Published February 17, 2015
| Version v1
Publication
Open
Immune Responses to HBsAg Conjugated to Protein D of Non-Typeable Haemophilus influenzae in Mice
Creators
- 1. National Institute for Viral Disease Control and Prevention
Description
Hepatitis B vaccine that contains an aluminum hydroxide adjuvant induces apoptotic death of Hepa 1-6 cells. Difficult-to-degrade chemical additives in vaccines effectively enhance vaccine immunogenicity, but also affect the host tissue. Identification of bio-molecules that are readily degraded and compatible in vivo as an adjuvant is important for vaccine research. The hapten-carrier effect suggests that stimulation of helper T (Th) cells by carrier adjuvants is feasible. Protein D (PD) of non-typeable Haemophilus influenzae covalently conjugated to some polysaccharide vaccines has been confirmed to convert T-cell independent (TI) antigens into T-cell dependent (TD) antigens, and elicit strong T-cell responses ultimately. Herein, we would substitube PD for aluminum hydroxide adjuvant in Hepatitis B vaccine.Truncated PD (amino acids 20-364) was expressed in Escherichia coli and purified by (NH4)2SO4 precipitation and DEAE chromatography. After evaluation of antigenicity by western blotting, PD was covalently conjugated to yeast-derived recombinant HBsAg by cross-linking with glutaraldehyde. Intramuscular immunization with the conjugate induced higher level of HBsAg-specific antibody than did HBsAg alone (p < 0.05), and was comparable to commercial Hepatitis B vaccine. During the surveillance period (days 35-105), anti-HBs titers were hold high. Moreover, the conjugated vaccine enhanced Th1 immune responses, while Th2 responses were also activated and induced an antibody response, as determined by IFN-γ ELISPOT and IgG1/IgG2a ratio assays.Recombinant truncated PD covalently conjugated to HBsAg antigen enhanced the immunogenicity of the antigen in mice simultaneously by humoral and cellular immune response, which would facilitate therapeutic hepatitis B vaccines.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
يؤدي لقاح التهاب الكبد B الذي يحتوي على مادة مساعدة من هيدروكسيد الألومنيوم إلى موت الخلايا المبرمج لخلايا هيبا 1-6. المضافات الكيميائية التي يصعب تحللها في اللقاحات تعزز بشكل فعال القدرة المناعية للقاح، ولكنها تؤثر أيضًا على الأنسجة المضيفة. تحديد الجزيئات الحيوية التي تتحلل بسهولة ومتوافقة في الجسم الحي كمساعد مهم لأبحاث اللقاح. يشير تأثير الناقل الناشبي إلى أن تحفيز الخلايا التائية المساعدة بواسطة المواد المساعدة الحاملة أمر ممكن. تم تأكيد أن البروتين د (PD) من المستدمية النزلية غير القابلة للنوع المقترن بشكل تساهمي ببعض لقاحات السكريات يحول مستضدات الخلايا التائية المستقلة (TI) إلى مستضدات تعتمد على الخلايا التائية (TD)، ويثير استجابات قوية للخلايا التائية في نهاية المطاف. هنا، سنستبدل PD بمواد هيدروكسيد الألومنيوم المساعدة في لقاح التهاب الكبد B. تم التعبير عن PD المقطوع (الأحماض الأمينية 20-364) في الإشريكية القولونية وتم تنقيته بواسطة ترسيب (NH4) 2SO4 واستشراب DEAE. بعد تقييم المستضد عن طريق النشاف الغربي، تم اقتران مرض باركنسون بشكل تساهمي مع HBsAg المؤتلف المشتق من الخميرة من خلال الربط المتقاطع مع الجلوتارالدهيد. التحصين العضلي مع الجسم المضاد المترافق المستحث بمستوى أعلى من الأجسام المضادة الخاصة بـ HBsAg مقارنة بـ HBsAg وحده (p < 0.05)، وكان مشابهًا للقاح التهاب الكبد B التجاري. خلال فترة المراقبة (الأيام 35-105)، كان عيار مضادات الهيموجلوبين مرتفعًا. علاوة على ذلك، عزز اللقاح المقترن الاستجابات المناعية لـ TH1، في حين تم تنشيط استجابات TH2 أيضًا واستحثت استجابة الأجسام المضادة، على النحو الذي تحدده مقايسات نسبة IFN - γ ELISPOT و IgG1/IgG2a. عزز مرض باركنسون المبتور المترافق مع مستضد HBsAg مناعة المستضد في الفئران في وقت واحد عن طريق الاستجابة المناعية الخلطية والخلوية، مما يسهل لقاحات التهاب الكبد B العلاجية.Translated Description (French)
Le vaccin contre l'hépatite B qui contient un adjuvant d'hydroxyde d'aluminium induit la mort apoptotique des cellules Hepa 1-6. Les additifs chimiques difficiles à dégrader dans les vaccins améliorent efficacement l'immunogénicité des vaccins, mais affectent également le tissu hôte. L'identification de biomolécules facilement dégradées et compatibles in vivo en tant qu'adjuvant est importante pour la recherche sur les vaccins. L'effet haptène-porteur suggère que la stimulation des cellules T (Th) auxiliaires par des adjuvants porteurs est faisable. Il a été confirmé que la protéine D (PD) d'Haemophilus influenzae non typable conjuguée de manière covalente à certains vaccins polysaccharidiques convertit les antigènes indépendants des lymphocytes T (TI) en antigènes dépendants des lymphocytes T (TD) et provoque finalement de fortes réponses des lymphocytes T. Ici, nous substituberions la PD pour l'adjuvant hydroxyde d'aluminium dans le vaccin contre l'hépatite B. La PD tronquée (acides aminés 20-364) a été exprimée chez Escherichia coli et purifiée par précipitation (NH4)2SO4 et chromatographie DEAE. Après évaluation de l'antigénicité par Western blot, la MP a été conjuguée de manière covalente à l'AgHBs recombinant dérivé de levure par réticulation avec le glutaraldéhyde. L'immunisation intramusculaire avec le conjugué a induit un taux plus élevé d'anticorps spécifiques de l'AgHBs que l'AgHBs seul (p < 0,05) et était comparable au vaccin commercial contre l'hépatite B. Pendant la période de surveillance (jours 35-105), les titres anti-HBs étaient élevés. De plus, le vaccin conjugué améliorait les réponses immunitaires Th1, tandis que les réponses Th2 étaient également activées et induisaient une réponse anticorps, comme déterminé par les tests ELISPOT IFN-γ et le rapport IgG1/IgG2a. La PD tronquée recombinante conjuguée de manière covalente à l'antigène HBsAg améliorait l'immunogénicité de l'antigène chez la souris simultanément par une réponse immunitaire humorale et cellulaire, ce qui faciliterait les vaccins thérapeutiques contre l'hépatite B.Translated Description (Spanish)
La vacuna contra la hepatitis B que contiene un adyuvante de hidróxido de aluminio induce la muerte apoptótica de las células Hepa 1-6. Los aditivos químicos difíciles de degradar en las vacunas mejoran eficazmente la inmunogenicidad de la vacuna, pero también afectan al tejido del huésped. La identificación de biomoléculas que se degradan fácilmente y son compatibles in vivo como adyuvante es importante para la investigación de vacunas. El efecto de portador de hapteno sugiere que la estimulación de las células T (Th) auxiliares por adyuvantes portadores es factible. Se ha confirmado que la proteína D (PD) de Haemophilus influenzae no tipificable conjugada covalentemente con algunas vacunas de polisacáridos convierte los antígenos independientes de células T (TI) en antígenos dependientes de células T (TD) y, en última instancia, provoca fuertes respuestas de células T. Aquí, sustituiríamos PD por adyuvante de hidróxido de aluminio en la vacuna contra la hepatitis B. La PD truncada (aminoácidos 20-364) se expresó en Escherichia coli y se purificó mediante precipitación con (NH4)2SO4 y cromatografía DEAE. Después de la evaluación de la antigenicidad mediante transferencia Western, la PD se conjugó covalentemente con HBsAg recombinante derivado de levadura mediante reticulación con glutaraldehído. La inmunización intramuscular con el conjugado indujo un mayor nivel de anticuerpo específico de HBsAg que el HBsAg solo (p < 0.05), y fue comparable a la vacuna comercial contra la hepatitis B. Durante el periodo de vigilancia (días 35-105), los títulos de anti-HBs se mantuvieron altos. Además, la vacuna conjugada mejoró las respuestas inmunitarias Th1, mientras que las respuestas Th2 también se activaron e indujeron una respuesta de anticuerpos, según lo determinado por los ensayos de relación IFN-γ ELISpot e IgG1/IgG2a. La PD truncada recombinante conjugada covalentemente con el antígeno HBsAg mejoró la inmunogenicidad del antígeno en ratones simultáneamente por la respuesta inmunitaria humoral y celular, lo que facilitaría las vacunas terapéuticas contra la hepatitis B.Files
journal.pone.0117736&type=printable.pdf
Files
(839.1 kB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:6bb3aa820693279db4c1925da5b69291
|
839.1 kB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- الاستجابات المناعية لـ HBsAg المقترن بالبروتين D من المستدمية النزلية غير القابلة للنوع في الفئران
- Translated title (French)
- Réponses immunitaires à l'AgHBs conjugué à la protéine D d'Haemophilus influenzae non typable chez la souris
- Translated title (Spanish)
- Respuestas inmunitarias a HBsAg conjugado con proteína D de Haemophilus influenzae no tipificable en ratones
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W2059392037
- DOI
- 10.1371/journal.pone.0117736
References
- https://openalex.org/W147819812
- https://openalex.org/W1526379640
- https://openalex.org/W1822060564
- https://openalex.org/W1977395168
- https://openalex.org/W1978562295
- https://openalex.org/W1979354705
- https://openalex.org/W1996547056
- https://openalex.org/W2010924299
- https://openalex.org/W2025047212
- https://openalex.org/W2030237079
- https://openalex.org/W2050224530
- https://openalex.org/W2074165104
- https://openalex.org/W2083547267
- https://openalex.org/W2083579463
- https://openalex.org/W2100701182
- https://openalex.org/W2150566670
- https://openalex.org/W2160431565
- https://openalex.org/W2162422751
- https://openalex.org/W2234713759
- https://openalex.org/W2427021487
- https://openalex.org/W286959731