Published November 4, 2014
| Version v1
Publication
Open
Development of a Blocking ELISA Based on a Monoclonal Antibody against a Predominant Epitope in Non-Structural Protein 3B2 of Foot-and-Mouth Disease Virus for Differentiating Infected from Vaccinated Animals
Creators
- 1. Lanzhou Veterinary Research Institute
Description
A monoclonal antibody (McAb) against non-structural protein (NSP) 3B of foot-mouth-disease virus (FMDV) (3B4B1) was generated and shown to recognize a conserved epitope spanning amino acids 24-32 of 3B (GPYAGPMER) by peptide screening ELISA. This epitope was further shown to be a unique and predominant B cell epitope in 3B2, as sera from animals infected with different serotypes of FMDV blocked the ability of McAb 3B4B1 to bind to NSP 2C3AB. Also, a polyclonal antibody against NSP 2C was produced in a rabbit vaccinated with 2C epitope regions expressed in E. coli. Using McAb 3B4B1 and the 2C polyclonal antibody, a solid-phase blocking ELISA (SPB-ELISA) was developed for the detection of antibodies against NSP 2C3AB to distinguish FMDV-infected from vaccinated animals (DIVA test). The parameters for this SPB-ELISA were established by screening panels of sera of different origins. Serum samples with a percent inhibition (PI) greater than or equal to 46% were considered to be from infected animals, and a PI lower than 46% was considered to indicate a non-infected animal. This test showed a similar performance as the commercially available PrioCHECK NS ELISA. This is the first description of the conserved and predominant GPYAGPMER epitope of 3B and also the first report of a DIVA test for FMDV NSP 3B based on a McAb against this epitope.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
تم إنشاء جسم مضاد أحادي النسيلة (McAb) ضد البروتين غير الهيكلي (NSP) 3B من فيروس مرض الفم والقدم (FMDV) (3B4B1) وتبين أنه يتعرف على حاتمة محفوظة تغطي الأحماض الأمينية 24-32 من 3B (GPYAGPMER) عن طريق فحص الببتيد ELISA. كما تبين أن هذه الحاتمة هي حاتمة خلية ب فريدة من نوعها وسائدة في 3B2، حيث أن الأمصال من الحيوانات المصابة بأنماط مصلية مختلفة من FMDV منعت قدرة McAb 3B4B1 على الارتباط بـ NSP 2C3AB. كما تم إنتاج جسم مضاد متعدد النسائل ضد NSP 2C في أرنب تم تطعيمه بمناطق حاتمة 2C معبر عنها بالإشريكية القولونية. باستخدام McAb 3B4B1 والجسم المضاد متعدد النسائل 2C، تم تطوير ELISA لحجب المرحلة الصلبة (SPB - ELISA) للكشف عن الأجسام المضادة ضد NSP 2C3AB للتمييز بين FMDV المصابة والحيوانات الملقحة (اختبار DIVA). تم تحديد معايير SPB - ELISA من خلال لوحات فحص الأمصال من أصول مختلفة. تم اعتبار عينات المصل ذات النسبة المئوية للتثبيط (PI) أكبر من أو تساوي 46 ٪ من الحيوانات المصابة، وتم اعتبار PI أقل من 46 ٪ للإشارة إلى حيوان غير مصاب. أظهر هذا الاختبار أداءً مشابهًا لـ PRIOCHECK NS ELISA المتاح تجاريًا. هذا هو الوصف الأول لحاتمة GPYAGPMER المحفوظة والسائدة من 3B وأيضًا التقرير الأول لاختبار DIVA لـ FMDV NSP 3B بناءً على McAb ضد هذه الحاتمة.Translated Description (French)
Un anticorps monoclonal (McAb) contre la protéine non structurelle (NSP) 3B du virus de la fièvre aphteuse (FMDV) (3B4B1) a été généré et montré pour reconnaître un épitope conservé couvrant les acides aminés 24-32 de 3B (GPYAGPMER) par ELISA de criblage peptidique. Il a en outre été démontré que cet épitope était un épitope unique et prédominant des lymphocytes B dans 3B2, car les sérums d'animaux infectés par différents sérotypes de FMDV bloquaient la capacité de McAb 3B4B1 à se lier à NSP 2C3AB. De plus, un anticorps polyclonal contre NSP 2C a été produit chez un lapin vacciné avec des régions épitopiques 2C exprimées dans E. coli. En utilisant McAb 3B4B1 et l'anticorps polyclonal 2C, un ELISA bloquant en phase solide (SPB-ELISA) a été développé pour la détection des anticorps contre NSP 2C3AB afin de distinguer les animaux infectés par le FMDV des animaux vaccinés (test DIVA). Les paramètres de ce SPB-ELISA ont été établis par criblage de panels de sérums d'origines différentes. Les échantillons de sérum avec un pourcentage d'inhibition (PI) supérieur ou égal à 46 % ont été considérés comme provenant d'animaux infectés, et un PI inférieur à 46 % a été considéré comme indiquant un animal non infecté. Ce test a montré une performance similaire à celle du PrioCHECK NS ELISA disponible dans le commerce. Ceci est la première description de l'épitope GPYAGPMER conservé et prédominant de 3B et également le premier rapport d'un test DIVA pour FMDV NSP 3B basé sur un McAb contre cet épitope.Translated Description (Spanish)
Se generó un anticuerpo monoclonal (McAb) contra la proteína no estructural (NSP) 3B del virus de la enfermedad de la boca y los pies (FMDV) (3B4B1) y se demostró que reconoce un epítopo conservado que abarca los aminoácidos 24-32 de 3B (GPYAGPMER) mediante ELISA de detección de péptidos. Además, se demostró que este epítopo es un epítopo de linfocitos B único y predominante en 3B2, ya que los sueros de animales infectados con diferentes serotipos de FMDV bloquearon la capacidad de McAb 3B4B1 para unirse a NSP 2C3AB. Además, se produjo un anticuerpo policlonal contra NSP 2C en un conejo vacunado con regiones de epítopo 2C expresadas en E. coli. Utilizando McAb 3B4B1 y el anticuerpo policlonal 2C, se desarrolló un ELISA de bloqueo en fase sólida (SPB-ELISA) para la detección de anticuerpos contra NSP 2C3AB para distinguir los animales infectados por FMDV de los vacunados (prueba DIVA). Los parámetros para este SPB-ELISA se establecieron mediante paneles de selección de sueros de diferentes orígenes. Se consideró que las muestras de suero con un porcentaje de inhibición (IP) mayor o igual al 46% provenían de animales infectados, y se consideró que un IP inferior al 46% indicaba un animal no infectado. Esta prueba mostró un rendimiento similar al ELISA PrioCHECK NS disponible comercialmente. Esta es la primera descripción del epítopo GPYAGPMER conservado y predominante de 3B y también el primer informe de una prueba DIVA para FMDV NSP 3B basada en un McAb contra este epítopo.Files
journal.pone.0111737&type=printable.pdf
Files
(1.3 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:6abbedae761dfd16d9c1553701d88635
|
1.3 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- تطوير ELISA الحجب بناءً على جسم مضاد أحادي النسيلة ضد حاتمة سائدة في البروتين غير الهيكلي 3B2 لفيروس مرض الحمى القلاعية للتمييز بين المصابين والحيوانات الملقحة
- Translated title (French)
- Développement d'un ELISA bloquant basé sur un anticorps monoclonal contre un épitope prédominant dans la protéine non structurelle 3B2 du virus de la fièvre aphteuse pour différencier les animaux infectés des animaux vaccinés
- Translated title (Spanish)
- Desarrollo de un ELISA de bloqueo basado en un anticuerpo monoclonal contra un epítopo predominante en la proteína no estructural 3B2 del virus de la fiebre aftosa para diferenciar a los animales infectados de los vacunados
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W2071842132
- DOI
- 10.1371/journal.pone.0111737
References
- https://openalex.org/W169573040
- https://openalex.org/W1979489081
- https://openalex.org/W1983368973
- https://openalex.org/W1985794653
- https://openalex.org/W1985874906
- https://openalex.org/W1991123621
- https://openalex.org/W2011827052
- https://openalex.org/W2021014107
- https://openalex.org/W2027437986
- https://openalex.org/W2050583820
- https://openalex.org/W2051850311
- https://openalex.org/W2051880574
- https://openalex.org/W2074517161
- https://openalex.org/W2105347706
- https://openalex.org/W2110022580
- https://openalex.org/W2148319062