Published May 15, 2023
| Version v1
Publication
Open
Development of an animal-derived component-free medium for Spodoptera frugiperda (Sf9) cells using response surface methodology
Creators
- 1. Rajamangala University of Technology
- 2. Ministry of Public Health
- 3. Department of Medical Sciences
Description
To develop an animal-derived component-free medium for Spodoptera frugiperda (Sf9) growth and green fluorescent protein (GFP) expression.OSF9-ADCFM contained optimum concentrations of CDLC, YE and ST at 0.5% (v/v), 11.0 g/L, and 3.0 g/L, respectively. A mean viable cell concentration of 1.71 ± 0.14 × 105 cells/mL was obtained from 5 passages (P1-P5). The use of both peptones after 10 kDa ultrafiltration had a significant effect on Sf9 cell growth. Grace's insect medium with 10% FBS gave higher un-infected cell number than SF-900II and OSF9-ADCFM for 4.29 and 5.38 times, respectively. The average cell number of un-infected cells and GFP-fluorescent cells of SF-900II were higher than OSF9-ADCFM 1.25 and 7 times, respectively.In-house OSF9-ADCFM could support growth and GFP expression in Sf9 less than commercial SF-900II. However, it could lower the production cost at least 50% comparing to commercial SF-900II. The development of in- house OSF9-ADCFM would be continued to increase both cell numbers and protein expression in the next step.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
لتطوير وسط خالٍ من المكونات مشتق من الحيوانات لنمو Spodoptera frugiperda (Sf9) وتعبير البروتين الفلوري الأخضر (GFP). يحتوي OSF9 - ADCFM على تركيزات مثالية من CDLC و YE و ST بنسبة 0.5 ٪ (v/v) و 11.0 جم/لتر و 3.0 جم/لتر على التوالي. تم الحصول على متوسط تركيز خلية قابلة للحياة يبلغ 1.71 ± 0.14 × 105 خلية/مل من 5 ممرات (P1 - P5). كان لاستخدام كلا النغمتين بعد الترشيح الفائق 10 كيلو دالتون تأثير كبير على نمو خلايا Sf9. أعطى متوسط حشرة غريس بنسبة 10 ٪ FBS عدد خلايا غير مصابة أعلى من SF -900II و OSF9 - ADCFM لمدة 4.29 و 5.38 مرة على التوالي. كان متوسط عدد الخلايا غير المصابة والخلايا الفلورية GFP لـ SF -900II أعلى من OSF9 - ADCFM 1.25 و 7 مرات على التوالي. يمكن لـ OSF9 - ADCFM في المنزل دعم النمو والتعبير عن GFP في SF9 أقل من SF -900II التجاري. ومع ذلك، يمكن أن يخفض تكلفة الإنتاج بنسبة 50 ٪ على الأقل مقارنة بتكلفة SF -900II التجارية. سيستمر تطوير OSF9 - ADCFM الداخلي لزيادة كل من أعداد الخلايا وتعبير البروتين في الخطوة التالية.Translated Description (French)
Développer un milieu sans composant d'origine animale pour la croissance de Spodoptera frugiperda (Sf9) et l'expression de la protéine fluorescente verte (GFP). OSF9-ADCFM contenait des concentrations optimales de CDLC, YE et ST à 0,5 % (v/v), 11,0 g/L et 3,0 g/L, respectivement. Une concentration cellulaire viable moyenne de 1,71 ± 0,14 × 105 cellules/mL a été obtenue à partir de 5 passages (P1-P5). L'utilisation des deux peptones après une ultrafiltration de 10 kDa a eu un effet significatif sur la croissance des cellules Sf9. Le milieu d'insectes de Grace avec 10% de FBS a donné un nombre de cellules non infectées plus élevé que SF-900II et OSF9-ADCFM pour 4,29 et 5,38 fois, respectivement. Le nombre moyen de cellules non infectées et de cellules fluorescentes GFP de SF-900II était supérieur à OSF9-ADCFM 1,25 et 7 fois, respectivement. L'OSF9-ADCFM interne pourrait soutenir la croissance et l'expression de la GFP dans Sf9 moins que le SF-900II commercial. Cependant, il pourrait réduire le coût de production d'au moins 50% par rapport au SF-900II commercial. Le développement de l'OSF9-ADCFM en interne se poursuivrait pour augmenter à la fois le nombre de cellules et l'expression des protéines à l'étape suivante.Translated Description (Spanish)
Desarrollar un medio libre de componentes derivado de animales para el crecimiento de Spodoptera frugiperda (Sf9) y la expresión de la proteína fluorescente verde (GFP). OSF9-ADCFM contenía concentraciones óptimas de CDLC, YE y ST al 0.5% (v/v), 11.0 g/L y 3.0 g/L, respectivamente. Se obtuvo una concentración media de células viables de 1.71 ± 0.14 × 105 células/mL de 5 pases (P1-P5). El uso de ambas peptonas después de la ultrafiltración de 10 kDa tuvo un efecto significativo en el crecimiento de células Sf9. El medio de insectos de Grace con FBS al 10% dio un mayor número de células no infectadas que SF-900II y OSF9-ADCFM 4,29 y 5,38 veces, respectivamente. El número promedio de células no infectadas y células fluorescentes de GFP de SF-900II fue mayor que OSF9-ADCFM 1,25 y 7 veces, respectivamente. OSF9-ADCFM interno podría apoyar el crecimiento y la expresión de GFP en Sf9 menos que SF-900II comercial. Sin embargo, podría reducir el coste de producción al menos un 50% en comparación con el SF-900II comercial. El desarrollo de OSF9-ADCFM interno continuaría para aumentar tanto el número de células como la expresión de proteínas en el siguiente paso.Files
latest.pdf.pdf
Files
(1.1 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:53f174affcfa1208a10e0b66f0e4de5b
|
1.1 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- تطوير وسط خالٍ من المكونات مشتق من الحيوانات لخلايا Spodoptera frugiperda (Sf9) باستخدام منهجية سطح الاستجابة
- Translated title (French)
- Développement d'un milieu sans composant d'origine animale pour les cellules de Spodoptera frugiperda (Sf9) en utilisant une méthodologie de surface de réponse
- Translated title (Spanish)
- Desarrollo de un medio libre de componentes de origen animal para células de Spodoptera frugiperda (Sf9) utilizando la metodología de superficie de respuesta
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W4376617700
- DOI
- 10.1007/s10529-023-03389-5
References
- https://openalex.org/W1251714645
- https://openalex.org/W15219517
- https://openalex.org/W1703955839
- https://openalex.org/W1945786056
- https://openalex.org/W1966842751
- https://openalex.org/W1969386459
- https://openalex.org/W1980226809
- https://openalex.org/W1994929719
- https://openalex.org/W2007595340
- https://openalex.org/W2008252899
- https://openalex.org/W2009853885
- https://openalex.org/W2011233171
- https://openalex.org/W2018175012
- https://openalex.org/W2025028182
- https://openalex.org/W2028793859
- https://openalex.org/W2030209236
- https://openalex.org/W2034859645
- https://openalex.org/W2040980596
- https://openalex.org/W2050989688
- https://openalex.org/W2057231397
- https://openalex.org/W2058726380
- https://openalex.org/W2065235821
- https://openalex.org/W2067966586
- https://openalex.org/W2072242441
- https://openalex.org/W2072290511
- https://openalex.org/W2081435140
- https://openalex.org/W2081519519
- https://openalex.org/W2094209978
- https://openalex.org/W2095475698
- https://openalex.org/W2108208121
- https://openalex.org/W2116093043
- https://openalex.org/W2159424407
- https://openalex.org/W2171918816
- https://openalex.org/W2270009137
- https://openalex.org/W2474982277
- https://openalex.org/W2599138920
- https://openalex.org/W3010347084
- https://openalex.org/W3187935348
- https://openalex.org/W3194179251
- https://openalex.org/W4240657793
- https://openalex.org/W4243076221