Mammalian reovirus, a nonfusogenic nonenveloped virus, forms size-selective pores in a model membrane
- 1. Laboratory of Molecular Genetics
- 2. Biomedical Research and Training Institute
- 3. Harvard University
Description
During cell entry, reovirus particles with a diameter of 70–80 nm must penetrate the cellular membrane to access the cytoplasm. The mechanism of penetration, without benefit of membrane fusion, is not well characterized for any such nonenveloped animal virus. Lysis of RBCs is an in vitro assay for the membrane perforation activity of reovirus; however, the mechanism of lysis has been unknown. In this report, osmotic-protection experiments using PEGs of different sizes revealed that reovirus-induced lysis of RBCs occurs osmotically, after formation of small size-selective lesions or "pores." Consistent results were obtained by monitoring leakage of fluorophore-tagged dextrans from the interior of resealed RBC ghosts. Gradient fractionations showed that whole virus particles, as well as the myristoylated fragment μ1N that is released from particles, are recruited to RBC membranes in association with pore formation. We propose that formation of small pores is a discrete, intermediate step in the reovirus membrane-penetration pathway, which may be shared by other nonenveloped animal viruses.
Translated Descriptions
Translated Description (Arabic)
أثناء دخول الخلية، يجب أن تخترق جزيئات فيروس ريوفيروس التي يبلغ قطرها 70–80 نانومتر الغشاء الخلوي للوصول إلى السيتوبلازم. آلية الاختراق، دون الاستفادة من الاندماج الغشائي، ليست مميزة بشكل جيد لأي فيروس حيواني غير مغلف. تحلل كرات الدم الحمراء هو اختبار في المختبر لنشاط ثقب غشاء فيروس ريوفيروس ؛ ومع ذلك، فإن آلية التحلل غير معروفة. في هذا التقرير، كشفت تجارب الحماية التناضحية باستخدام PEGs بأحجام مختلفة أن تحلل كرات الدم الحمراء الناجم عن إعادة الفيروس يحدث بشكل تناضحي، بعد تكوين آفات انتقائية صغيرة الحجم أو "مسام"."تم الحصول على نتائج متسقة من خلال مراقبة تسرب الديكستران الموسوم بالفلوروفور من داخل أشباح كرات الدم الحمراء المعاد إغلاقها. أظهرت تجزئات التدرج أن جزيئات الفيروس بأكملها، وكذلك الشظية الميريستويلية μ 1 N التي يتم إطلاقها من الجزيئات، يتم تجنيدها في أغشية كرات الدم الحمراء بالاشتراك مع تكوين المسام. نقترح أن تكوين المسام الصغيرة هو خطوة منفصلة ومتوسطة في مسار اختراق غشاء فيروس ريوفيروس، والذي يمكن أن تشاركه فيروسات حيوانية أخرى غير متطورة.Translated Description (French)
Lors de l'entrée des cellules, les particules de réovirus d'un diamètre de 70–80 nm doivent pénétrer dans la membrane cellulaire pour accéder au cytoplasme. Le mécanisme de pénétration, sans bénéfice de la fusion membranaire, n'est pas bien caractérisé pour un tel virus animal non enveloppé. La lyse des globules rouges est un test in vitro de l'activité de perforation membranaire du réovirus ; cependant, le mécanisme de la lyse est inconnu. Dans ce rapport, des expériences de protection osmotique utilisant des PEG de différentes tailles ont révélé que la lyse des globules rouges induite par les réovirus se produit de manière osmotique, après la formation de lésions ou de « pores » sélectifs de petite taille.« Des résultats cohérents ont été obtenus en surveillant les fuites de dextranes marqués au fluorophore à l'intérieur des fantômes de globules rouges refermés. Les fractionnements par gradient ont montré que les particules virales entières, ainsi que le fragment μ1N myristoylé qui est libéré par les particules, sont recrutés dans les membranes des globules rouges en association avec la formation des pores. Nous proposons que la formation de petits pores soit une étape intermédiaire discrète dans la voie de pénétration membranaire du réovirus, qui peut être partagée par d'autres virus animaux non enveloppés.Translated Description (Spanish)
Durante la entrada celular, las partículas de reovirus con un diámetro de 70–80 nm deben penetrar en la membrana celular para acceder al citoplasma. El mecanismo de penetración, sin el beneficio de la fusión de la membrana, no está bien caracterizado para ninguno de estos virus animales sin envoltura. La lisis de los glóbulos rojos es un ensayo in vitro para la actividad de perforación de la membrana del reovirus; sin embargo, se desconoce el mecanismo de lisis. En este informe, los experimentos de protección osmótica utilizando PEG de diferentes tamaños revelaron que la lisis de glóbulos rojos inducida por reovirus se produce osmóticamente, después de la formación de lesiones selectivas de tamaño pequeño o "poros"." Se obtuvieron resultados consistentes al monitorear la fuga de dextranos etiquetados con fluoróforo del interior de los fantasmas de glóbulos rojos resellados. Los fraccionamientos de gradiente mostraron que las partículas de virus completas, así como el fragmento miristoilado μ1N que se libera de las partículas, se reclutan en las membranas de RBC en asociación con la formación de poros. Proponemos que la formación de poros pequeños es un paso intermedio discreto en la vía de penetración de la membrana del reovirus, que puede ser compartido por otros virus animales sin envoltura.Files
89946%2016496.full.pdf.pdf
Files
(1.6 MB)
Name | Size | Download all |
---|---|---|
md5:057121490729ff070cdd51cc26e2ca57
|
1.6 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- يشكل فيروس ريوفيروس للثدييات، وهو فيروس غير مغلف غير مغزلي، مسامًا انتقائية الحجم في غشاء نموذجي
- Translated title (French)
- Le réovirus mammalien, un virus non fusogène non enveloppé, forme des pores sélectifs en fonction de la taille dans une membrane modèle
- Translated title (Spanish)
- El reovirus de mamíferos, un virus no fusogénico sin envoltura, forma poros selectivos por tamaño en una membrana modelo
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W2160360322
- DOI
- 10.1073/pnas.0605835103
References
- https://openalex.org/W1490200417
- https://openalex.org/W1556205825
- https://openalex.org/W1556957020
- https://openalex.org/W1570356840
- https://openalex.org/W1570460604
- https://openalex.org/W1575702291
- https://openalex.org/W1654444165
- https://openalex.org/W1755581022
- https://openalex.org/W1756615966
- https://openalex.org/W1779477936
- https://openalex.org/W1812830413
- https://openalex.org/W1836613779
- https://openalex.org/W1952957089
- https://openalex.org/W1958095582
- https://openalex.org/W1974225254
- https://openalex.org/W1990131890
- https://openalex.org/W1992261249
- https://openalex.org/W1994354502
- https://openalex.org/W2007841228
- https://openalex.org/W2008328787
- https://openalex.org/W2008781481
- https://openalex.org/W2022712238
- https://openalex.org/W2027772902
- https://openalex.org/W2028658614
- https://openalex.org/W2059413325
- https://openalex.org/W2062111121
- https://openalex.org/W2067042270
- https://openalex.org/W2070556034
- https://openalex.org/W2091001172
- https://openalex.org/W2092199562
- https://openalex.org/W2094252315
- https://openalex.org/W2095433366
- https://openalex.org/W2096498694
- https://openalex.org/W2102747522
- https://openalex.org/W2107427530
- https://openalex.org/W2111496511
- https://openalex.org/W2117582775
- https://openalex.org/W2118728017
- https://openalex.org/W2131290555
- https://openalex.org/W2131553729
- https://openalex.org/W2133064444
- https://openalex.org/W2139855364
- https://openalex.org/W2142630646
- https://openalex.org/W2146428253
- https://openalex.org/W2149616337
- https://openalex.org/W2158062405
- https://openalex.org/W2165843771