Published March 8, 2022 | Version v1
Publication Open

Preparation of mixed-mode stationary phase for separation of peptides and proteins in high performance liquid chromatography

Creators

  • 1. Taif University
  • 2. University of Haripur
  • 3. University of Swat

Description

Porous silica particles were prepared by sol-gel method with some modification to get wide-pore particles. These particles were derivatized with N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) and styrene by reversible addition fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization to prepare N-phenylmaleimide embedded polystyrene (PMP) stationary phases. Narrow bore stainless steel column (100 × 1.8 mm i.d) was packed by slurry packing method. The chromatographic performance of PMP column was evaluated for the separation of synthetic peptides mixture composed of five peptides (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine enkephalin) and tryptic digest of human serum albumin (HAS) respectively. Number of theoretical plates as high as 280,000 plates/m were obtained for peptides mixture at optimum elution condition. Separation performance of the developed column was compared with commercial Ascentis Express RP-Amide column and it was observed that separation performance of PMP column was better than commercial column in terms of separation efficiency and resolution.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

تم تحضير جزيئات السيليكا المسامية بطريقة سول جل مع بعض التعديل للحصول على جزيئات واسعة المسام. تم اشتقاق هذه الجسيمات باستخدام N - phenylmaleimide - methylvinylisocyanate (PMI) والستايرين عن طريق بلمرة سلسلة تجزئة إضافية قابلة للعكس (RAFT) لتحضير أطوار ثابتة من البوليسترين المضمن N - phenylmaleimide (PMP). تم تعبئة عمود الفولاذ المقاوم للصدأ ذو التجويف الضيق (100 × 1.8 مم) بطريقة تعبئة الملاط. تم تقييم الأداء الكروماتوغرافي لعمود PMP لفصل خليط الببتيدات الاصطناعية المكون من خمسة ببتيدات (Gly - Tyr، Gly - Leu - Tyr، Gly - Gly - Tyr - Arg، Tyr - Ile - Gly - Ser - Arg، Leucine enkephalin) والهضم التريبتي لألبومين المصل البشري (HAS) على التوالي. تم الحصول على عدد من الألواح النظرية يصل إلى 280،000 لوحة/م لخليط الببتيدات في حالة شطف مثالية. تمت مقارنة أداء الفصل للعمود المطور بعمود Ascentis Express RP - Amide التجاري ولوحظ أن أداء الفصل لعمود PMP كان أفضل من العمود التجاري من حيث كفاءة الفصل والقرار.

Translated Description (French)

Des particules de silice poreuses ont été préparées par la méthode sol-gel avec quelques modifications pour obtenir des particules à larges pores. Ces particules ont été dérivatisées avec du N-phénylmaléimide-méthylvinylisocyanate (PMI) et du styrène par polymérisation par transfert de chaîne à fragmentation par addition réversible (RAFT) pour préparer des phases stationnaires de polystyrène (PMP) noyées dans du N-phénylmaléimide. La colonne en acier inoxydable à alésage étroit (100 × 1,8 mm i.d) a été emballée par la méthode d'emballage en suspension. La performance chromatographique de la colonne PMP a été évaluée pour la séparation du mélange de peptides synthétiques composé de cinq peptides (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine enképhaline) et du digestat tryptique de l'albumine sérique humaine (HAS) respectivement. Un nombre de plaques théoriques aussi élevé que 280 000 plaques/m a été obtenu pour le mélange de peptides dans des conditions d'élution optimales. Les performances de séparation de la colonne développée ont été comparées à celles de la colonne commerciale Ascentis Express RP-Amide et il a été observé que les performances de séparation de la colonne PMP étaient meilleures que celles de la colonne commerciale en termes d'efficacité de séparation et de résolution.

Translated Description (Spanish)

Las partículas de sílice porosas se prepararon mediante el método sol-gel con alguna modificación para obtener partículas de poro ancho. Estas partículas se derivatizaron con N-fenilmaleimida-metilvinilisocianato (PMI) y estireno mediante polimerización por transferencia de cadena de fragmentación por adición reversible (RAFT) para preparar fases estacionarias de poliestireno (PMP) incrustado en N-fenilmaleimida. La columna de acero inoxidable de diámetro estrecho (100 × 1,8 mm d.i.) se empaquetó mediante el método de empaquetamiento de lechada. El rendimiento cromatográfico de la columna PMP se evaluó para la separación de la mezcla de péptidos sintéticos compuesta por cinco péptidos (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucina encefalina) y el digesto tríptico de albúmina sérica humana (HAS) respectivamente. Se obtuvo un número de placas teóricas tan alto como 280.000 placas/m para la mezcla de péptidos en condiciones de elución óptimas. El rendimiento de separación de la columna desarrollada se comparó con la columna comercial Ascentis Express RP-Amide y se observó que el rendimiento de separación de la columna PMP era mejor que el de la columna comercial en términos de eficiencia y resolución de separación.

Files

s41598-022-08074-7.pdf.pdf

Files (2.0 MB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:348af6ca2fabd434088614425438db71
2.0 MB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
إعداد مرحلة ثابتة مختلطة لفصل الببتيدات والبروتينات في كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء
Translated title (French)
Préparation de la phase stationnaire en mode mixte pour la séparation des peptides et des protéines en chromatographie liquide haute performance
Translated title (Spanish)
Preparación de la fase estacionaria de modo mixto para la separación de péptidos y proteínas en cromatografía líquida de alta resolución

Identifiers

Other
https://openalex.org/W4220799581
DOI
10.1038/s41598-022-08074-7

Is supplement to
https://openalex.org/W4230908291 (Other)
https://openalex.org/W4205307812 (Other)
https://openalex.org/W3141461669 (Other)
https://openalex.org/W2952597656 (Other)
https://openalex.org/W2913751387 (Other)
https://openalex.org/W2887495713 (Other)
https://openalex.org/W2377052952 (Other)
https://openalex.org/W2048284370 (Other)
https://openalex.org/W2028410242 (Other)
https://openalex.org/W1981403462 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
Pakistan

References

  • https://openalex.org/W1971149134
  • https://openalex.org/W1980468320
  • https://openalex.org/W1990282317
  • https://openalex.org/W1993777051
  • https://openalex.org/W1996721996
  • https://openalex.org/W2020008249
  • https://openalex.org/W2050000500
  • https://openalex.org/W2057596035
  • https://openalex.org/W2058016790
  • https://openalex.org/W2063859419
  • https://openalex.org/W2073581330
  • https://openalex.org/W2082062260
  • https://openalex.org/W2083531531
  • https://openalex.org/W2085456046
  • https://openalex.org/W2092650743
  • https://openalex.org/W2092654973
  • https://openalex.org/W2127569371
  • https://openalex.org/W2147088808
  • https://openalex.org/W2158976074
  • https://openalex.org/W2164036543
  • https://openalex.org/W2332608167
  • https://openalex.org/W2742666439
  • https://openalex.org/W2763066384
  • https://openalex.org/W2783718385
  • https://openalex.org/W2785465371
  • https://openalex.org/W286249135
  • https://openalex.org/W2901769482
  • https://openalex.org/W2914018237
  • https://openalex.org/W2937018101
  • https://openalex.org/W2945959725
  • https://openalex.org/W2947084798
  • https://openalex.org/W2948656336
  • https://openalex.org/W2949614845
  • https://openalex.org/W2978021205
  • https://openalex.org/W3010607488
  • https://openalex.org/W3011713302
  • https://openalex.org/W3035787171
  • https://openalex.org/W3036883131
  • https://openalex.org/W3037942884
  • https://openalex.org/W3122742302
  • https://openalex.org/W3133988819
  • https://openalex.org/W3138199563
  • https://openalex.org/W3190823648
  • https://openalex.org/W4252571610