Published March 15, 2021
| Version v1
Publication
Open
Novel Human Tenascin-C Function-Blocking Camel Single Domain Nanobodies
Creators
- Sayda Dhaouadi1
- Rahma Ben Abderrazek1
-
Thomas Loustau2, 3
- Chérine Abou-Faycal3, 2
- Ayoub Ksouri1
-
William Erne3, 2
- Devadarssen Murdamoothoo3, 2
-
Matthias Mörgelin
-
Andreas J. Kungl4, 5
- Alain C. Jung
- Sonia Ledrappier
- Zakaria Benlasfar1
- Sandrine Bichet6
- Ruth Chiquet‐Ehrismann6
-
Ismaïl Hendaoui6
-
Gertraud Orend3, 2
-
Balkiss Bouhaouala‐Zahar7, 8, 1
- 1. Institut Pasteur de Tunis
- 2. Inserm
- 3. University of Strasbourg
- 4. Biocrates Life Sciences (Austria)
- 5. University of Graz
- 6. Friedrich Miescher Institute
- 7. Tunis University
- 8. Tunis El Manar University
Description
The extracellular matrix (ECM) molecule Tenascin-C (TNC) is well-known to promote tumor progression by multiple mechanisms. However, reliable TNC detection in tissues of tumor banks remains limited. Therefore, we generated dromedary single-domain nanobodies Nb3 and Nb4 highly specific for human TNC (hTNC) and characterized the interaction with TNC by several approaches including ELISA, western blot, isothermal fluorescence titration and negative electron microscopic imaging. Our results revealed binding of both nanobodies to distinct sequences within fibronectin type III repeats of hTNC. By immunofluroescence and immunohistochemical imaging we observed that both nanobodies detected TNC expression in PFA and paraffin embedded human tissue from ulcerative colitis, solid tumors and liver metastasis. As TNC impairs cell adhesion to fibronectin we determined whether the nanobodies abolished this TNC function. Indeed, Nb3 and Nb4 restored adhesion of tumor and mesangial cells on a fibronectin/TNC substratum. We recently showed that TNC orchestrates the immune-suppressive tumor microenvironment involving chemoretention, causing tethering of CD11c+ myeloid/dendritic cells in the stroma. Here, we document that immobilization of DC2.4 dendritic cells by a CCL21 adsorbed TNC substratum was blocked by both nanobodies. Altogether, our novel TNC specific nanobodies could offer valuable tools for detection of TNC in the clinical practice and may be useful to inhibit the immune-suppressive and other functions of TNC in cancer and other diseases.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
من المعروف أن جزيء المصفوفة خارج الخلية (ECM) Tenascin - C (TNC) يعزز تطور الورم من خلال آليات متعددة. ومع ذلك، لا يزال اكتشاف الشركات عبر الوطنية الموثوق به في أنسجة بنوك الأورام محدودًا. لذلك، أنشأنا أجسامًا نانوية أحادية المجال من نوع Dromedary Nb3 و Nb4 محددة للغاية للشركات عبر الوطنية البشرية (hTNC) وميزنا التفاعل مع الشركات عبر الوطنية من خلال العديد من الأساليب بما في ذلك ELISA و WESTERN BLOT ومعايرة الفلورة متساوية الحرارة والتصوير المجهري الإلكتروني السلبي. كشفت نتائجنا عن ارتباط كلا الجسمين النانويين بتسلسلات مميزة داخل تكرارات الفيبرونيكتين من النوع الثالث من hTNC. من خلال التصوير المناعي والتصوير الكيميائي المناعي، لاحظنا أن كلا الجسمين النانويين اكتشفا تعبيرًا عن الخلايا النانوية في النسيج البشري المدمج في البرافين والبارافين من التهاب القولون التقرحي والأورام الصلبة ونقائل الكبد. نظرًا لأن TNC تضعف التصاق الخلايا بالفيبرونيكتين، فقد حددنا ما إذا كانت الأجسام النانوية قد ألغت وظيفة TNC هذه. في الواقع، أعاد Nb3 و Nb4 التصاق الورم والخلايا المساريقية على طبقة أساسية من الفبرونيكتين/TNC. أظهرنا مؤخرًا أن شركة TNC تنسق البيئة الدقيقة للورم المثبطة للمناعة والتي تنطوي على احتباس كيميائي، مما يتسبب في ربط خلايا CD11c + النخاعية/التغصنية في السدى. هنا، نوثق أن تثبيت الخلايا التغصنية DC2.4 بواسطة طبقة تحتية TNC ممتزة من CCL21 قد تم حظره بواسطة كلا الجسمين النانويين. إجمالاً، يمكن أن توفر أجسامنا النانوية الجديدة الخاصة بالشركات عبر الوطنية أدوات قيمة للكشف عن الشركات عبر الوطنية في الممارسة السريرية وقد تكون مفيدة في تثبيط وظائف تثبيط المناعة وغيرها من وظائف الشركات عبر الوطنية في السرطان والأمراض الأخرى.Translated Description (French)
La molécule de matrice extracellulaire (mec) Tenascin-C (TNC) est bien connue pour favoriser la progression tumorale par de multiples mécanismes. Cependant, la détection fiable des TNC dans les tissus des banques de tumeurs reste limitée. Par conséquent, nous avons généré des nanocorps dromadaires à domaine unique Nb3 et Nb4 hautement spécifiques du TNC humain (hTNC) et caractérisé l'interaction avec le TNC par plusieurs approches, notamment ELISA, Western blot, titrage par fluorescence isotherme et imagerie microscopique électronique négative. Nos résultats ont révélé la liaison des deux nanocorps à des séquences distinctes au sein de répétitions de fibronectine de type III de hTNC. Par immunofluroescence et imagerie immunohistochimique, nous avons observé que les deux nanocorps détectaient l'expression du TNC dans le PFA et le tissu humain incorporé en paraffine provenant de la colite ulcéreuse, des tumeurs solides et des métastases hépatiques. Comme le TNC altère l'adhésion cellulaire à la fibronectine, nous avons déterminé si les nanocorps ont aboli cette fonction du TNC. En effet, Nb3 et Nb4 ont restauré l'adhésion des cellules tumorales et mésangiales sur un substrat fibronectine/TNC. Nous avons récemment montré que le TNC orchestre le microenvironnement tumoral immunosuppresseur impliquant la chimiorétention, provoquant l'attache des cellules myéloïdes/dendritiques CD11c+ dans le stroma. Ici, nous documentons que l'immobilisation des cellules dendritiques DC2.4 par un substrat TNC adsorbé par CCL21 a été bloquée par les deux nanocorps. Au total, nos nouveaux nanocorps spécifiques au TNC pourraient offrir des outils précieux pour la détection du TNC dans la pratique clinique et peuvent être utiles pour inhiber les fonctions immunosuppressives et autres du TNC dans le cancer et d'autres maladies.Translated Description (Spanish)
La molécula de matriz extracelular (ECM) tenascina-C (TNC) es bien conocida por promover la progresión tumoral por múltiples mecanismos. Sin embargo, la detección fiable de TNC en tejidos de bancos tumorales sigue siendo limitada. Por lo tanto, generamos nanocuerpos de dromedario de un solo dominio Nb3 y Nb4 altamente específicos para TNC humanas (hTNC) y caracterizamos la interacción con TNC mediante varios enfoques que incluyen ELISA, transferencia Western, titulación de fluorescencia isotérmica e imágenes de microscopio electrónico negativo. Nuestros resultados revelaron la unión de ambos nanocuerpos a secuencias distintas dentro de las repeticiones de fibronectina tipo III de hTNC. Mediante imágenes de inmunofluroescencia e inmunohistoquímica, observamos que ambos nanocuerpos detectaron la expresión de TNC en PFA y tejido humano incrustado en parafina de colitis ulcerosa, tumores sólidos y metástasis hepáticas. Como TNC afecta la adhesión celular a la fibronectina, determinamos si los nanocuerpos abolieron esta función de TNC. De hecho, Nb3 y Nb4 restauraron la adhesión de las células tumorales y mesangiales en un sustrato de fibronectina/TNC. Recientemente demostramos que TNC orquesta el microambiente tumoral inmunosupresor que implica la quimiorretención, causando el anclaje de las células mieloides/dendríticas CD11c+ en el estroma. Aquí, documentamos que la inmovilización de las células dendríticas DC2.4 por un sustrato de TNC adsorbido por CCL21 fue bloqueada por ambos nanocuerpos. En conjunto, nuestros nuevos nanocuerpos específicos de TNC podrían ofrecer herramientas valiosas para la detección de TNC en la práctica clínica y pueden ser útiles para inhibir las funciones inmunosupresoras y otras funciones de TNC en el cáncer y otras enfermedades.Files
pdf.pdf
Files
(2.8 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:8b0ba40bdaf6ad91fa62da9741e63d85
|
2.8 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- جسم نانوي بشري أحادي المجال من نوع Tenascin - C يحجب وظيفة الجمل
- Translated title (French)
- Nouveaux nanocorps à domaine unique de chameau bloquant la fonction de la ténascine-C humaine
- Translated title (Spanish)
- Novedosos nanocuerpos de un solo dominio de camello que bloquean la función de la tenascina C humana
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W3137287790
- DOI
- 10.3389/fimmu.2021.635166
References
- https://openalex.org/W1121277736
- https://openalex.org/W1868626511
- https://openalex.org/W1908138908
- https://openalex.org/W1965745529
- https://openalex.org/W1968209401
- https://openalex.org/W1969299241
- https://openalex.org/W1970449988
- https://openalex.org/W1971727851
- https://openalex.org/W1976430153
- https://openalex.org/W1976445795
- https://openalex.org/W1986055788
- https://openalex.org/W1998947159
- https://openalex.org/W2011682180
- https://openalex.org/W2013068560
- https://openalex.org/W2014868340
- https://openalex.org/W2019938793
- https://openalex.org/W2020356184
- https://openalex.org/W2021328900
- https://openalex.org/W2022447221
- https://openalex.org/W2038167103
- https://openalex.org/W2040440325
- https://openalex.org/W2045431067
- https://openalex.org/W2049472191
- https://openalex.org/W2055031783
- https://openalex.org/W2059969591
- https://openalex.org/W2060950703
- https://openalex.org/W2062568147
- https://openalex.org/W2071469224
- https://openalex.org/W2072854952
- https://openalex.org/W2074363834
- https://openalex.org/W2076705364
- https://openalex.org/W2078713533
- https://openalex.org/W2080299160
- https://openalex.org/W2082947088
- https://openalex.org/W2087109579
- https://openalex.org/W2087240594
- https://openalex.org/W2088449846
- https://openalex.org/W2089199921
- https://openalex.org/W2090475828
- https://openalex.org/W2093435682
- https://openalex.org/W2100859829
- https://openalex.org/W2101619182
- https://openalex.org/W2106572080
- https://openalex.org/W2111931758
- https://openalex.org/W2114849954
- https://openalex.org/W2120645483
- https://openalex.org/W2127457605
- https://openalex.org/W2134478975
- https://openalex.org/W2138317959
- https://openalex.org/W2142376043
- https://openalex.org/W2145028356
- https://openalex.org/W2145064946
- https://openalex.org/W2151442561
- https://openalex.org/W2152463831
- https://openalex.org/W2152548352
- https://openalex.org/W2154044013
- https://openalex.org/W2161709523
- https://openalex.org/W2170564629
- https://openalex.org/W2170840506
- https://openalex.org/W2194697488
- https://openalex.org/W2230654530
- https://openalex.org/W2289172605
- https://openalex.org/W2391908469
- https://openalex.org/W2415549364
- https://openalex.org/W2518365716
- https://openalex.org/W2551462252
- https://openalex.org/W2557542910
- https://openalex.org/W2560618567
- https://openalex.org/W2580666741
- https://openalex.org/W2621985135
- https://openalex.org/W2759728403
- https://openalex.org/W2766991633
- https://openalex.org/W2771996363
- https://openalex.org/W2778066078
- https://openalex.org/W2790242844
- https://openalex.org/W2903477660
- https://openalex.org/W2914691657
- https://openalex.org/W2925143807
- https://openalex.org/W2938175727
- https://openalex.org/W2944745394
- https://openalex.org/W2953401235
- https://openalex.org/W2991327332
- https://openalex.org/W3000210850
- https://openalex.org/W3037295673
- https://openalex.org/W3037331404
- https://openalex.org/W3043675621
- https://openalex.org/W3045893613
- https://openalex.org/W3094132670
- https://openalex.org/W3130533812
- https://openalex.org/W4229892776
- https://openalex.org/W4256530101
- https://openalex.org/W46202082
- https://openalex.org/W637927167