Published November 22, 2009 | Version v1
Publication Open

Glycosylated VCAM-1 isoforms revealed in 2D western blots of HUVECs treated with tumoral soluble factors of breast cancer cells

Creators

  • 1. Instituto Nacional de Perinatología
  • 2. Universidad Nacional Autónoma de México

Description

Several common aspects of endothelial phenotype, such as the expression of cell adhesion molecules, are shared between metastasis and inflammation. Here, we analyzed VCAM-1 variants as biological markers of these two types of endothelial cell activation. With the combination of 2-DE and western blot techniques and the aid of tunicamycin, we analyzed N-glycosylation variants of VCAM-1 in primary human endothelial cells stimulated with either TNF or tumoral soluble factors (TSF's) derived from the human breast cancer cell line ZR75.30.Treatments induced a pro-adhesive endothelial phenotype. 2D western blots analysis of cells subjected to both treatments revealed the expression of the two known VCAM-1 isoforms and of previously unknown isoforms. In particular TSFZR75.30 induced an isoform with a relative molecular mass (Mr) and isoelectric point (pI) of 75-77 kDa and 5.0, respectively.The unknown isoforms of VCAM-1 that were found to be overexpressed after treatment with TSF's compared with TNF, could serve as biomarkers to discriminate between inflammation and metastasis. 2D western blots revealed three new VCAM-1 isoforms expressed in primary human endothelial cells in response to TSF stimulation. Each of these isoforms varies in Mr and pI and could be the result of differential glycosylation states.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

يتم مشاركة العديد من الجوانب الشائعة للنمط الظاهري البطاني، مثل التعبير عن جزيئات التصاق الخلايا، بين النقائل والالتهاب. هنا، قمنا بتحليل متغيرات VCAM -1 كعلامات بيولوجية لهذين النوعين من تنشيط الخلايا البطانية. مع مزيج من 2 - DE وتقنيات البقعة الغربية ومساعدة تونيكامايسين، قمنا بتحليل متغيرات N - glycosylation من VCAM -1 في الخلايا البطانية البشرية الأولية المحفزة إما بـ TNF أو العوامل القابلة للذوبان في الورم (TSF) المستمدة من خط خلايا سرطان الثدي البشري ZR75.30. أدت العلاجات إلى ظهور نمط ظاهري بطاني مؤيد للالتصاق. كشف تحليل البقع الغربية ثنائية الأبعاد للخلايا الخاضعة لكلا العلاجين عن التعبير عن الشكلين المتساويين المعروفين لـ VCAM -1 والأشكال المتماثلة غير المعروفة سابقًا. على وجه الخصوص، تسبب TSFZR75.30 في شكل متساوي مع كتلة جزيئية نسبية (Mr) ونقطة كهربية متساوية (pI) تبلغ 75-77 كيلو دالتون و 5.0، على التوالي. يمكن أن تكون الأشكال المتماثلة غير المعروفة لـ VCAM -1 التي تم العثور عليها معبر عنها بشكل مفرط بعد العلاج بـ TSF مقارنة بـ TNF، بمثابة مؤشرات حيوية للتمييز بين الالتهاب والانبثاث. كشفت البقع الغربية ثنائية الأبعاد عن ثلاثة أشكال متماثلة VCAM -1 جديدة يتم التعبير عنها في الخلايا البطانية البشرية الأولية استجابة لتحفيز TSF. يختلف كل من هذه الأشكال المتماثلة في مستر و بي ويمكن أن يكون نتيجة لحالات الارتباط الجليكوزيلاتي التفاضلية.

Translated Description (French)

Plusieurs aspects communs du phénotype endothélial, tels que l'expression des molécules d'adhésion cellulaire, sont partagés entre les métastases et l'inflammation. Ici, nous avons analysé les variants de VCAM-1 en tant que marqueurs biologiques de ces deux types d'activation des cellules endothéliales. Avec la combinaison de techniques de transfert 2-DE et western et l'aide de la tunicamycine, nous avons analysé des variants de N-glycosylation de VCAM-1 dans des cellules endothéliales humaines primaires stimulées par le TNF ou des facteurs solubles tumoraux (TSF) dérivés de la lignée cellulaire du cancer du sein humain ZR75.30. Les traitements ont induit un phénotype endothélial pro-adhésif. L'analyse par Western blots 2D des cellules soumises aux deux traitements a révélé l'expression des deux isoformes connues de VCAM-1 et d'isoformes inconnues auparavant. En particulier, TSFZR75.30 a induit une isoforme avec une masse moléculaire relative (Mr) et un point isoélectrique (pI) de 75-77 kDa et 5,0, respectivement. Les isoformes inconnues de VCAM-1 qui ont été trouvées surexprimées après traitement par TSF par rapport au TNF, pourraient servir de biomarqueurs pour discriminer entre l'inflammation et la métastase. Les Western blots 2D ont révélé trois nouvelles isoformes de VCAM-1 exprimées dans les cellules endothéliales humaines primaires en réponse à la stimulation TSF. Chacune de ces isoformes varie dans Mr et pI et pourrait être le résultat d'états de glycosylation différentiels.

Translated Description (Spanish)

Varios aspectos comunes del fenotipo endotelial, como la expresión de moléculas de adhesión celular, se comparten entre la metástasis y la inflamación. Aquí, analizamos las variantes de VCAM-1 como marcadores biológicos de estos dos tipos de activación de células endoteliales. Con la combinación de 2-DE y técnicas de transferencia Western y la ayuda de tunicamicina, analizamos las variantes de N-glicosilación de VCAM-1 en células endoteliales humanas primarias estimuladas con TNF o factores solubles tumorales (TSF) derivados de la línea celular de cáncer de mama humano ZR75.30. Los tratamientos indujeron un fenotipo endotelial proadhesivo. El análisis de western blots 2D de células sometidas a ambos tratamientos reveló la expresión de las dos isoformas conocidas de VCAM-1 y de isoformas previamente desconocidas. En particular, TSFZR75.30 indujo una isoforma con una masa molecular relativa (Mr) y un punto isoeléctrico (pI) de 75-77 kDa y 5.0, respectivamente. Las isoformas desconocidas de VCAM-1 que se encontraron sobreexpresadas después del tratamiento con TSF en comparación con TNF, podrían servir como biomarcadores para discriminar entre inflamación y metástasis. Las transferencias western 2D revelaron tres nuevas isoformas de VCAM-1 expresadas en células endoteliales humanas primarias en respuesta a la estimulación de TSF. Cada una de estas isoformas varía en Mr y pI y podría ser el resultado de estados de glicosilación diferenciales.

Files

1472-6769-9-7.pdf

Files (3.2 MB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:ea25fbc932c293e86a9b58e01f0a82d2
3.2 MB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
الأشكال المتماثلة لـ VCAM -1 الجليكوزيلاتية التي تم الكشف عنها في البقع الغربية ثنائية الأبعاد من HUVECs التي تم علاجها بعوامل قابلة للذوبان في الورم لخلايا سرطان الثدي
Translated title (French)
Isoformes VCAM-1 glycosylées révélées dans des Western blots 2D de HUVEC traitées avec des facteurs solubles tumoraux de cellules cancéreuses du sein
Translated title (Spanish)
Isoformas de VCAM-1 glicosiladas reveladas en transferencias western 2D de HUVEC tratadas con factores solubles tumorales de células de cáncer de mama

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2162223749
DOI
10.1186/1472-6769-9-7

Is supplement to
https://openalex.org/W4376642661 (Other)
https://openalex.org/W2135241248 (Other)
https://openalex.org/W2094068823 (Other)
https://openalex.org/W2076113225 (Other)
https://openalex.org/W2074125004 (Other)
https://openalex.org/W2057575694 (Other)
https://openalex.org/W2044580921 (Other)
https://openalex.org/W2038641205 (Other)
https://openalex.org/W2026283069 (Other)
https://openalex.org/W1545006864 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
Mexico

References

  • https://openalex.org/W119567350
  • https://openalex.org/W1504277962
  • https://openalex.org/W1592923741
  • https://openalex.org/W1656339735
  • https://openalex.org/W1890219806
  • https://openalex.org/W1971083640
  • https://openalex.org/W1975519085
  • https://openalex.org/W1979468387
  • https://openalex.org/W1983338308
  • https://openalex.org/W1987451500
  • https://openalex.org/W2008690499
  • https://openalex.org/W2009120703
  • https://openalex.org/W2015269201
  • https://openalex.org/W2019705886
  • https://openalex.org/W2020789949
  • https://openalex.org/W2024078329
  • https://openalex.org/W2025469263
  • https://openalex.org/W2026284327
  • https://openalex.org/W2030923885
  • https://openalex.org/W2037870623
  • https://openalex.org/W2039643437
  • https://openalex.org/W2042489614
  • https://openalex.org/W2047747916
  • https://openalex.org/W2050837658
  • https://openalex.org/W2055055182
  • https://openalex.org/W2061043761
  • https://openalex.org/W2068149313
  • https://openalex.org/W2073129275
  • https://openalex.org/W2074049905
  • https://openalex.org/W2078730660
  • https://openalex.org/W2081600657
  • https://openalex.org/W2082786955
  • https://openalex.org/W2084867085
  • https://openalex.org/W2086011121
  • https://openalex.org/W2092316757
  • https://openalex.org/W2096406024
  • https://openalex.org/W2096525542
  • https://openalex.org/W2100837269
  • https://openalex.org/W2103637626
  • https://openalex.org/W2104084235
  • https://openalex.org/W2109718292
  • https://openalex.org/W2120256127
  • https://openalex.org/W2129232972
  • https://openalex.org/W2147552582
  • https://openalex.org/W2149100149
  • https://openalex.org/W2153598335
  • https://openalex.org/W2157603347
  • https://openalex.org/W2168087272
  • https://openalex.org/W2404525435
  • https://openalex.org/W2407997496
  • https://openalex.org/W2413513425