Published November 1, 1983 | Version v1
Publication

Preparation and characterization of membrane fractions enriched in outer and inner envelope membranes from spinach chloroplasts. I. Electrophoretic and immunochemical analyses.

  • 1. Laboratoire Physiologie Cellulaire & Végétale
  • 2. Centre National pour la Recherche Scientifique et Technique (CNRST)

Description

We have developed a fast and reliable method for the separation of two membrane fractions respectively enriched in outer and inner envelope membranes from isolated, intact, purified spinach chloroplasts kept in a hypertonic medium (0.6 M mannitol).This separation was achieved by osmotically shrinking the inner envelope membrane, thus widening the intermembrane space, and then subsequently removing the "loosened" outer envelope membrane by applying low pressure to the shrunken chloroplasts and slowly extruding them through the small aperture of a Yeda press under controlled conditions.By centrifugation of the mixture obtained through a discontinuous sucrose gradient, we were able to separate two membrane fractions having different densities (fraction 2 or light fraction, d = 1.08 glcm", and fraction 3 or heavy fraction, d = 1.13 g/cm").The recent characterization of polypeptides 10calized on the outer envelope membrane from spinach chloroplasts, E10 and E24 (Joyard,

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

لقد طورنا طريقة سريعة وموثوقة لفصل اثنين من كسور الأغشية على التوالي المخصبة في أغشية المغلف الخارجي والداخلي من بلاستيدات السبانخ الخضراء المعزولة والسليمة والمنقاة المحفوظة في وسط مفرط التوتر (0.6 م مانيتول). وقد تحقق هذا الفصل عن طريق تقليص غشاء المغلف الداخلي تناضحيًا، وبالتالي توسيع المساحة بين الأغشية، ثم إزالة غشاء المغلف الخارجي "المفكوك" عن طريق تطبيق ضغط منخفض على البلاستيدات الخضراء المتقلصة وقذفها ببطء من خلال الفتحة الصغيرة لمكبس Yeda تحت ظروف خاضعة للرقابة. عن طريق الطرد المركزي للخليط الذي تم الحصول عليه من خلال تدرج سكروز متقطع، تمكنا من فصل جزأين من الغشاء لهما كثافات مختلفة (الكسر 2 أو الكسر الخفيف، d = 1.08 glcm "، والجزء 3 أو الكسر الثقيل، d = 1.13 g/cm "). أحدث توصيف للبولي ببتيدات 10 على الغشاء الخارجي للغشاء من كلوربات الكلورية، والبلاستات E10، و E24 (Joyard

Translated Description (French)

Nous avons développé une méthode rapide et fiable pour la séparation de deux fractions membranaires respectivement enrichies en membranes d'enveloppe externe et interne à partir de chloroplastes d'épinards isolés, intacts et purifiés conservés dans un milieu hypertonique (0,6 M de mannitol).Cette séparation a été réalisée en rétrécissant osmotiquement la membrane d'enveloppe interne, élargissant ainsi l'espace intermembranaire, puis en retirant ensuite la membrane d'enveloppe externe « desserrée » en appliquant une faible pression aux chloroplastes rétrécis et en les extrudant lentement à travers la petite ouverture d'une presse Yeda dans des conditions contrôlées. Par centrifugation du mélange obtenu par un gradient discontinu de saccharose, nous avons pu séparer deux fractions membranaires ayant des densités différentes (fraction 2 ou fraction légère, d = 1,08 glcm ", et fraction 3 ou fraction lourde, d = 1,13 g/cm").La caractérisation récente de polypeptides 10califiés sur la membrane d'enveloppe externe à partir de chloroplastes d'épinards, E10 et E24 (Joyard,

Translated Description (Spanish)

Hemos desarrollado un método rápido y confiable para la separación de dos fracciones de membrana enriquecidas respectivamente en membranas de envoltura externa e interna de cloroplastos de espinaca aislados, intactos y purificados mantenidos en un medio hipertónico (manitol 0.6 M). Esta separación se logró mediante la contracción osmótica de la membrana de envoltura interna, ampliando así el espacio intermembrana, y luego eliminando la membrana de envoltura externa "aflojada" aplicando baja presión a los cloroplastos encogidos y extruyéndolos lentamente a través de la pequeña abertura de una prensa Yeda en condiciones controladas. Mediante la centrifugación de la mezcla obtenida a través de un gradiente de sacarosa discontinuo, pudimos separar dos fracciones de membrana con diferentes densidades (fracción 2 o fracción ligera, d = 1.08 glcm ", y fracción 3 o fracción pesada, d = 1.13 g/cm"). La reciente caracterización de polipéptidos 10calizados en la membrana de envoltura externa de cloroplastos de espinaca, E10 y E24 (Joyard,

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
تحضير وتوصيف كسور الغشاء المخصب في أغشية الغلاف الخارجي والداخلي من بلاستيدات السبانخ الخضراء. 1. التحاليل الكهربيّة والمناعيّة الكيميائيّة.
Translated title (French)
Préparation et caractérisation de fractions membranaires enrichies en membranes d'enveloppe externe et interne à partir de chloroplastes d'épinards. I. Analyses électrophorétiques et immunochimiques.
Translated title (Spanish)
Preparación y caracterización de fracciones de membrana enriquecidas en membranas de envoltura externa e interna a partir de cloroplastos de espinaca. I. Análisis electroforéticos e inmunoquímicos.

Identifiers

Other
https://openalex.org/W1962620463
DOI
10.1016/s0021-9258(17)44112-3

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
Morocco

References

  • https://openalex.org/W1480167546
  • https://openalex.org/W1501736937
  • https://openalex.org/W1566010598
  • https://openalex.org/W1591490728
  • https://openalex.org/W1598285753
  • https://openalex.org/W1660143940
  • https://openalex.org/W1775749144
  • https://openalex.org/W1778275885
  • https://openalex.org/W1987010206
  • https://openalex.org/W2017877716
  • https://openalex.org/W2024701614
  • https://openalex.org/W2049103545
  • https://openalex.org/W2062909416
  • https://openalex.org/W2064276596
  • https://openalex.org/W2069944828
  • https://openalex.org/W2091847322
  • https://openalex.org/W2100896484
  • https://openalex.org/W2101108802
  • https://openalex.org/W2111817213
  • https://openalex.org/W2136472618
  • https://openalex.org/W220905478