC). En ambos modelos, E17G activó ERα. En PRL, E17G disminuyó al máximo el flujo biliar y las excreciones de dinitrofenil-glutatión y taurocolato (sustratos Abcc2 y Abcb11, respectivamente) en un 60% aproximadamente; la administración previa de ICI 182,780 (ICI, inhibidor de ERα) previno casi totalmente estas disminuciones. En IRHC, E17G disminuyó la acumulación vacuolar canalicular de colil-glicilamido-fluoresceína (sustrato Abcb11) con una IC50 de 91±1 µM. ICI aumentó la IC50 a 184±1 µM, y de manera similar evitó la disminución en la acumulación vacuolar canalicular del sustrato Abcc2, glutatión-metilfluoresceína. ICI también evitó completamente la deslocalización inducida por E17G de Abcb11 y Abcc2 de la membrana canalicular, tanto en PRL como en IRHC. El papel de ERα en la internalización del transportador canalicular inducida por E17G se confirmó en hepatocitos inactivados por ERα cultivados en sándwich de colágeno. En IRHC, la protección de ICI fue adicional a la producida por el inhibidor de PI3K wortmanina, pero no a la producida por el inhibidor de cPKC Gö6976, lo que sugiere que ERα compartía la vía de señalización de cPKC, pero no la de PI3K. Un análisis adicional de las activaciones de ERα y cPKC inducidas por E17G demostró que ICI no afectó la activación de cPKC, mientras que Gö6976 previno la de ERα, lo que indica que la activación de cPKC precede a la de ERα. Conclusión: ERα está involucrado en la falla secretora biliar inducida por E17G y su activación sigue a la de cPKC.Files
journal.pone.0050711&type=printable.pdf
Files
(850.3 kB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:6dec9eadec48666a17236d092f17b41e
|
850.3 kB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- يشترك التنشيط المتسلسل لـ PKC الكلاسيكي ومستقبل الاستروجين α في ركود صفراوي ناتج عن استراديول 17 ß - D - Glucuronide
- Translated title (French)
- L'activation séquentielle de la PKC classique et du récepteur α des œstrogènes est impliquée dans la cholestase induite par l'œstradiol 17ß-D-glucuronide
- Translated title (Spanish)
- La activación secuencial de la PKC clásica y el receptor de estrógeno α está involucrada en la colestasis inducida por 17ß-D-glucurónido de estradiol
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W2014352847
- DOI
- 10.1371/journal.pone.0050711
References
- https://openalex.org/W1494501400
- https://openalex.org/W1520299947
- https://openalex.org/W1565310327
- https://openalex.org/W1758789982
- https://openalex.org/W1775749144
- https://openalex.org/W1966320080
- https://openalex.org/W1971010409
- https://openalex.org/W1971749886
- https://openalex.org/W1977444087
- https://openalex.org/W1981735026
- https://openalex.org/W1985506908
- https://openalex.org/W1985938141
- https://openalex.org/W1990652066
- https://openalex.org/W2013074747
- https://openalex.org/W2016373638
- https://openalex.org/W2017751512
- https://openalex.org/W2034407790
- https://openalex.org/W2039735355
- https://openalex.org/W2047277267
- https://openalex.org/W2061613381
- https://openalex.org/W2062928980
- https://openalex.org/W2067124573
- https://openalex.org/W2068678447
- https://openalex.org/W2071653989
- https://openalex.org/W2073883348
- https://openalex.org/W2082828395
- https://openalex.org/W2085987340
- https://openalex.org/W2086883419
- https://openalex.org/W2087534874
- https://openalex.org/W2088604185
- https://openalex.org/W2091406251
- https://openalex.org/W2100943166
- https://openalex.org/W2109519875
- https://openalex.org/W2112930872
- https://openalex.org/W2118298427
- https://openalex.org/W2128651391
- https://openalex.org/W2129819037
- https://openalex.org/W2140744545
- https://openalex.org/W2142334766
- https://openalex.org/W2149450210
- https://openalex.org/W2158883999
- https://openalex.org/W2160984493
- https://openalex.org/W2169982896
- https://openalex.org/W2192996503
- https://openalex.org/W2329733569
- https://openalex.org/W4236229574
- https://openalex.org/W4256007676