Published August 29, 2017 | Version v1
Publication Open

Synergistic impact of mutations in Hepatitis B Virus genome contribute to its occult phenotype in chronic Hepatitis C Virus carriers

Creators

  • 1. Institute of Post Graduate Medical Education and Research

Description

We characterized occult HBV (OHBV) from hepatitis B surface antigen (HBsAg)-negative chronic HCV carriers of Eastern India to explore the impact of genomic variability of HBV in causing undetectability of HBsAg and low viremia that define the occult phenomenon. Screening of sera samples revealed the presence of OHBV in 17.8% of HCV-infected patients. Determination of full-length OHBV sequences and comparison with that from HBsAg-positive carriers led to the detection of distinct substitutions/mutations in PreS2, S, P and X ORFs and in X-promoter and Enhancer-II of OHBV. These mutations were introduced in wild-type HBV and their effects were evaluated by transfection in Huh7 cells. In vitro assays demonstrated that S-substitutions resulted in antigenically modified HBsAg that escaped detection by immunoassays whereas those in ORF-P caused significant decline in viral replication. Impairment in Enhancer-II and X-promoter activities were noted due to occult-associated mutations that generated reduced pregenomic RNA and intracellular HBV-DNA. Additionally, Enhancer-II mutations altered the small to large surface protein ratio and diminished extracellular HBV-DNA and HBsAg secretion. Further, mutations in PreS2, X and enhancer-II increased Grp78-promoter activity, suggesting that OHBV could trigger endoplasmic reticulum stress. Thus viral mutations contribute synergistically towards the genesis of occult phenotype and disease progression.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

لقد ميزنا فيروس التهاب الكبد الوبائي الخفي (OHBV) من المستضد السطحي لالتهاب الكبد B (HBsAg) - ناقلات فيروس التهاب الكبد الوبائي المزمن السلبية في شرق الهند لاستكشاف تأثير التباين الجيني لفيروس التهاب الكبد الوبائي في التسبب في عدم اكتشاف HBsAg وانخفاض فيروسات الدم التي تحدد الظاهرة الخفية. كشف فحص عينات الأمصال عن وجود فيروس التهاب الكبد الوبائي OHBV في 17.8 ٪ من المرضى المصابين بفيروس التهاب الكبد C. أدى تحديد تسلسلات OHBV كاملة الطول ومقارنتها مع تلك من ناقلات HBsAg الموجبة إلى اكتشاف بدائل/طفرات متميزة في PreS2 و S و P و X ORFs وفي X - promoter و Enhancer - II من OHBV. تم إدخال هذه الطفرات في النوع البري من فيروس التهاب الكبد B وتم تقييم آثارها عن طريق العدوى في خلايا Huh7. أظهرت الاختبارات المختبرية أن بدائل S أدت إلى تعديل مستضد HBsAg الذي نجا من الكشف عن طريق المقايسات المناعية في حين أن تلك الموجودة في ORF - P تسببت في انخفاض كبير في التكاثر الفيروسي. لوحظ ضعف في أنشطة المعزز الثاني والمروج X بسبب الطفرات المرتبطة الخفية التي ولدت انخفاض الحمض النووي الريبي قبل الجيني والحمض النووي الريبي داخل الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، غيرت طفرات Enhancer - II نسبة البروتين السطحي الصغيرة إلى الكبيرة وقللت من إفراز HBV - DNA و HBsAg خارج الخلية. علاوة على ذلك، زادت الطفرات في PreS2 و X و Enhancer - II من نشاط المعزز Grp78، مما يشير إلى أن OHBV يمكن أن يؤدي إلى إجهاد الشبكة الإندوبلازمية. وبالتالي، تساهم الطفرات الفيروسية بشكل تآزري في نشأة النمط الظاهري الخفي وتطور المرض.

Translated Description (French)

Nous avons caractérisé le VHB occulte (OHBV) à partir de l'antigène de surface de l'hépatite B (HBsAg)- porteurs chroniques négatifs du VHC de l'Inde orientale pour explorer l'impact de la variabilité génomique du VHB dans la cause de l'indétectabilité de l'HBsAg et de la faible virémie qui définissent le phénomène occulte. Le dépistage des échantillons de sérum a révélé la présence d'OHBV chez 17,8 % des patients infectés par le VHC. La détermination des séquences complètes de l'OHBV et la comparaison avec celles des porteurs positifs pour l'HBsAg ont conduit à la détection de substitutions/mutations distinctes dans les ORF PreS2, S, P et X et dans les promoteurs X et Enhancer-II de l'OHBV. Ces mutations ont été introduites dans le VHB de type sauvage et leurs effets ont été évalués par transfection dans les cellules Huh7. Des tests in vitro ont démontré que les substitutions S entraînaient une modification antigénique de l'HBsAg qui échappait à la détection par des tests immunologiques, tandis que celles de l'ORF-P provoquaient une diminution significative de la réplication virale. Une altération des activités Enhancer-II et X-promoter a été notée en raison de mutations associées à l'occulte qui ont généré une réduction de l'ARN prégénomique et de l'ADN intracellulaire du VHB. De plus, les mutations Enhancer-II ont modifié le rapport des protéines de surface de petite à grande taille et diminué la sécrétion extracellulaire d'ADN-VHB et d'AgHBs. De plus, des mutations dans PreS2, X et enhancer-II ont augmenté l'activité du promoteur de Grp78, suggérant que l'OHBV pourrait déclencher un stress du réticulum endoplasmique. Ainsi, les mutations virales contribuent de manière synergique à la genèse du phénotype occulte et à la progression de la maladie.

Translated Description (Spanish)

Caracterizamos el VHB oculto (OHBV) de portadores de VHC crónicos negativos para el antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg) del este de la India para explorar el impacto de la variabilidad genómica del VHB en la indetectabilidad del HBsAg y la baja viremia que definen el fenómeno oculto. El cribado de las muestras de suero reveló la presencia de OHBV en el 17,8% de los pacientes infectados por el VHC. La determinación de las secuencias de OHBV de longitud completa y la comparación con la de los portadores positivos para HBsAg condujo a la detección de distintas sustituciones/mutaciones en los ORF de PreS2, S, P y X y en el promotor X y el potenciador-II de OHBV. Estas mutaciones se introdujeron en el VHB de tipo salvaje y sus efectos se evaluaron mediante transfección en células Huh7. Los ensayos in vitro demostraron que las sustituciones S dieron como resultado HBsAg modificado antigénicamente que escapó a la detección por inmunoensayos, mientras que las de ORF-P causaron una disminución significativa en la replicación viral. Se observó un deterioro en las actividades del potenciador II y del promotor X debido a mutaciones asociadas a lo oculto que generaron ARN pregenómico reducido y ADN del VHB intracelular. Además, las mutaciones del potenciador II alteraron la proporción de proteínas de superficie pequeñas a grandes y disminuyeron la secreción extracelular de ADN del VHB y HBsAg. Además, las mutaciones en PreS2, X y potenciador-II aumentaron la actividad del promotor Grp78, lo que sugiere que OHBV podría desencadenar el estrés del retículo endoplasmático. Por lo tanto, las mutaciones virales contribuyen sinérgicamente a la génesis del fenotipo oculto y la progresión de la enfermedad.

Files

s41598-017-09965-w.pdf.pdf

Files (1.9 MB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:3885bc4c4e005eb99c9a8baa94322ded
1.9 MB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
يساهم التأثير التآزري للطفرات في جينوم فيروس التهاب الكبد الوبائي ب في نمطه الظاهري الخفي في ناقلات فيروس التهاب الكبد الوبائي سي المزمنة
Translated title (French)
L'impact synergique des mutations dans le génome du virus de l'hépatite B contribue à son phénotype occulte chez les porteurs chroniques du virus de l'hépatite C
Translated title (Spanish)
El impacto sinérgico de las mutaciones en el genoma del virus de la hepatitis B contribuye a su fenotipo oculto en los portadores crónicos del virus de la hepatitis C

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2748315518
DOI
10.1038/s41598-017-09965-w

Is supplement to
https://openalex.org/W3209112669 (Other)
https://openalex.org/W2978728557 (Other)
https://openalex.org/W2389391447 (Other)
https://openalex.org/W2153792322 (Other)
https://openalex.org/W2035964160 (Other)
https://openalex.org/W2021725705 (Other)
https://openalex.org/W1981834611 (Other)
https://openalex.org/W1974443360 (Other)
https://openalex.org/W1965270384 (Other)
https://openalex.org/W1900427498 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
India

References

  • https://openalex.org/W1507191358
  • https://openalex.org/W1660181960
  • https://openalex.org/W1784997902
  • https://openalex.org/W1956761815
  • https://openalex.org/W1975027176
  • https://openalex.org/W1976625127
  • https://openalex.org/W1979934920
  • https://openalex.org/W1986980855
  • https://openalex.org/W1992202363
  • https://openalex.org/W2033522034
  • https://openalex.org/W2056504052
  • https://openalex.org/W2057180710
  • https://openalex.org/W2059856267
  • https://openalex.org/W2062829259
  • https://openalex.org/W2066609648
  • https://openalex.org/W2080222370
  • https://openalex.org/W2081022491
  • https://openalex.org/W2084687014
  • https://openalex.org/W2086741135
  • https://openalex.org/W2099759636
  • https://openalex.org/W2103769998
  • https://openalex.org/W2120325512
  • https://openalex.org/W2121008196
  • https://openalex.org/W2121166562
  • https://openalex.org/W2128428550
  • https://openalex.org/W2130289695
  • https://openalex.org/W2132155477
  • https://openalex.org/W2147283902
  • https://openalex.org/W2151169883
  • https://openalex.org/W2156552801
  • https://openalex.org/W2158962522
  • https://openalex.org/W2164322519
  • https://openalex.org/W2166274558
  • https://openalex.org/W2166877704
  • https://openalex.org/W2169688756
  • https://openalex.org/W2171229191
  • https://openalex.org/W2171873429
  • https://openalex.org/W2225830682
  • https://openalex.org/W2272847213
  • https://openalex.org/W2325411779
  • https://openalex.org/W2404886325
  • https://openalex.org/W2593027440