Expression of ASFV p17 in CHO cells and identification of one novel epitope using a monoclonal antibody
Creators
- 1. Shanghai Veterinary Research Institute
- 2. Chinese Academy of Agricultural Sciences
- 3. Hebei Agricultural University
- 4. Shandong Agricultural University
- 5. Yangzhou University
Description
As a highly pathogenic large DNA virus, African swine fever virus (ASFV) has huge particles and numerous encoded proteins. At present, few of the existing studies on ASFV proteins have investigated the function of p17. Specific antibodies against p17 to promote the development of prevention techniques against African swine fever (ASF) are urgently needed. Herein, we successfully expressed ASFV p17 in CHO cells using a suspension culture system and generated a monoclonal antibody (mAb) against p17. The mAb recognized a novel linear epitope (8LLSHNLSTREGIK20) and exhibited specific reactivity, which was conducive to the identification of ectopically expressed p17, the recombinant porcine reproductive and respiratory syndrome virus expressing p17, and the ASFV-SY18. The epitope was conservative among genotype I and genotype II ASFV strains. Overall, the mAb against p17 revealed efficient detection and promising application prospects, making it a useful tool for future vaccine research on ASF. Determination of the conserved linear epitope of p17 would contribute to the in-depth exploration of the biological function of ASFV antigen protein.
Translated Descriptions
Translated Description (Arabic)
باعتباره فيروس حمض نووي كبير شديد الإمراض، يحتوي فيروس حمى الخنازير الأفريقية (ASFV) على جزيئات ضخمة والعديد من البروتينات المشفرة. في الوقت الحاضر، قام عدد قليل من الدراسات الحالية على بروتينات ASFV بالتحقيق في وظيفة p17. هناك حاجة ماسة إلى أجسام مضادة محددة ضد الصفحة 17 لتعزيز تطوير تقنيات الوقاية من حمى الخنازير الأفريقية. هنا، نجحنا في التعبير عن ASFV p17 في خلايا CHO باستخدام نظام استزراع معلق وأنتجنا جسمًا مضادًا أحادي النسيلة (MAB) مقابل p17. تعرف MAB على حاتمة خطية جديدة (8LLSHNLSTREGIK 20) وأظهر تفاعلًا محددًا، مما أدى إلى تحديد p17 المعبر عنه خارج الرحم، وفيروس متلازمة الخنازير التناسلية والتنفسية المؤتلف الذي يعبر عن p17، و ASFV - SY18. كانت الحاتمة محافظة بين سلالات ASFV من النمط الجيني الأول والنمط الجيني الثاني. بشكل عام، كشفت MAB مقابل p17 عن اكتشاف فعال وآفاق تطبيق واعدة، مما يجعلها أداة مفيدة لأبحاث اللقاح المستقبلية حول ASF. من شأن تحديد الحاتمة الخطية المحفوظة لـ p17 أن يساهم في الاستكشاف المتعمق للوظيفة البيولوجية لبروتين مستضد ASFV.Translated Description (French)
En tant que grand virus à ADN hautement pathogène, le virus de la peste porcine africaine (VPA) contient d'énormes particules et de nombreuses protéines codées. À l'heure actuelle, peu d'études existantes sur les protéines ASFV ont étudié la fonction de la p17. Des anticorps spécifiques contre la p17 pour promouvoir le développement de techniques de prévention contre la peste porcine africaine (PPA) sont nécessaires de toute urgence. Ici, nous avons exprimé avec succès ASFV p17 dans des cellules CHO en utilisant un système de culture en suspension et généré un anticorps monoclonal (mAb) contre p17. Le MAB a reconnu un nouvel épitope linéaire (8LLSHNLSTREGIK20) et a montré une réactivité spécifique, qui était propice à l'identification de p17 exprimé ectopiquement, du virus recombinant du syndrome reproducteur et respiratoire porcin exprimant p17 et de l'ASFV-SY18. L'épitope était conservateur chez les souches ASFV de génotype I et de génotype II. Dans l'ensemble, le MAB contre la p17 a révélé une détection efficace et des perspectives d'application prometteuses, ce qui en fait un outil utile pour les futures recherches sur les vaccins contre la PPA. La détermination de l'épitope linéaire conservé de p17 contribuerait à l'exploration approfondie de la fonction biologique de la protéine antigénique ASFV.Translated Description (Spanish)
Como un virus de ADN grande altamente patógeno, el virus de la peste porcina africana (VPPA) tiene partículas enormes y numerosas proteínas codificadas. En la actualidad, pocos de los estudios existentes sobre las proteínas del ASFV han investigado la función de p17. Se necesitan con urgencia anticuerpos específicos contra p17 para promover el desarrollo de técnicas de prevención contra la peste porcina africana (PPA). En la presente, expresamos con éxito ASFV p17 en células CHO utilizando un sistema de cultivo en suspensión y generamos un anticuerpo monoclonal (mAb) contra p17. El mAb reconoció un nuevo epítopo lineal (8LLSHNLSTREGIK20) y exhibió reactividad específica, lo que condujo a la identificación de p17 expresada ectópicamente, el virus recombinante del síndrome reproductivo y respiratorio porcino que expresa p17 y el ASFV-SY18. El epítopo fue conservador entre las cepas de ASFV de genotipo I y genotipo II. En general, el mAb contra p17 reveló una detección eficiente y perspectivas de aplicación prometedoras, lo que lo convierte en una herramienta útil para futuras investigaciones de vacunas sobre la PPA. La determinación del epítopo lineal conservado de p17 contribuiría a la exploración en profundidad de la función biológica de la proteína antigénica del ASFV.Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- التعبير عن ASFV p17 في خلايا CHO وتحديد حاتمة جديدة واحدة باستخدام جسم مضاد أحادي النسيلة
- Translated title (French)
- Expression de la p17 de l'ASFV dans les cellules CHO et identification d'un nouvel épitope à l'aide d'un anticorps monoclonal
- Translated title (Spanish)
- Expresión de ASFV p17 en células CHO e identificación de un nuevo epítopo utilizando un anticuerpo monoclonal
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W4385827852
- DOI
- 10.1016/j.virusres.2023.199194
References
- https://openalex.org/W1889987954
- https://openalex.org/W1995787114
- https://openalex.org/W2112078441
- https://openalex.org/W2180268447
- https://openalex.org/W2911630331
- https://openalex.org/W2918407118
- https://openalex.org/W2923687374
- https://openalex.org/W2981124349
- https://openalex.org/W3134004139
- https://openalex.org/W3205582044
- https://openalex.org/W3209790217
- https://openalex.org/W328539804
- https://openalex.org/W4225142530
- https://openalex.org/W4289223571
- https://openalex.org/W4298325924
- https://openalex.org/W4313244116