Published August 1, 2007 | Version v1
Publication Open

Open Reading Frame 8a of the Human Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus Not Only Promotes Viral Replication but Also Induces Apoptosis

Creators

  • 1. National Center for AIDS/STD Control and Prevention,China CDC
  • 2. National Yang Ming Chiao Tung University
  • 3. Taipei Institute of Pathology
  • 4. Taipei Veterans General Hospital
  • 5. Institute of Microbiology

Description

A unique genomic difference between human and civet severe acute respiratory syndrome coronaviruses (SARS-CoVs) is that the former has a deletion of 29 nucleotides from open reading frame (orf) 8a' that results in the generation of orf8a and orf8b. The objectives of the present study were to analyze antibody reactivity to ORF8a in patients with SARS and to elucidate the function of ORF8a.Western-blot and immunofluorescent antibody assays were used to detect anti-ORF8a antibody. SARS-CoV HKU39849 was used to infect stable clones expressing ORF8a and cells transfected with small interfering RNA (siRNA). The virus loads (VLs) and cytopathic effects (CPEs) were recorded. Confocal microscopy and several mitochondria-related tests were used to study the function of ORF8a.Two (5.4%) of 37 patients with SARS had anti-ORF8a antibodies. The VLs in the stable clones expressing ORF8a were significantly higher than those in control subjects 5 days after infection. siRNA against orf8a significantly reduced VLs and interrupted the CPE. ORF8a was found to be localized in mitochondria, and overexpression resulted in increases in mitochondrial transmembrane potential, reactive oxygen species production, caspase 3 activity, and cellular apoptosis.ORF8a not only enhances viral replication but also induces apoptosis through a mitochondria-dependent pathway.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

يتمثل الاختلاف الجيني الفريد بين فيروسات كورونا المتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة للإنسان والزباد (SARS - CoVs) في أن الأول يحتوي على حذف 29 نيوكليوتيدًا من إطار القراءة المفتوح (ORF) 8a 'مما يؤدي إلى توليد ORF8a و ORF8b. كانت أهداف هذه الدراسة هي تحليل تفاعل الأجسام المضادة مع ORF8a في المرضى الذين يعانون من السارس وتوضيح وظيفة ORF8a.Western-blot واستخدمت مقايسات الأجسام المضادة المناعية للكشف عن الأجسام المضادة لـ ORF8a. تم استخدام فيروس سارس- كوف HKU39849 لإصابة المستنسخين المستقرين الذين يعبرون عن ORF8a والخلايا المنقولة مع الحمض النووي الريبي المتداخل الصغير (siRNA). تم تسجيل أحمال الفيروس (VLs) وتأثيرات الاعتلال الخلوي (CPEs). تم استخدام الفحص المجهري متحد البؤر والعديد من الاختبارات المتعلقة بالميتوكوندريا لدراسة وظيفة ORF8a.Two (5.4 ٪) من 37 مريضًا مصابًا بمتلازمة الجهاز التنفسي الحادة الوخيمة لديهم أجسام مضادة لـ ORF8a. كانت VLs في المستنسخات المستقرة التي تعبر عن ORF8a أعلى بكثير من تلك الموجودة في الأشخاص الخاضعين للرقابة بعد 5 أيام من الإصابة. خفضت siRNA ضد orf8a بشكل كبير VLs وقطعت CPE. وُجد أن ORF8a موضعي في الميتوكوندريا، وأدى التعبير المفرط إلى زيادات في إمكانات الغشاء عبر الميتوكوندريا، وإنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية، ونشاط كاسباس 3، والاستماتة الخلوية. لا يعزز ORF8a التكاثر الفيروسي فحسب، بل يحفز أيضًا الاستماتة من خلال مسار يعتمد على الميتوكوندريا.

Translated Description (French)

Une différence génomique unique entre les coronavirus du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV) de l'homme et de la civette est que le premier a une délétion de 29 nucléotides du cadre de lecture ouvert (orf) 8a' qui entraîne la génération de orf8a et orf8b. Les objectifs de la présente étude étaient d'analyser la réactivité des anticorps à l'ORF8a chez les patients atteints du SRAS et d'élucider la fonction de l'ORF8a. Des dosages d'anticorps par Western-blot et immunofluorescents ont été utilisés pour détecter l'anticorps anti-ORF8a. Le SARS-CoV HKU39849 a été utilisé pour infecter des clones stables exprimant ORF8a et des cellules transfectées avec de petits ARN interférents (ARNsi). Les charges virales (CV) et les effets cytopathiques (CPE) ont été enregistrés. La microscopie confocale et plusieurs tests liés aux mitochondries ont été utilisés pour étudier la fonction de l'ORF8a.Deux (5,4 %) des 37 patients atteints du SRAS avaient des anticorps anti-ORF8a. Les CV dans les clones stables exprimant ORF8a étaient significativement plus élevées que celles des sujets témoins 5 jours après l'infection. Le siRNA contre orf8a a significativement réduit les CV et interrompu l'ECP. ORF8a s'est avéré localisé dans les mitochondries, et la surexpression a entraîné une augmentation du potentiel transmembranaire mitochondrial, de la production d'espèces réactives de l'oxygène, de l'activité de la caspase 3 et de l'apoptose cellulaire. ORF8a améliore non seulement la réplication virale, mais induit également l'apoptose par une voie dépendante des mitochondries.

Translated Description (Spanish)

Una diferencia genómica única entre los coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave (SARS-CoV) humanos y de las civetas es que el primero tiene una deleción de 29 nucleótidos del marco de lectura abierto (orf) 8a' que da como resultado la generación de orf8a y orf8b. Los objetivos del presente estudio fueron analizar la reactividad de los anticuerpos a ORF8a en pacientes con SARS y dilucidar la función de ORF8a. Se utilizaron ensayos de Western-blot y de anticuerpos inmunofluorescentes para detectar el anticuerpo anti-ORF8a. Se utilizó SARS-CoV HKU39849 para infectar clones estables que expresan ORF8a y células transfectadas con ARN de interferencia pequeño (ARNip). Se registraron las cargas de virus (VL) y los efectos citopáticos (CPE). La microscopía confocal y varias pruebas relacionadas con las mitocondrias se utilizaron para estudiar la función de ORF8a. Dos (5.4%) de 37 pacientes con SARS tenían anticuerpos anti-ORF8a. Los VL en los clones estables que expresan ORF8a fueron significativamente más altos que los de los sujetos de control 5 días después de la infección. El ARNip contra orf8a redujo significativamente los VL e interrumpió el CPE. Se encontró que ORF8a se localizaba en las mitocondrias, y la sobreexpresión dio como resultado aumentos en el potencial transmembrana mitocondrial, la producción de especies reactivas de oxígeno, la actividad de la caspasa 3 y la apoptosis celular. ORF8a no solo mejora la replicación viral sino que también induce la apoptosis a través de una vía dependiente de las mitocondrias.

Files

196-3-405.pdf.pdf

Files (93 Bytes)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:b0d506893d4802090edf1644f5f082cd
93 Bytes
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
إطار القراءة المفتوح 8 أ لفيروس كورونا المتلازمة التنفسية الحادة الوخيمة البشرية لا يعزز التكاثر الفيروسي فحسب، بل يحفز أيضًا موت الخلايا المبرمج
Translated title (French)
Le cadre de lecture ouvert 8a du coronavirus humain du syndrome respiratoire aigu sévère favorise non seulement la réplication virale, mais induit également l'apoptose
Translated title (Spanish)
Marco de lectura abierto 8a del coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave humano no solo promueve la replicación viral, sino que también induce la apoptosis

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2170086807
DOI
10.1086/519166

Is supplement to
https://openalex.org/W81153105 (Other)
https://openalex.org/W4205713785 (Other)
https://openalex.org/W3016766501 (Other)
https://openalex.org/W2901033488 (Other)
https://openalex.org/W2140635480 (Other)
https://openalex.org/W2129463218 (Other)
https://openalex.org/W2126915562 (Other)
https://openalex.org/W2054466211 (Other)
https://openalex.org/W1986096258 (Other)
https://openalex.org/W1493340299 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
China

References

  • https://openalex.org/W1489789360
  • https://openalex.org/W1491556965
  • https://openalex.org/W1555956901
  • https://openalex.org/W1585781020
  • https://openalex.org/W1670333811
  • https://openalex.org/W1786786680
  • https://openalex.org/W1967669339
  • https://openalex.org/W1969699638
  • https://openalex.org/W1974201749
  • https://openalex.org/W1975169783
  • https://openalex.org/W1976741900
  • https://openalex.org/W1981056903
  • https://openalex.org/W1982687089
  • https://openalex.org/W1995670143
  • https://openalex.org/W2015013728
  • https://openalex.org/W2025170735
  • https://openalex.org/W2032673826
  • https://openalex.org/W2044296969
  • https://openalex.org/W2045194203
  • https://openalex.org/W2052607700
  • https://openalex.org/W2067550112
  • https://openalex.org/W2080869494
  • https://openalex.org/W2080935181
  • https://openalex.org/W2097360249
  • https://openalex.org/W2104548316
  • https://openalex.org/W2104629882
  • https://openalex.org/W2108959752
  • https://openalex.org/W2110565898
  • https://openalex.org/W2114419181
  • https://openalex.org/W2115195851
  • https://openalex.org/W2116586125
  • https://openalex.org/W2118495604
  • https://openalex.org/W2130450914
  • https://openalex.org/W2130481614
  • https://openalex.org/W2134061616
  • https://openalex.org/W2138594452
  • https://openalex.org/W2140338292
  • https://openalex.org/W2141851027
  • https://openalex.org/W2157391239
  • https://openalex.org/W2159857626
  • https://openalex.org/W2160601806
  • https://openalex.org/W2169198329
  • https://openalex.org/W2169670265
  • https://openalex.org/W2171291163
  • https://openalex.org/W2183711318
  • https://openalex.org/W2314927446
  • https://openalex.org/W2348172023
  • https://openalex.org/W2361955106
  • https://openalex.org/W2411273885