Published October 1, 2010 | Version v1
Publication Open

Anti-apoptotic function of T-KTS+, T-KTS-, WT1+/+ and WT1+/- isoforms in breast cancer

Creators

  • 1. Prince of Songkla University
  • 2. Institute of Biomedical Science
  • 3. Suranaree University of Technology
  • 4. The University of Texas Medical Branch at Galveston

Description

Abstract Background: WT1 was originally identified in Wilms tumor, a childhood kidney cancer. This gene was expressed in wide variety of solid cancers. Alternative splicing of WT1 transcript generates four major protein isoforms and thirty-six minor protein isoforms, each having different functional properties. WT1 gene has been considered as a tumor suppressor gene and anti-apoptotic protein. However, the mechanism of WT1 in breast cancer remains unclear. Objective: Evaluate the role of truncated WT1 isoforms (T-KTS+ and T-KTS-) and two major WT1 isoforms (+/+ and +/-) in apoptosis in breast cancer cell line, MCF-7. Materials and methods: RNA interference (RNAi) was employed in an attempt to define the role of WT1 in a breast cancer cell line (MCF-7). Furthermore, MCF-7 overe-xpressing cells that stably expressed two truncated WT1 isoforms (T-KTS+ and T-KTS-) or two major WT1 isoforms (+/+ and +/-) were generated and exposed to Doxorubicin. The mortality of cells was determined as a percentage of trypan blue-stained cells in total cells. The apoptotic molecules in apoptosis pathway were detected using RT-PCR, caspase-7 activity assay and Western blot analysis techniques. Results: Transfection of siRNAWT1 into MCF-7 cells resulted in decreasing of WT1 protein and related to the increasing in number of cell death and caspase-7 activity. Over-expression of T-KTS+, T-KTS-, WT1+/+ and WT1+/- isoforms protected cells from cell death induced by apoptosis-inducing agent, doxorubicin. Moreover, the expression of apoptotic p53, Bak and caspase-7 were decreased by the expression of all four WT1 isoforms, especially T-KTS- and T-KTS+ isoforms. Conclusion: T-KTS+ and T-KTS- isoforms as well as WT1+/+ and WT1+/- isoforms could function as an antiapoptotic protein in breast cancer cell line, MCF-7.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

نبذة مختصرة: تم تحديد WT1 في الأصل في ورم ويلمز، وهو سرطان في الكلى في مرحلة الطفولة. تم التعبير عن هذا الجين في مجموعة واسعة من السرطانات الصلبة. يولد الربط البديل لنسخة WT1 أربعة أشكال متساوية بروتينية رئيسية وستة وثلاثين شكلًا متساويًا بروتينيًا ثانويًا، لكل منها خصائص وظيفية مختلفة. يعتبر جين WT1 جينًا مثبطًا للورم وبروتينًا مضادًا للاستماتة. ومع ذلك، لا تزال آلية WT1 في سرطان الثدي غير واضحة. الهدف: تقييم دور الأشكال المتماثلة WT1 المقطوعة (T - KTS + و T - KTS -) واثنين من الأشكال المتماثلة WT1 الرئيسية (+/+ و +/-) في الاستماتة في خط خلايا سرطان الثدي، MCF -7. المواد والأساليب: تم استخدام تداخل الحمض النووي الريبي (RNAi) في محاولة لتحديد دور WT1 في خط خلايا سرطان الثدي (MCF -7). علاوة على ذلك، تم إنشاء خلايا MCF -7 مفرطة التعبير التي تعبر بثبات عن شكلين متساويين من WT1 مقطوعين (T - KTS + و T - KTS -) أو شكلين متساويين رئيسيين من WT1 (+/+ و +/-) وتعرضت للدوكسوروبيسين. تم تحديد معدل نفوق الخلايا كنسبة مئوية من الخلايا الملطخة بالمثقبيات الزرقاء في الخلايا الكلية. تم اكتشاف جزيئات الاستماتة في مسار الاستماتة باستخدام RT - PCR وفحص نشاط caspase -7 وتقنيات تحليل البقعة الغربية. النتائج: أدى انتقال siRNAWT1 إلى خلايا MCF -7 إلى انخفاض بروتين WT1 ويرتبط بزيادة عدد موت الخلايا ونشاط caspase -7. التعبير المفرط عنT - KTS + و T - KTS - و WT1+/+ و WT1 +/- الخلايا المحمية من موت الخلايا الناجم عن عامل محفز للاستماتة، دوكسوروبيسين. علاوة على ذلك، تم تقليل التعبير عن p53 المبرمج و BAK و caspase -7 من خلال التعبير عن جميع الأشكال المتماثلة الأربعة WT1، وخاصة الأشكال المتماثلة T - KTS - و T - KTS +. الاستنتاج: يمكن أن تعمل الأشكال المتماثلة T - KTS + و T - KTS - بالإضافة إلى الأشكال المتماثلة WT1 +/+ و WT1 +/- كبروتين مضاد للجائحة في خط خلايا سرطان الثدي، MCF -7.

Translated Description (French)

Résumé Contexte : WT1 a été identifié à l'origine dans la tumeur de Wilms, un cancer du rein chez l'enfant. Ce gène a été exprimé dans une grande variété de cancers solides. L'épissage alternatif du transcrit WT1 génère quatre isoformes protéiques majeures et trente-six isoformes protéiques mineures, chacune ayant des propriétés fonctionnelles différentes. Le gène WT1 a été considéré comme un gène suppresseur de tumeur et une protéine anti-apoptotique. Cependant, le mécanisme de WT1 dans le cancer du sein reste incertain. Objectif : Évaluer le rôle des isoformes WT1 tronquées (T-KTS + et T-KTS-) et de deux isoformes WT1 majeures (+/+ et +/-) dans l'apoptose dans la lignée cellulaire du cancer du sein, MCF-7. Matériels et méthodes : L'interférence ARN (ARNi) a été utilisée pour tenter de définir le rôle de WT1 dans une lignée cellulaire du cancer du sein (MCF-7). De plus, des cellules surexprimant MCF-7 qui exprimaient de manière stable deux isoformes tronquées de WT1 (T-KTS + et T-KTS-) ou deux isoformes majeures de WT1 (+/+ et +/-) ont été générées et exposées à la doxorubicine. La mortalité des cellules a été déterminée en pourcentage de cellules colorées au bleu trypan dans les cellules totales. Les molécules apoptotiques dans la voie de l'apoptose ont été détectées en utilisant la RT-PCR, le test d'activité de la caspase-7 et les techniques d'analyse par Western blot. Résultats : La transfection de siRNAWT1 dans les cellules MCF-7 a entraîné une diminution de la protéine WT1 et est liée à l'augmentation du nombre de mort cellulaire et de l'activité de la caspase-7. La surexpression des isoformesT-KTS +, T-KTS-, WT1+/+ et WT1+/- protégeait les cellules de la mort cellulaire induite par l'agent induisant l'apoptose, la doxorubicine. De plus, l'expression des apoptotiques p53, Bak et caspase-7 a été diminuée par l'expression des quatre isoformes WT1, en particulier les isoformes T-KTS- etT-KTS +. Conclusion : Les isoformes T-KTS + et T-KTS- ainsi que les isoformes WT1+/+ et WT1+/- pourraient fonctionner comme une protéine antiapoptotique dans la lignée cellulaire du cancer du sein, MCF-7.

Translated Description (Spanish)

Resumen Antecedentes: WT1 se identificó originalmente en el tumor de Wilms, un cáncer de riñón infantil. Este gen se expresó en una amplia variedad de cánceres sólidos. El corte y empalme alternativo del transcrito de WT1 genera cuatro isoformas proteicas principales y treinta y seis isoformas proteicas menores, cada una con diferentes propiedades funcionales. El gen WT1 se ha considerado como un gen supresor de tumores y una proteína antiapoptótica. Sin embargo, el mecanismo de WT1 en el cáncer de mama sigue sin estar claro. Objetivo: Evaluar el papel de las isoformas truncadas de WT1 (T-KTS+ y T-KTS-) y dos isoformas principales de WT1 (+/+ y +/-) en la apoptosis en la línea celular de cáncer de mama, MCF-7. Materiales y métodos: se empleó ARN de interferencia (ARNi) en un intento de definir el papel de WT1 en una línea celular de cáncer de mama (MCF-7). Además, se generaron células que sobreexpresaban MCF-7 que expresaban de forma estable dos isoformas WT1 truncadas (T-KTS + y T-KTS-) o dos isoformas WT1 principales (+/+ y +/-) y se expusieron a doxorrubicina. La mortalidad de las células se determinó como un porcentaje de células teñidas con azul de tripano en las células totales. Las moléculas apoptóticas en la vía de apoptosis se detectaron utilizando RT-PCR, ensayo de actividad de caspasa-7 y técnicas de análisis de transferencia Western. Resultados: La transfección de siRNAWT1 en células MCF-7 dio como resultado la disminución de la proteína WT1 y se relacionó con el aumento en el número de muerte celular y actividad de caspasa-7. La sobreexpresión de las isoformas T-KTS +, T-KTS-, WT1+/+ y WT1+/- protegió a las células de la muerte celular inducida por el agente inductor de apoptosis, doxorrubicina. Además, la expresión de p53 apoptótica, Bak y caspasa-7 disminuyó por la expresión de las cuatro isoformas de WT1, especialmente las isoformas T-KTS- yT-KTS +. Conclusión: Las isoformas T-KTS + y T-KTS-, así como las isoformas WT1+/+ y WT1+/- podrían funcionar como una proteína antiapoptótica en la línea celular de cáncer de mama, MCF-7.

Files

abm-2010-0093.pdf

Files (390.8 kB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:ece6fee57367600e8cf929ce34f3731c
390.8 kB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
الوظيفة المضادة للاستماتة لأشكالT - KTS + و T - KTS - و WT1+/+ و WT1 +/- المتماثلة في سرطان الثدي
Translated title (French)
Fonction antiapoptotique des isoformesT-KTS +, T-KTS-, WT1+/+ et WT1+/- dans le cancer du sein
Translated title (Spanish)
Función antiapoptótica de las isoformasT-KTS +, T-KTS-, WT1+/+ y WT1+/- en el cáncer de mama

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2169337854
DOI
10.2478/abm-2010-0093

Is supplement to
https://openalex.org/W4377245759 (Other)
https://openalex.org/W4287756384 (Other)
https://openalex.org/W3216288211 (Other)
https://openalex.org/W3124023829 (Other)
https://openalex.org/W3043294106 (Other)
https://openalex.org/W2954663979 (Other)
https://openalex.org/W2909736297 (Other)
https://openalex.org/W2381084850 (Other)
https://openalex.org/W2353027431 (Other)
https://openalex.org/W2136560216 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
Thailand

References

  • https://openalex.org/W1592769050
  • https://openalex.org/W1634638391
  • https://openalex.org/W1769953224
  • https://openalex.org/W1966308488
  • https://openalex.org/W1976615153
  • https://openalex.org/W1991733975
  • https://openalex.org/W1993951035
  • https://openalex.org/W2003442577
  • https://openalex.org/W2022404774
  • https://openalex.org/W2056514645
  • https://openalex.org/W2057681968
  • https://openalex.org/W2063197555
  • https://openalex.org/W2071221084
  • https://openalex.org/W2071482032
  • https://openalex.org/W2085425551
  • https://openalex.org/W2249166705
  • https://openalex.org/W2261769285
  • https://openalex.org/W4239415548
  • https://openalex.org/W4252399665
  • https://openalex.org/W4254299096