Published September 8, 2017 | Version v1
Publication Open

Purification and Characterization of Latent Polyphenol Oxidase from Apricot (<i>Prunus armeniaca</i> L.)

Creators

  • 1. Constantine 1 University
  • 2. University of Vienna

Description

Polyphenol oxidase from apricot (Prunus armeniaca) (PaPPO) was purified in its latent form (L-PaPPO), and the molecular weight was determined to be 63 kDa by SDS-PAGE. L-PaPPO was activated in the presence of substrate at low pH. The activity was enhanced by CuSO4 and low concentrations (≤ 2 mM) of SDS. PaPPO has its pH and temperature optimum at pH 4.5 and 45 °C for catechol as substrate. It showed diphenolase activity and highest affinity toward 4-methylcatechol (KM = 2.0 mM) and chlorogenic acid (KM = 2.7 mM). L-PaPPO was found to be spontaneously activated during storage at 4 °C, creating a new band at 38 kDa representing the activated form (A-PaPPO). The mass of A-PaPPO was determined by mass spectrometry as 37 455.6 Da (Asp102 → Leu429). Both L-PaPPO and A-PaPPO were identified as polyphenol oxidase corresponding to the known PaPPO sequence (UniProt O81103) by means of peptide mass fingerprinting.

⚠️ This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%

Translated Description (Arabic)

تم تنقية البوليفينول أوكسيديز من المشمش (البرقوق الأرمني) (PaPPO) في شكله الكامن (L - PaPPO)، وتم تحديد الوزن الجزيئي ليكون 63 كيلو دالتون بواسطة SDS - PAGE. تم تنشيط L - PaPPO في وجود ركيزة عند درجة حموضة منخفضة. تم تعزيز النشاط بواسطة CuSO4 وتركيزات منخفضة (≤ 2 مم) من SDS. يحتوي PaPPO على درجة الحموضة ودرجة الحرارة المثلى عند درجة الحموضة 4.5 و 45 درجة مئوية للكاتيكول كركيزة. أظهر نشاط ثنائي الفينول وأعلى تقارب تجاه 4 -ميثيل كاتيكول (كم = 2.0 ملليمتر) وحمض الكلوروجينيك (كم = 2.7 ملليمتر). تم العثور على L - PaPPO يتم تنشيطه تلقائيًا أثناء التخزين عند 4 درجات مئوية، مما يخلق نطاقًا جديدًا عند 38 كيلو دالتون يمثل النموذج المنشط (A - PaPPO). تم تحديد كتلة A - PaPPO بواسطة قياس الطيف الكتلي على أنها 37455.6 دا (Asp102 → Leu429). تم تحديد كل من L - PaPPO و A - PaPPO على أنهما أكسيديز البوليفينول المطابق لتسلسل PaPPO المعروف (UniProt O81103) عن طريق أخذ بصمات كتلة الببتيد.

Translated Description (French)

La polyphénol oxydase de l'abricot (Prunus armeniaca) (PaPPO) a été purifiée sous sa forme latente (L-PaPPO), et le poids moléculaire a été déterminé à 63 kDa par SDS-PAGE. La L-PaPPO a été activée en présence de substrat à faible pH. L'activité a été renforcée par CuSO4 et de faibles concentrations (≤ 2 mM) de SDS. Le PaPPO a son pH et sa température optimaux à pH 4,5 et 45 °C pour le catéchol comme substrat. Il a montré une activité diphénolase et une affinité maximale envers le 4-méthylcatéchol (KM = 2,0 mM) et l'acide chlorogénique (KM = 2,7 mM). La L-PaPPO s'est révélée spontanément activée pendant le stockage à 4 °C, créant une nouvelle bande à 38 kDa représentant la forme activée (A-PaPPO). La masse d'A-PaPPO a été déterminée par spectrométrie de masse comme 37 455,6 Da (Asp102 → Leu429). La L-PaPPO et l'A-PaPPO ont été identifiées comme polyphénol oxydase correspondant à la séquence connue de PaPPO (UniProt O81103) au moyen d'empreintes peptidiques de masse.

Translated Description (Spanish)

La polifenol oxidasa de albaricoque (Prunus armeniaca) (PaPPO) se purificó en su forma latente (L-PaPPO) y se determinó que el peso molecular era de 63 kDa mediante SDS-PAGE. L-PaPPO se activó en presencia de sustrato a pH bajo. La actividad se vio potenciada por CuSO4 y bajas concentraciones (≤ 2 mM) de SDS. PaPPO tiene su pH y temperatura óptimos a pH 4,5 y 45 °C para el catecol como sustrato. Mostró actividad difenolasa y mayor afinidad hacia 4-metilcatecol (KM = 2.0 mM) y ácido clorogénico (KM = 2.7 mM). Se encontró que L-PaPPO se activaba espontáneamente durante el almacenamiento a 4 °C, creando una nueva banda a 38 kDa que representa la forma activada (A-PaPPO). La masa de A-PaPPO se determinó por espectrometría de masas como 37 455,6 Da (Asp102 → Leu429). Tanto L-PaPPO como A-PaPPO se identificaron como polifenol oxidasa correspondiente a la secuencia conocida de PaPPO (UniProt O81103) por medio de la huella de masa peptídica.

Files

acs.jafc.7b03210.pdf

Files (15.8 kB)

⚠️ Please wait a few minutes before your translated files are ready ⚠️ Note: Some files might be protected thus translations might not work.
Name Size Download all
md5:8640cbdbf5641a721c212e4b784d339c
15.8 kB
Preview Download

Additional details

Additional titles

Translated title (Arabic)
تنقية وتوصيف أكسدة البوليفينول الكامنة من المشمش (<i>البرقوق الأرمني L</i>.)
Translated title (French)
Purification et caractérisation de la polyphénol oxydase latente de l'abricot (<i>Prunus armeniaca</i> L.)
Translated title (Spanish)
Purificación y caracterización de polifenol oxidasa latente de albaricoque (<i>Prunus armeniaca</i> L.)

Identifiers

Other
https://openalex.org/W2749136745
DOI
10.1021/acs.jafc.7b03210

Is supplement to
https://openalex.org/W83248454 (Other)
https://openalex.org/W640749281 (Other)
https://openalex.org/W4243376886 (Other)
https://openalex.org/W2948133062 (Other)
https://openalex.org/W2920306048 (Other)
https://openalex.org/W2379811422 (Other)
https://openalex.org/W2375248782 (Other)
https://openalex.org/W2182558493 (Other)
https://openalex.org/W2060683342 (Other)
https://openalex.org/W1979023687 (Other)

GreSIS Basics Section

Is Global South Knowledge
Yes
Country
Algeria

References

  • https://openalex.org/W1579900246
  • https://openalex.org/W1965859058
  • https://openalex.org/W1968721895
  • https://openalex.org/W1973200007
  • https://openalex.org/W1974152945
  • https://openalex.org/W1975920134
  • https://openalex.org/W1979023687
  • https://openalex.org/W1980178720
  • https://openalex.org/W1988869306
  • https://openalex.org/W1992867286
  • https://openalex.org/W1993353569
  • https://openalex.org/W1994978690
  • https://openalex.org/W1996289077
  • https://openalex.org/W1996525640
  • https://openalex.org/W2003233901
  • https://openalex.org/W2004439206
  • https://openalex.org/W2005800375
  • https://openalex.org/W2007382701
  • https://openalex.org/W2018782849
  • https://openalex.org/W2019597158
  • https://openalex.org/W2022453483
  • https://openalex.org/W2023644371
  • https://openalex.org/W2041482145
  • https://openalex.org/W2044117564
  • https://openalex.org/W2049149746
  • https://openalex.org/W2050062164
  • https://openalex.org/W2058162710
  • https://openalex.org/W2062811124
  • https://openalex.org/W2065232892
  • https://openalex.org/W2069349202
  • https://openalex.org/W2092262173
  • https://openalex.org/W2092659378
  • https://openalex.org/W2100725614
  • https://openalex.org/W2100837269
  • https://openalex.org/W2101714985
  • https://openalex.org/W2129143670
  • https://openalex.org/W2134378672
  • https://openalex.org/W2135143214
  • https://openalex.org/W2139010942
  • https://openalex.org/W2148848583
  • https://openalex.org/W2158152069
  • https://openalex.org/W2177500045
  • https://openalex.org/W2300407673
  • https://openalex.org/W2313035794
  • https://openalex.org/W2318825748
  • https://openalex.org/W2319074002
  • https://openalex.org/W2327861754
  • https://openalex.org/W2522296777
  • https://openalex.org/W2522394138
  • https://openalex.org/W2587764912
  • https://openalex.org/W2607046793
  • https://openalex.org/W2610915047
  • https://openalex.org/W4213159886
  • https://openalex.org/W4230483796
  • https://openalex.org/W4240584582
  • https://openalex.org/W4293247451
  • https://openalex.org/W431010271
  • https://openalex.org/W821905421