Integrin-Linked Kinase (ILK) Regulates Urinary Stem Cells Differentiation into Smooth Muscle via NF-κB Signal Pathway
Creators
- 1. South China University of Technology
- 2. Guangzhou Medical University
- 3. Guangzhou First People's Hospital
- 4. Peking University
- 5. Peking University Third Hospital
Description
Objectives. Urinary stem cells (USCs) have the capacity for unlimited growth and are promising tools for the investigations of cell differentiation and urinary regeneration. However, the limited life span significantly restricts their usefulness. This study is aimed at exploring the effect of integrin-linked kinase (ILK) on the smooth muscle cells (SMCs) differentiation of the dog USCs and investigating its molecular mechanism. Methods. An immortalized USCs cell line with the molecular markers and biological functions was prepared. After successfully inducing the differentiation of USCs into SMCs, the expression level of the unique key factor and its mechanisms in this process was determined through real-time polymerase chain reaction, Western blot, or Immunofluorescence staining. Results. We found that high cell density promoted USCs differentiation SMCs, and ILK was necessary for USCs differentiation into SMCs. Knocking down ILK decreased the expression of SMCs specific-marker, while using a selective ILK agonist increased the expression of SMCs specific-marker. Furthermore, ILK regulated SMCs differentiation in part through the activation of NF-κB pathway in USCs. A NF-κB activity assay showed overexpression of ILK could significantly upregulate NF-κB p50 expression, and NF-κB p50 acts as downstream signal molecular of ILK. Conclusion. High cell density induces the differentiation of USCs into SMCs, and ILK is a key regulator of myogenesis. Furthermore, NF-κB signaling pathway might play a crucial role in this process.
Translated Descriptions
Translated Description (Arabic)
الأهداف. تتمتع الخلايا الجذعية البولية (USCs) بالقدرة على النمو غير المحدود وهي أدوات واعدة لفحص تمايز الخلايا وتجديد البول. ومع ذلك، فإن العمر الافتراضي المحدود يحد بشكل كبير من فائدتها. تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير الكيناز المرتبط بالتكامل (ILC) على تمايز الخلايا العضلية الملساء (SMCs) للكلب USCs والتحقيق في آليته الجزيئية. الطرق. تم إعداد خط خلية USCS خالدة مع العلامات الجزيئية والوظائف البيولوجية. بعد النجاح في استحثاث تمايز الخلايا الجذعية المتحدة في الخلايا الجذعية الصغيرة، تم تحديد مستوى التعبير عن العامل الرئيسي الفريد وآلياته في هذه العملية من خلال تفاعل البلمرة المتسلسل في الوقت الفعلي، أو اللطخة الغربية، أو تلطيخ التألق المناعي. النتائج. وجدنا أن كثافة الخلايا العالية عززت التمايز بين الخلايا الجذعية الحادة الوسيطة، وكان التمايز بين الخلايا الجذعية الحادة الوسيطة ضروريًا للتمايز بين الخلايا الجذعية الحادة الوسيطة في الخلايا الجذعية الحادة الوسيطة. أدى إسقاط العلامات إلى تقليل التعبير عن العلامات المحددة لـ SMCs، بينما أدى استخدام ناهض انتقائي إلى زيادة التعبير عن العلامات المحددة لـ SMCs. علاوة على ذلك، قام أي إل كيه بتنظيم تمايز SMCs جزئيًا من خلال تفعيل مسار NF - κB في USCs. أظهر اختبار نشاط NF - κB أن التعبير المفرط للإيلك يمكن أن يزيد بشكل كبير من تنظيم تعبير NF - κB p50، ويعمل NF - κB p50 كإشارة جزئية للإيلك. الخلاصة. تحفز كثافة الخلايا العالية تمايز الخلايا الجذعية غير المتجانسة في الخلايا الجذعية غير المتجانسة، وتعد الخلايا الجذعية غير المتجانسة منظمًا رئيسيًا لتكوين العضلات. علاوة على ذلك، قد يلعب مسار إشارات NF - κB دورًا حاسمًا في هذه العملية.Translated Description (French)
Objectifs. Les cellules souches urinaires (USC) ont une capacité de croissance illimitée et sont des outils prometteurs pour les enquêtes sur la différenciation cellulaire et la régénération urinaire. Cependant, la durée de vie limitée limite considérablement leur utilité. Cette étude vise à explorer l'effet de la kinase liée à l'intégrine (ILK) sur la différenciation des cellules musculaires lisses (SMC) des USC du chien et à étudier son mécanisme moléculaire. Méthodes. Une lignée cellulaire USCS immortalisée avec les marqueurs moléculaires et les fonctions biologiques a été préparée. Après avoir induit avec succès la différenciation des USC en SMC, le niveau d'expression du facteur clé unique et de ses mécanismes dans ce processus a été déterminé par réaction en chaîne de la polymérase en temps réel, transfert de Western ou coloration par immunofluorescence. Résultats. Nous avons constaté qu'une densité cellulaire élevée favorisait la différenciation des USC en SMC, et que l'ILK était nécessaire pour la différenciation des USC en SMC. L'élimination de l'ILK a diminué l'expression du marqueur spécifique SMCS, tandis que l'utilisation d'un agoniste sélectif de l'ILK a augmenté l'expression du marqueur spécifique SMCS. En outre, l'ILK a régulé la différenciation des SMC en partie par l'activation de la voie NF-κB dans les USC. Un test d'activité NF-κB a montré que la surexpression DE l'ILK pouvait réguler significativement l'expression de NF-κB p50, et NF-κB p50 agit comme une molécule signal en aval de l'ILK. Conclusion. La densité cellulaire élevée induit la différenciation des USC en SMC, et l'ILK est un régulateur clé de la myogenèse. En outre, la voie de signalisation NF-κB pourrait jouer un rôle crucial dans ce processus.Translated Description (Spanish)
Objetivos. Las células madre urinarias (USC) tienen la capacidad de crecimiento ilimitado y son herramientas prometedoras para las investigaciones de la diferenciación celular y la regeneración urinaria. Sin embargo, la vida útil limitada restringe significativamente su utilidad. Este estudio tiene como objetivo explorar el efecto de la quinasa ligada a integrina (ILK) en la diferenciación de las células del músculo liso (SMC) de las USC de perros e investigar su mecanismo molecular. Métodos. Se preparó una línea celular inmortalizada de USCs con los marcadores moleculares y las funciones biológicas. Después de inducir con éxito la diferenciación de USC en SMC, el nivel de expresión del factor clave único y sus mecanismos en este proceso se determinó a través de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real, transferencia Western o tinción de inmunofluorescencia. Resultados. Encontramos que la alta densidad celular promovía la diferenciación de USC en SMC, e ILK era necesaria para la diferenciación de USC en SMC. El derribo de ILK disminuyó la expresión del marcador específico de SMC, mientras que el uso de un agonista selectivo de ILK aumentó la expresión del marcador específico de SMC. Además, ILK reguló la diferenciación de LOS SMC en parte a través de la activación de la vía NF-κB en los USC. Un ensayo de actividad de NF-κB mostró que la sobreexpresión de ILK podría regular significativamente la expresión de NF-κB p50, y NF-κB p50 actúa como señal molecular aguas abajo DE ILK. Conclusión. La alta densidad celular induce la diferenciación de las USC en SMC, y la ILK es un regulador clave de la miogénesis. Además, la vía de señalización de NF-κB podría desempeñar un papel crucial en este proceso.Files
6633111.pdf.pdf
Files
(4.5 kB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:77409d27090ccc09bb3aba3599621a2b
|
4.5 kB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- ينظم الكيناز المرتبط بالتكامل (ILC) تمايز الخلايا الجذعية البولية في العضلات الملساء عبر مسار إشارة NF - κB
- Translated title (French)
- La kinase liée à l'INTÉGRINE (ILK) régule la différenciation des cellules souches urinaires en muscle lisse via la voie du signal NF-κB
- Translated title (Spanish)
- La quinasa ligada a integrina (ILK) regula la diferenciación de las células madre urinarias en músculo liso a través de la vía de señal NF-κB
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W3142092478
- DOI
- 10.1155/2021/6633111
References
- https://openalex.org/W1511973051
- https://openalex.org/W1602125203
- https://openalex.org/W1971509335
- https://openalex.org/W2000754568
- https://openalex.org/W2018226841
- https://openalex.org/W2020519056
- https://openalex.org/W2029950643
- https://openalex.org/W2037023035
- https://openalex.org/W2044375187
- https://openalex.org/W2049160614
- https://openalex.org/W2050108686
- https://openalex.org/W2055004859
- https://openalex.org/W2063113301
- https://openalex.org/W2085740859
- https://openalex.org/W2087160976
- https://openalex.org/W2104013179
- https://openalex.org/W2110731221
- https://openalex.org/W2112985116
- https://openalex.org/W2125861553
- https://openalex.org/W2140375804
- https://openalex.org/W2145701877
- https://openalex.org/W2146264066
- https://openalex.org/W2149705483
- https://openalex.org/W2161385880
- https://openalex.org/W2288963240
- https://openalex.org/W2609187335
- https://openalex.org/W2896302724
- https://openalex.org/W2922292180
- https://openalex.org/W2954547227
- https://openalex.org/W3010348275