Published June 5, 2013 | Version v1
Publication Open

Development and Evaluation of a Pseudovirus-Luciferase Assay for Rapid and Quantitative Detection of Neutralizing Antibodies against Enterovirus 71

Creators

  • 1. Peking University
  • 2. National Institutes for Food and Drug Control
  • 3. National Institute of Biological Sciences, Beijing
  • 4. Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention
  • 5. Guangxi Center for Disease Prevention and Control

Description

The level of neutralizing antibodies (NtAb) induced by vaccine inoculation is an important endpoint to evaluate the efficacy of EV71 vaccine. In order to evaluate the efficacy of EV71 vaccine, here, we reported the development of a novel pseudovirus system expression firefly luciferase (PVLA) for the quantitative measurement of NtAb. We first evaluated and validated the sensitivity and specificity of the PVLA method. A total of 326 serum samples from an epidemiological survey and 144 serum specimens from 3 clinical trials of EV71 vaccines were used, and the level of each specimen's neutralizing antibodies (NtAb) was measured in parallel using both the conventional CPE-based and PVLA-based assay. Against the standard neutralization assay based on the inhibition of the cytopathic effect (CPE), the sensitivity and specificity of the PVLA method are 98% and 96%, respectively. Then, we tested the potential interference of NtAb against hepatitis A virus, Polio-I, Polio-II, and Polio-III standard antisera (WHO) and goat anti-G10/CA16 serum, the PVLA based assay showed no cross-reactivity with NtAb against other specific sera. Importantly, unlike CPE based method, no live replication-competent EV71 is used during the measurement. Taken together, PVLA is a rapid and specific assay with higher sensitivity and accuracy. It could serve as a valuable tool in assessing the efficacy of EV71 vaccines in clinical trials and disease surveillance in epidemiology studies.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

يعد مستوى تحييد الأجسام المضادة (NtAb) الناجم عن تلقيح اللقاح نقطة نهاية مهمة لتقييم فعالية لقاح EV71. من أجل تقييم فعالية لقاح EV71، أبلغنا هنا عن تطوير تعبير نظام الفيروسات الزائفة الجديد فايرفلاي لوسيفيراز (PVLA) للقياس الكمي لـ NtAb. قمنا أولاً بتقييم والتحقق من حساسية وخصوصية طريقة PVLA. تم استخدام ما مجموعه 326 عينة مصل من مسح وبائي و 144 عينة مصل من 3 تجارب سريرية للقاحات EV71، وتم قياس مستوى الأجسام المضادة المعادلة لكل عينة (NtAb) بالتوازي باستخدام كل من المقايسة التقليدية القائمة على CPE والقائمة على PVLA. مقابل اختبار التحييد القياسي القائم على تثبيط التأثير الخلوي (CPE)، فإن حساسية وخصوصية طريقة PVLA هي 98 ٪ و 96 ٪ على التوالي. بعد ذلك، اختبرنا التداخل المحتمل لـ NtAb ضد فيروس التهاب الكبد A وشلل الأطفال I وشلل الأطفال II وشلل الأطفال III ومصل الماعز المضاد لـ G10/CA16، أظهر الفحص القائم على PVLA عدم وجود تفاعل متقاطع مع NtAb ضد الأمصال المحددة الأخرى. الأهم من ذلك، على عكس الطريقة القائمة على CPE، لا يتم استخدام EV71 المختص بالنسخ المتماثل المباشر أثناء القياس. معا، PVLA هو اختبار سريع ومحدد مع حساسية ودقة أعلى. يمكن أن يكون بمثابة أداة قيمة في تقييم فعالية لقاحات EV71 في التجارب السريرية ومراقبة الأمراض في دراسات علم الأوبئة.

Translated Description (French)

Le niveau d'anticorps neutralisants (NtAb) induit par l'inoculation du vaccin est un critère d'évaluation important pour évaluer l'efficacité du vaccin EV71. Afin d'évaluer l'efficacité du vaccin EV71, nous avons rapporté ici le développement d'un nouveau système d'expression du pseudovirus luciférase de luciole (PVLA) pour la mesure quantitative de NtAb. Nous avons d'abord évalué et validé la sensibilité et la spécificité de la méthode PVLA. Au total, 326 échantillons de sérum provenant d'une enquête épidémiologique et 144 échantillons de sérum provenant de 3 essais cliniques de vaccins EV71 ont été utilisés, et le niveau des anticorps neutralisants (NtAb) de chaque échantillon a été mesuré en parallèle à l'aide du dosage conventionnel à base de CPE et de PVLA. Contre le test de neutralisation standard basé sur l'inhibition de l'effet cytopathique (CPE), la sensibilité et la spécificité de la méthode PVLA sont respectivement de 98% et 96%. Ensuite, nous avons testé l'interférence potentielle du NtAb contre le virus de l'hépatite A, les antisérums standard Polio-I, Polio-II et Polio-III (OMS) et le sérum de chèvre anti-G10/CA16, le test à base de PVLA n'a montré aucune réactivité croisée avec le NtAb contre d'autres sérums spécifiques. Il est important de noter que, contrairement à la méthode basée sur le CPE, aucun EV71 compatible avec la réplication en direct n'est utilisé pendant la mesure. Pris ensemble, le PVLA est un dosage rapide et spécifique avec une sensibilité et une précision plus élevées. Il pourrait servir d'outil précieux pour évaluer l'efficacité des vaccins EV71 dans les essais cliniques et la surveillance des maladies dans les études épidémiologiques.

Translated Description (Spanish)

El nivel de anticuerpos neutralizantes (NtAb) inducido por la inoculación de la vacuna es un criterio de valoración importante para evaluar la eficacia de la vacuna EV71. Con el fin de evaluar la eficacia de la vacuna EV71, aquí, informamos el desarrollo de un nuevo sistema de pseudovirus de expresión de luciferasa de luciérnaga (PVLA) para la medición cuantitativa de NtAb. Primero evaluamos y validamos la sensibilidad y especificidad del método PVLA. Se utilizaron un total de 326 muestras de suero de una encuesta epidemiológica y 144 muestras de suero de 3 ensayos clínicos de vacunas EV71, y se midió el nivel de anticuerpos neutralizantes de cada muestra (NtAb) en paralelo utilizando el ensayo convencional basado en CPE y PVLA. Contra el ensayo de neutralización estándar basado en la inhibición del efecto citopático (CPE), la sensibilidad y especificidad del método PVLA son 98% y 96%, respectivamente. Luego, probamos la interferencia potencial de NtAb contra el virus de la hepatitis A, los antisueros estándar Polio-I, Polio-II y Polio-III (OMS) y el suero de cabra anti-G10/CA16, el ensayo basado en PVLA no mostró reactividad cruzada con NtAb contra otros sueros específicos. Es importante destacar que, a diferencia del método basado en CPE, no se utiliza EV71 competente para la replicación en vivo durante la medición. En conjunto, PVLA es un ensayo rápido y específico con mayor sensibilidad y precisión. Podría servir como una herramienta valiosa para evaluar la eficacia de las vacunas EV71 en ensayos clínicos y la vigilancia de enfermedades en estudios epidemiológicos.

Files

journal.pone.0064116&type=printable.pdf

Files (714.1 kB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:cb9c15de82df34278b9a12dfbeb4001a
714.1 kB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
تطوير وتقييم اختبار فيروس لوسيفيراز الكاذب للكشف السريع والكمي عن الأجسام المضادة المحايدة ضد الفيروس المعوي 71
Translated title (French)
Développement et évaluation d'un test Pseudovirus-Luciférase pour la détection rapide et quantitative des anticorps neutralisants contre l'entérovirus 71
Translated title (Spanish)
Desarrollo y evaluación de un ensayo de pseudovirus-luciferasa para la detección rápida y cuantitativa de anticuerpos neutralizantes contra enterovirus 71

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2017348054
DOI
10.1371/journal.pone.0064116

Is supplement to
https://openalex.org/W4385622522 (Other)
https://openalex.org/W3133547117 (Other)
https://openalex.org/W3114250596 (Other)
https://openalex.org/W3110499570 (Other)
https://openalex.org/W2373186948 (Other)
https://openalex.org/W2309520848 (Other)
https://openalex.org/W2093961711 (Other)
https://openalex.org/W2063036651 (Other)
https://openalex.org/W1545923077 (Other)
https://openalex.org/W1544228326 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
China

References

  • https://openalex.org/W141954049
  • https://openalex.org/W1587830797
  • https://openalex.org/W175053650
  • https://openalex.org/W1976420412
  • https://openalex.org/W1977325508
  • https://openalex.org/W1989387089
  • https://openalex.org/W1995031109
  • https://openalex.org/W2010279821
  • https://openalex.org/W2013518376
  • https://openalex.org/W2021944547
  • https://openalex.org/W2037670698
  • https://openalex.org/W2046730970
  • https://openalex.org/W2052933576
  • https://openalex.org/W2055952761
  • https://openalex.org/W2066717721
  • https://openalex.org/W2067847940
  • https://openalex.org/W2069260705
  • https://openalex.org/W2073166377
  • https://openalex.org/W2086468897
  • https://openalex.org/W2093639082
  • https://openalex.org/W2100008113
  • https://openalex.org/W2101141058
  • https://openalex.org/W2112569589
  • https://openalex.org/W2118821366
  • https://openalex.org/W2123753779
  • https://openalex.org/W2126764168
  • https://openalex.org/W2142503619
  • https://openalex.org/W2314964906
  • https://openalex.org/W2413037167