Genetic Transformation of Dendrobium 'Sonia Earsakul' with Antisense Carica papaya ACO1 Gene
Description
Dendrobium orchid is one of the major export cut flowers not only in Thailand but also for several tropical countries. However, the production of ethylene by their flowers causes a shorter vase life. Flowers that contained lower levels of ethylene usually exhibited delayed senescence and consequently prolonged vase life. The transfer of antisense ACC oxidase (ACO) gene into orchid, in theory, may leads to decreased ethylene production because this gene can down regulates the ethylene biosynthesis pathway. This study focuses on the transformation and the existence and expression of the antisense ACO1 gene from papaya, namely (CP-ACO1), which was transferred in to Dendrobium 'Sonia Earsakul'. The successful stable transformation event obtained and the existence of the transferred gene was determined using PCR, dot blot hybridization and Southern blot hybridization techniques. The results revealed that antisense CP-ACO1 and hygromycin phosphotransferase (hpt) gene existed in all transgenic lines confirmed by PCR technique. The genomic dot blot confirmed the incorporation of the transgene in transgenic plant genome. Southern blot hybridization revealed the existed of one to four sets of the gene in transgenic lines. The expression of antisense CP-ACO1 gene was analyzed through the level of ACO enzyme activity and ethylene production in transgenic orchid. All of the transgenic lines had lower ACO enzyme activity and lower ethylene production than that of the non-transgenic orchid plants.
Translated Descriptions
Translated Description (Arabic)
ديندروبيوم الأوركيد هي واحدة من أهم الزهور المقطوفة للتصدير ليس فقط في تايلاند ولكن أيضًا للعديد من البلدان الاستوائية. ومع ذلك، فإن إنتاج الإيثيلين بواسطة زهورها يسبب حياة مزهرية أقصر. عادةً ما تُظهر الأزهار التي تحتوي على مستويات أقل من الإيثيلين شيخوخة متأخرة وبالتالي إطالة عمر المزهرية. من الناحية النظرية، قد يؤدي نقل جين أكسيديز ACC (ACO) المضاد للإحساس إلى الأوركيد إلى انخفاض إنتاج الإيثيلين لأن هذا الجين يمكن أن ينظم مسار التخليق الحيوي للإيثيلين. تركز هذه الدراسة على تحول ووجود وتعبير جين ACO 1 من البابايا، وهو ( CP - ACO 1)، والذي تم نقله إلى Dendrobium 'Sonia Earsakul'. تم الحصول على حدث التحول المستقر الناجح وتم تحديد وجود الجين المنقول باستخدام تقنيات تفاعل البوليميراز المتسلسل وتهجين البقعة النقطية وتهجين البقعة الجنوبية. كشفت النتائج أن الجين المضاد للشعور CP - ACO 1 و hygromycin phosphotransferase (HPT) موجود في جميع الخطوط المعدلة وراثيًا التي أكدتها تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل. أكدت وصمة عار نقطة الجينوم دمج الجين المحور في الجينوم النباتي المحور وراثيا. كشف تهجين البقعة الجنوبية عن وجود مجموعة إلى أربع مجموعات من الجين في الخطوط المعدلة وراثيًا. تم تحليل التعبير عن الجين المضاد للشعور < em> CP - ACO 1 من خلال مستوى نشاط إنزيم ACO وإنتاج الإيثيلين في السحلية المعدلة وراثيًا. كان لجميع الخطوط المعدلة وراثيًا نشاط إنزيم ACO أقل وإنتاج إيثيلين أقل من نباتات الأوركيد غير المعدلة وراثيًا.
Translated Description (French)
L'orchidéeDendrobium est l'une des principales fleurs coupées d'exportation non seulement en Thaïlande, mais aussi dans plusieurs pays tropicaux. Cependant, la production d'éthylène par leurs fleurs entraîne une durée de vie plus courte du vase. Les fleurs qui contenaient des niveaux plus faibles d'éthylène présentaient généralement une sénescence retardée et par conséquent une durée de vie prolongée du vase. Le transfert du gène antisens ACC oxydase (ACO) dans l'orchidée, en théorie, peut entraîner une diminution de la production d'éthylène car ce gène peut réguler à la baisse la voie de biosynthèse de l'éthylène. Cette étude se concentre sur la transformation et l'existence et l'expression du gène antisens ACO1 de la papaye, à savoir ( CP-ACO 1), qui a été transféré dans Dendrobium 'Sonia Earsakul'. L'événement de transformation stable réussi obtenu et l'existence du gène transféré ont été déterminés à l'aide de techniques de PCR, d'hybridation par transfert de points et d'hybridation par transfert de Southern. Les résultats ont révélé que le gène antisens CP-ACO 1 et hygromycine phosphotransférase (hpt) existait dans toutes les lignées transgéniques confirmées par la technique PCR. Le point blot génomique a confirmé l'incorporation du transgène dans le génome de la plante transgénique. L'hybridation par Southern blot a révélé l'existence d'un à quatre ensembles du gène dans des lignées transgéniques. L'expression du gène antisens CP-ACO1 a été analysée à travers le niveau d'activité enzymatique de l'ACO et la production d'éthylène dans l'orchidée transgénique. Toutes les lignées transgéniques avaient une activité enzymatique ACO plus faible et une production d'éthylène plus faible que celle des plantes d'orchidées non transgéniques.
Translated Description (Spanish)
La orquídea Dendrobium es una de las principales flores cortadas de exportación no solo en Tailandia, sino también en varios países tropicales. Sin embargo, la producción de etileno por sus flores causa una vida más corta en el jarrón. Las flores que contenían niveles más bajos de etileno generalmente exhibían una senescencia retardada y, en consecuencia, una vida útil prolongada. La transferencia del gen antisentido de la ACC oxidasa (ACO) a la orquídea, en teoría, puede conducir a una disminución de la producción de etileno porque este gen puede regular negativamente la vía de biosíntesis de etileno. Este estudio se centra en la transformación y la existencia y expresión del gen antisentido ACO1 de la papaya, a saber ( CP-ACO 1), que se transfirió a Dendrobium 'Sonia Earsakul'. El evento de transformación estable exitoso obtenido y la existencia del gen transferido se determinó utilizando técnicas de PCR, hibridación por transferencia de puntos e hibridación por transferencia Southern. Los resultados revelaron que el gen antisentido CP-ACO 1 y higromicina fosfotransferasa (hpt) existía en todas las líneas transgénicas confirmadas por la técnica de PCR. La transferencia de puntos genómica confirmó la incorporación del transgén en el genoma de la planta transgénica. La hibridación de transferencia Southern reveló la existencia de uno a cuatro conjuntos del gen en líneas transgénicas. La expresión del gen antisentido CP-ACO1 se analizó a través del nivel de actividad de la enzima ACO y la producción de etileno en orquídeas transgénicas. Todas las líneas transgénicas tuvieron menor actividad enzimática ACO y menor producción de etileno que las plantas de orquídeas no transgénicas.
Files
29145.pdf
Files
(1.7 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:fcf8a95da62cc483d0b9583552669a8e
|
1.7 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- التحول الوراثي لـ Dendrobium 'Sonia Earsakul' مع جين Antisense Carica papaya ACO1
- Translated title (French)
- Transformation génétique de Dendrobium 'Sonia Earsakul' avec le gène antisens Carica papaya ACO1
- Translated title (Spanish)
- Transformación genética de Dendrobium 'Sonia Earsakul' con gen ACO1 de papaya Carica antisentido
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W1939614397
- DOI
- 10.5539/mas.v9n12p125
References
- https://openalex.org/W1601630865
- https://openalex.org/W1969411528
- https://openalex.org/W1977543149
- https://openalex.org/W1979043028
- https://openalex.org/W1991862319
- https://openalex.org/W1992512060
- https://openalex.org/W2000971004
- https://openalex.org/W2004796443
- https://openalex.org/W2005258477
- https://openalex.org/W2036641351
- https://openalex.org/W2044287636
- https://openalex.org/W2059075652
- https://openalex.org/W2059735255
- https://openalex.org/W2067779169
- https://openalex.org/W2069583292
- https://openalex.org/W2079458010
- https://openalex.org/W2097621451
- https://openalex.org/W2099862936
- https://openalex.org/W2108439094
- https://openalex.org/W2127525535
- https://openalex.org/W2132110116
- https://openalex.org/W2140516030
- https://openalex.org/W2155649556
- https://openalex.org/W2220095415
- https://openalex.org/W270647958
- https://openalex.org/W4254918474