Published August 17, 2022
| Version v1
Publication
Open
A Recombinant Capripoxvirus Expressing the F Protein of Peste des Petits Ruminants Virus and the P12A3C of Foot-and-mouth Disease Virus
- 1. Ningxia University
- 2. Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Sciences
- 3. Academy of Agricultural and Forestry Sciences
- 4. Lanzhou Veterinary Research Institute
- 5. Chinese Academy of Agricultural Sciences
Description
Abstract Background: Peste des petits ruminants (PPR), foot-and-mouth disease (FMD) and goat pox (GP) are three important infectious diseases that infect goats, sheep and other small ruminants. It is well-known that the prevention of three diseases rely mainly on their individual vaccines. However, the vaccines have a variety of different disadvantages, such as short duration of immunity, increasing the number of vaccinations, and poor thermal stability. The purpose of this study is to construct a recombinant goat pox virus (rGPV) capable of expressing the F gene of PPRV and the P12A3C gene of FMDV as a live vector vaccine. Results: The IRES, FMDV P12A3C and PPRV F genes into the multi-cloning site of the universal transfer plasmid pTKfpgigp to construct a recombinant transfer plasmid pTKfpgigpFiP12A3C, and transfected GPV-infected lamb testis (LT) cells with liposomes and produced by homologous recombination Recombinant GPV (rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C, rGPV). The rGPV was screened and purified by green florescence protein (GFP) and xanthine-guanine-phosphoribosyltransferase gene (gpt) of Escherichia coli as selective markers, and the expression of rGPV in LT cells was detected by RT-PCR and immunofluorescence techniques. The results showed that the virus strain rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C containing FMDV P12A3C and PPRV F genes was obtained. The exogenous genes FMDV P12A3C and PPRV F contained in rGPV were normally transcribed and translated in LT cells, and the expression products could specifically react with PPRV and FMDV antiserum. Then, the rGPV was intradermally inoculated with goats, the animal experiments showed that rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C could induce high levels of specific antibodies against GPV, PPRV and FMDV. Conclusions: The constructed rGPV induced high levels of specific antibodies against GPV, PPRV and FMDV. The study provides a reference for " one vaccine with multiple uses " of GPV live vector vaccine.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
خلفية مجردة: طاعون المجترات الصغيرة ومرض الحمى القلاعية وجدري الماعز هي ثلاثة أمراض معدية مهمة تصيب الماعز والأغنام وغيرها من المجترات الصغيرة. من المعروف أن الوقاية من ثلاثة أمراض تعتمد بشكل أساسي على لقاحاتهم الفردية. ومع ذلك، فإن اللقاحات لها مجموعة متنوعة من العيوب المختلفة، مثل قصر مدة المناعة، وزيادة عدد اللقاحات، وضعف الاستقرار الحراري. الغرض من هذه الدراسة هو بناء فيروس جدري الماعز المؤتلف (rGPV) القادر على التعبير عن الجين F من PPRV وجين P12A3C من FMDV كلقاح ناقل حي. النتائج: جينات IRES و FMDV P12A3C و PPRV F في موقع الاستنساخ المتعدد لبلازميد النقل الشامل pTKfpgigp لبناء بلازميد نقل مؤتلف pTKfpgigpFiP12A3C، وخلايا الخصية المصابة بـ GPV المنقولة (LT) مع الجسيمات الشحمية والمنتجة بواسطة GPV مؤتلف مؤتلف متماثل (rGPV/PPRVF - FMDVP12A3C، rGPV). تم فحص rGPV وتنقيته بواسطة بروتين الإزهار الأخضر (GFP) وجين إنزيم زانثين- جوانين- فوسفوريبوزيل (GPT) من الإشريكية القولونية كعلامات انتقائية، وتم الكشف عن التعبير عن rGPV في خلايا LT بواسطة RT - PCR وتقنيات التألق المناعي. أظهرت النتائج أنه تم الحصول على سلالة الفيروس rGPV/PPRVF - FMDVP12A3C التي تحتوي على جينات FMDV P12A3C وPPRV F. عادة ما يتم نسخ الجينات الخارجية FMDV P12A3C و PPRV F الموجودة في rGPV وترجمتها في خلايا LT، ويمكن أن تتفاعل منتجات التعبير على وجه التحديد مع المصل المضاد لـ PPRV و FMDV. بعد ذلك، تم تلقيح rGPV داخل الأدمة بالماعز، وأظهرت التجارب على الحيوانات أن rGPV/PPRVF - FMDVP12A3C يمكن أن يحفز مستويات عالية من الأجسام المضادة المحددة ضد GPV و PPRV و FMDV. الاستنتاجات: تسبب rGPV المبني في مستويات عالية من الأجسام المضادة المحددة ضد GPV و PPRV و FMDV. توفر الدراسة مرجعًا لـ "لقاح واحد ذو استخدامات متعددة" للقاح الناقل الحي للقاح GPV.Translated Description (French)
Résumé Contexte : La peste des petits ruminants (PPR), la fièvre aphteuse (FMD) et la variole caprine (GP) sont trois maladies infectieuses importantes qui infectent les chèvres, les moutons et autres petits ruminants. Il est bien connu que la prévention de trois maladies repose principalement sur leurs vaccins individuels. Cependant, les vaccins présentent une variété d'inconvénients différents, tels que la courte durée de l'immunité, l'augmentation du nombre de vaccinations et une faible stabilité thermique. Le but de cette étude est de construire un virus recombinant de la variole caprine (rGPV) capable d'exprimer le gène F du PPRV et le gène P12A3C du FMDV en tant que vaccin vecteur vivant. Résultats : Les gènes IRES, FMDV P12A3C et PPRV F dans le site de multi-clonage du plasmide de transfert universel pTKfpgigp pour construire un plasmide de transfert recombinant pTKfpgigpFiP12A3C, et des cellules de testicules d'agneau (LT) infectées par le GPV transfectées avec des liposomes et produites par recombinaison homologue GPV recombinant (rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C, rGPV). Le rGPV a été criblé et purifié par la protéine de fluorescence verte (GFP) et le gène de la xanthine-guanine-phosphoribosyltransférase (gpt) d'Escherichia coli en tant que marqueurs sélectifs, et l'expression du rGPV dans les cellules LT a été détectée par des techniques de RT-PCR et d'immunofluorescence. Les résultats ont montré que la souche virale rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C contenant les gènes FMDV P12A3C et PPRV F a été obtenue. Les gènes exogènes FMDV P12A3C et PPRV F contenus dans le rGPV étaient normalement transcrits et traduits dans les cellules LT, et les produits d'expression pouvaient réagir spécifiquement avec l'antisérum PPRV et FMDV. Ensuite, le rGPV a été inoculé par voie intradermique avec des chèvres, les expériences animales ont montré que le rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C pouvait induire des niveaux élevés d'anticorps spécifiques contre le GPV, le PPRV et le FMDV. Conclusions : Le rGPV construit a induit des niveaux élevés d'anticorps spécifiques contre le GPV, le PPRV et le FMDV. L'étude fournit une référence pour « un vaccin à usages multiples » du vaccin à vecteur vivant GPV.Translated Description (Spanish)
Resumen Antecedentes: La peste de los pequeños rumiantes (PPR), la fiebre aftosa (FMD) y la viruela caprina (GP) son tres enfermedades infecciosas importantes que infectan a las cabras, ovejas y otros pequeños rumiantes. Es bien sabido que la prevención de tres enfermedades depende principalmente de sus vacunas individuales. Sin embargo, las vacunas tienen una variedad de desventajas diferentes, como la corta duración de la inmunidad, el aumento del número de vacunaciones y la mala estabilidad térmica. El propósito de este estudio es construir un virus recombinante de la viruela caprina (rGPV) capaz de expresar el gen F de PPRV y el gen P12A3C de FMDV como una vacuna de vector vivo. Resultados: Los genes IRES, FMDV P12A3C y PPRV F en el sitio de clonación múltiple del plásmido de transferencia universal pTKfpgigp para construir un plásmido de transferencia recombinante pTKfpgigpFiP12A3C, y células de testículo de cordero (LT) infectadas con GPV transfectadas con liposomas y producidas por recombinación homóloga de GPV recombinante (rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C, rGPV). El rGPV se cribó y purificó mediante la proteína de fluorescencia verde (GFP) y el gen de xantina-guanina-fosforribosiltransferasa (gpt) de Escherichia coli como marcadores selectivos, y la expresión de rGPV en células LT se detectó mediante técnicas de RT-PCR e inmunofluorescencia. Los resultados mostraron que se obtuvo la cepa de virus rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C que contiene los genes FMDV P12A3C y PPRV F. Los genes exógenos FMDV P12A3C y PPRV F contenidos en rGPV normalmente se transcribieron y tradujeron en células LT, y los productos de expresión podrían reaccionar específicamente con el antisuero de PPRV y FMDV. Luego, el rGPV se inoculó por vía intradérmica con cabras, los experimentos con animales mostraron que rGPV/PPRVF-FMDVP12A3C podría inducir altos niveles de anticuerpos específicos contra GPV, PPRV y FMDV. Conclusiones: El rGPV construido indujo altos niveles de anticuerpos específicos contra GPV, PPRV y FMDV. El estudio proporciona una referencia para " una vacuna con múltiples usos " de la vacuna de vector vivo GPV.Files
latest.pdf.pdf
Files
(1.6 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:8a1e188d3c4865fc2e36b0b90425036a
|
1.6 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- فيروس كابريبوكس المؤتلف الذي يعبر عن بروتين F لفيروس طاعون المجترات الصغيرة وفيروس P12A3C لفيروس مرض الحمى القلاعية
- Translated title (French)
- Un capripoxvirus recombinant exprimant la protéine F du virus de la peste des petits ruminants et le P12A3C du virus de la fièvre aphteuse
- Translated title (Spanish)
- Un capripoxvirus recombinante que expresa la proteína F del virus de la peste de los pequeños rumiantes y el P12A3C del virus de la fiebre aftosa
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W4292103813
- DOI
- 10.21203/rs.3.rs-1891856/v1
References
- https://openalex.org/W1846625983
- https://openalex.org/W1934595747
- https://openalex.org/W1974549406
- https://openalex.org/W1977611878
- https://openalex.org/W2009823973
- https://openalex.org/W2019715916
- https://openalex.org/W2042313356
- https://openalex.org/W2053207638
- https://openalex.org/W2067131711
- https://openalex.org/W2077504995
- https://openalex.org/W2082291725
- https://openalex.org/W2104639573
- https://openalex.org/W2117916220
- https://openalex.org/W2162264494
- https://openalex.org/W2406304193
- https://openalex.org/W2471092251
- https://openalex.org/W2748016661
- https://openalex.org/W2774179685
- https://openalex.org/W2782679734
- https://openalex.org/W2883399633
- https://openalex.org/W2884247817
- https://openalex.org/W2886927588
- https://openalex.org/W2893293860
- https://openalex.org/W2982625519
- https://openalex.org/W2994406543
- https://openalex.org/W3119742246
- https://openalex.org/W3152840897
- https://openalex.org/W3178235368
- https://openalex.org/W3185421187
- https://openalex.org/W4210608837
- https://openalex.org/W4220846133
- https://openalex.org/W4283217996