Published May 13, 2022
| Version v1
Publication
Open
Tyrosine Phosphorylation Profiling Revealed the Signaling Network Characteristics of CAMKK2 in Gastric Adenocarcinoma
Creators
- 1. Centre for Cellular and Molecular Biology
- 2. Manipal Academy of Higher Education
- 3. Institute of Bioinformatics
Description
Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2 (CAMKK2) is a serine/threonine protein kinase which functions via the calcium-triggered signaling cascade with CAMK1, CAMK4, and AMPKα as the immediate downstream substrates. CAMKK2 is reported to be overexpressed in gastric cancer; however, its signaling mechanism is poorly understood. We carried out label-free quantitative tyrosine phosphoproteomics to investigate tyrosine-mediated molecular signaling associated with CAMKK2 in gastric cancer cells. Using a high-resolution Orbitrap Fusion Tribrid Fourier-transform mass spectrometer, we identified 350 phosphotyrosine sites mapping to 157 proteins. We observed significant alterations in 81 phosphopeptides corresponding to 63 proteins upon inhibition of CAMKK2, among which 16 peptides were hyperphosphorylated corresponding to 13 proteins and 65 peptides were hypophosphorylated corresponding to 51 proteins. We report here that the inhibition of CAMKK2 leads to changes in the phosphorylation of several tyrosine kinases such as PKP2, PTK2, EPHA1, EPHA2, PRKCD, MAPK12, among others. Pathway analyses revealed that proteins are differentially phosphorylated in response to CAMKK2 inhibition involved in focal adhesions, actin cytoskeleton, axon guidance, and signaling by VEGF. The western blot analysis upon inhibition and/or silencing of CAMKK2 revealed a decrease in phosphorylation of PTK2 at Y925, c-JUN at S73, and STAT3 at Y705, which was in concordance with the mass spectrometry data. The study indicates that inhibition of CAMKK2 has an anti-oncogenic effect in gastric cells regulating phosphorylation of STAT3 through PTK2/c-JUN in gastric cancer.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
إن بروتين كيناز 2 المعتمد على الكالسيوم/كالمودولين (CAMKK2) هو بروتين كيناز سيرين/ثريونين يعمل عبر سلسلة الإشارات التي تعمل بالكالسيوم مع CAMK1 و CAMK4 و AMPKα كركائز مباشرة في المصب. تم الإبلاغ عن أن CAMKK2 تم التعبير عنه بشكل مفرط في سرطان المعدة ؛ ومع ذلك، فإن آلية الإشارة الخاصة به غير مفهومة بشكل جيد. أجرينا فسفوبروتيوميات التيروزين الكمية الخالية من الملصقات للتحقيق في الإشارات الجزيئية بوساطة التيروزين المرتبطة بـ CAMKK2 في خلايا سرطان المعدة. باستخدام مطياف كتلي عالي الدقة من أوربتراب فيوجن تريبريد فورييه، حددنا 350 موقعًا للفوسفوتيروسين يتم تعيينها إلى 157 بروتينًا. لاحظنا تغيرات كبيرة في 81 ببتيد فوسفوري مقابل 63 بروتينًا عند تثبيط CAMKK2، من بينها 16 ببتيدًا مفرط الفسفرة مقابل 13 بروتينًا و 65 ببتيدًا ناقص الفسفرة مقابل 51 بروتينًا. نذكر هنا أن تثبيط CAMKK2 يؤدي إلى تغييرات في فسفرة العديد من كينازات التيروزين مثل PKP2 و PTK2 و EPHA1 و EPHA2 و PRKCD و MAPK12 وغيرها. كشفت تحليلات المسار أن البروتينات فسفورية بشكل تفاضلي استجابة لتثبيط CAMKK2 المتورط في الالتصاقات البؤرية، والهيكل الخلوي للأكتين، وتوجيه المحور العصبي، والإشارات بواسطة عامل النمو الوعائي الوعائي. كشف تحليل اللطخة الغربية عند تثبيط و/أو إسكات CAMKK2 عن انخفاض في فسفرة PTK2 عند Y925، و c - JUN عند S73، و STAT3 عند Y705، والذي كان متوافقًا مع بيانات قياس الطيف الكتلي. تشير الدراسة إلى أن تثبيط CAMKK2 له تأثير مضاد للورم في خلايا المعدة التي تنظم فسفرة STAT3 من خلال PTK2/c - JUN في سرطان المعدة.Translated Description (French)
La protéine kinase kinase dépendante du calcium/calmoduline 2 (CAMKK2) est une protéine kinase sérine/thréonine qui fonctionne via la cascade de signalisation déclenchée par le calcium avec CAMK1, CAMK4 et AMPKα comme substrats immédiats en aval. CAMKK2 serait surexprimé dans le cancer gastrique ; cependant, son mécanisme de signalisation est mal compris. Nous avons effectué une phosphoprotéomique quantitative de la tyrosine sans marqueur pour étudier la signalisation moléculaire médiée par la tyrosine associée à CAMKK2 dans les cellules cancéreuses gastriques. À l'aide d'un spectromètre de masse haute résolution Orbitrap Fusion Tribrid à transformée de Fourier, nous avons identifié 350 sites de phosphotyrosine correspondant à 157 protéines. Nous avons observé des altérations significatives dans 81 phosphopeptides correspondant à 63 protéines lors de l'inhibition de CAMKK2, parmi lesquelles 16 peptides ont été hyperphosphorylés correspondant à 13 protéines et 65 peptides ont été hypophosphorylés correspondant à 51 protéines. Nous rapportons ici que l'inhibition de CAMKK2 entraîne des changements dans la phosphorylation de plusieurs tyrosine kinases telles que PKP2, PTK2, EPHA1, EPHA2, PRKCD, MAPK12, entre autres. Les analyses des voies ont révélé que les protéines sont phosphorylées de manière différentielle en réponse à l'inhibition de CAMKK2 impliquée dans les adhérences focales, le cytosquelette d'actine, le guidage des axones et la signalisation par le VEGF. L'analyse par transfert Western lors de l'inhibition et/ou du silençage de CAMKK2 a révélé une diminution de la phosphorylation de PTK2 à Y925, c-JUN à S73 et STAT3 à Y705, ce qui était en concordance avec les données de spectrométrie de masse. L'étude indique que l'inhibition de CAMKK2 a un effet anti-oncogène dans les cellules gastriques régulant la phosphorylation de STAT3 par PTK2/c-JUN dans le cancer gastrique.Translated Description (Spanish)
La proteína quinasa quinasa dependiente de calcio/calmodulina 2 (CAMKK2) es una serina/treonina proteína quinasa que funciona a través de la cascada de señalización desencadenada por calcio con CAMK1, CAMK4 y AMPKα como sustratos inmediatos posteriores. Se informa que CAMKK2 se sobreexpresa en el cáncer gástrico; sin embargo, su mecanismo de señalización es poco conocido. Llevamos a cabo una fosfoproteómica cuantitativa de tirosina sin etiqueta para investigar la señalización molecular mediada por tirosina asociada con CAMKK2 en células de cáncer gástrico. Usando un espectrómetro de masas de alta resolución Orbitrap Fusion Tribrid con transformada de Fourier, identificamos 350 sitios de fosfotirosina que mapean 157 proteínas. Observamos alteraciones significativas en 81 fosfopéptidos correspondientes a 63 proteínas tras la inhibición de CAMKK2, entre los cuales 16 péptidos fueron hiperfosforilados correspondientes a 13 proteínas y 65 péptidos fueron hipofosforilados correspondientes a 51 proteínas. Informamos aquí que la inhibición de CAMKK2 conduce a cambios en la fosforilación de varias tirosina quinasas como PKP2, PTK2, EPHA1, EPHA2, PRKCD, MAPK12, entre otras. Los análisis de ruta revelaron que las proteínas se fosforilan diferencialmente en respuesta a la inhibición de CAMKK2 involucrada en las adherencias focales, el citoesqueleto de actina, la guía de axones y la señalización por VEGF. El análisis de transferencia Western tras la inhibición y/o silenciamiento de CAMKK2 reveló una disminución en la fosforilación de PTK2 en Y925, c-JUN en S73 y STAT3 en Y705, que estaba en concordancia con los datos de espectrometría de masas. El estudio indica que la inhibición de CAMKK2 tiene un efecto antioncogénico en las células gástricas que regulan la fosforilación de STAT3 a través de PTK2/c-JUN en el cáncer gástrico.Files
pdf.pdf
Files
(4.4 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:9e9344d03245bbfc6a9630fcbd2c7b1a
|
4.4 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- كشف تنميط فسفرة التيروزين عن خصائص شبكة الإشارات لـ CAMKK2 في سرطان المعدة الغدي
- Translated title (French)
- Le profilage de la phosphorylation de la tyrosine a révélé les caractéristiques du réseau de signalisation de CAMKK2 dans l'adénocarcinome gastrique
- Translated title (Spanish)
- El perfil de fosforilación de tirosina reveló las características de la red de señalización de CAMKK2 en el adenocarcinoma gástrico
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W4280633479
- DOI
- 10.3389/fgene.2022.854764
References
- https://openalex.org/W1752356686
- https://openalex.org/W1887866454
- https://openalex.org/W1904477140
- https://openalex.org/W1969485126
- https://openalex.org/W1974682713
- https://openalex.org/W1978139448
- https://openalex.org/W2000292756
- https://openalex.org/W2005833897
- https://openalex.org/W2005965119
- https://openalex.org/W2018458601
- https://openalex.org/W2026367306
- https://openalex.org/W2027711161
- https://openalex.org/W2028550791
- https://openalex.org/W2037687037
- https://openalex.org/W2038178584
- https://openalex.org/W2041168160
- https://openalex.org/W2044895919
- https://openalex.org/W2045563101
- https://openalex.org/W2045690932
- https://openalex.org/W2046689931
- https://openalex.org/W2052655719
- https://openalex.org/W2054195724
- https://openalex.org/W2056165599
- https://openalex.org/W2058464902
- https://openalex.org/W2059473847
- https://openalex.org/W2059774006
- https://openalex.org/W2062289724
- https://openalex.org/W2067487060
- https://openalex.org/W2072001967
- https://openalex.org/W2076036054
- https://openalex.org/W2077819850
- https://openalex.org/W2081789566
- https://openalex.org/W2082762354
- https://openalex.org/W2086288450
- https://openalex.org/W2086457289
- https://openalex.org/W2089609187
- https://openalex.org/W2091537773
- https://openalex.org/W2100260504
- https://openalex.org/W2100268880
- https://openalex.org/W2102180682
- https://openalex.org/W2107600107
- https://openalex.org/W2107790330
- https://openalex.org/W2116845353
- https://openalex.org/W2117447637
- https://openalex.org/W2118821583
- https://openalex.org/W2126150441
- https://openalex.org/W2126389915
- https://openalex.org/W2130884130
- https://openalex.org/W2154458783
- https://openalex.org/W2156691430
- https://openalex.org/W2158217645
- https://openalex.org/W2158697148
- https://openalex.org/W2160605524
- https://openalex.org/W2171664463
- https://openalex.org/W2183320118
- https://openalex.org/W2403279269
- https://openalex.org/W2531634212
- https://openalex.org/W2601243149
- https://openalex.org/W2610294225
- https://openalex.org/W2621903338
- https://openalex.org/W2768664330
- https://openalex.org/W2802071168
- https://openalex.org/W2804408552
- https://openalex.org/W2808112612
- https://openalex.org/W2883279586
- https://openalex.org/W2883377594
- https://openalex.org/W2889646458
- https://openalex.org/W2899591074
- https://openalex.org/W2918245010
- https://openalex.org/W2935600278
- https://openalex.org/W2943001511
- https://openalex.org/W2948723058
- https://openalex.org/W3005150019
- https://openalex.org/W3020446897
- https://openalex.org/W3026024587
- https://openalex.org/W3034942057
- https://openalex.org/W3048777112
- https://openalex.org/W3090967605
- https://openalex.org/W3091118026
- https://openalex.org/W3092240262
- https://openalex.org/W3094801273
- https://openalex.org/W3097219478
- https://openalex.org/W3137157677
- https://openalex.org/W3155202418
- https://openalex.org/W3160531467
- https://openalex.org/W3164370300
- https://openalex.org/W3193491618
- https://openalex.org/W336942160
- https://openalex.org/W4241166158