Published October 2, 2020
| Version v1
Publication
Open
Selection of a Single Domain Antibody, Specific for an HLA-Bound Epitope of the Mycobacterial Ag85B Antigen
Creators
- 1. Universidad Nacional Autónoma de México
- 2. Leiden University Medical Center
- 3. King's College London
Description
T cells recognizing epitopes on the surface of mycobacteria-infected macrophages can impart protection, but with associated risk for reactivation to lung pathology. We aimed to identify antibodies specific to such epitopes, which carry potentials for development toward novel therapeutic constructs. Since epitopes presented in the context of major histocompatibility complex alleles are rarely recognized by naturally produced antibodies, we used a phage display library for the identification of monoclonal human single domain antibody producing clones. The selected 2C clone displayed T cell receptor-like recognition of an HLA-A*0201 bound 199KLVANNTRL207 peptide from the Ag85B antigen, which is known to be an immunodominant epitope for human T cells. The specificity of the selected domain antibody was demonstrated by solid phase immunoassay and by immunofluorescent surface staining of peptide loaded cells of the T2 cell line. The antibody affinity binding was determined by biolayer interferometry. Our results validated the used technologies as suitable for the generation of antibodies against epitopes on the surface of Mycobacterium tuberculosis infected cells. The potential approaches forward the development of antibody in immunotherapy of tuberculosis have been outlined in the discussion.
Translated Descriptions
⚠️
This is an automatic machine translation with an accuracy of 90-95%
Translated Description (Arabic)
يمكن للخلايا التائية التي تتعرف على القمم اللاصقة على سطح الخلايا البلعمية المصابة بالبكتيريا الفطرية أن توفر الحماية، ولكن مع وجود خطر مرتبط بإعادة تنشيط أمراض الرئة. كنا نهدف إلى تحديد الأجسام المضادة الخاصة بهذه الحواتم، والتي تحمل إمكانات للتطور نحو بنيات علاجية جديدة. نظرًا لأن الحواتم المقدمة في سياق الأليلات المعقدة الرئيسية للتوافق النسيجي نادرًا ما يتم التعرف عليها بواسطة الأجسام المضادة المنتجة بشكل طبيعي، فقد استخدمنا مكتبة عرض الملتهمة لتحديد الأجسام المضادة أحادية النسيلة التي تنتج مستنسخات أحادية المجال البشري. أظهر المستنسخ 2C الذي تم اختياره تمييزًا شبيهًا بمستقبل الخلايا التائية لببتيد HLA - A*0201 المرتبط بـ 199KLVANNTRL207 من مستضد Ag85B، والذي يُعرف بأنه ظهارة سائدة مناعيًا للخلايا التائية البشرية. تم إثبات خصوصية الجسم المضاد للمجال المختار من خلال المقايسة المناعية للطور الصلب وتلطيخ سطح الفلورسنت المناعي للخلايا المحملة بالببتيد من خط خلية T2. تم تحديد ارتباط تقارب الأجسام المضادة عن طريق قياس التداخل بين الطبقات الحيوية. أثبتت نتائجنا صحة التقنيات المستخدمة على أنها مناسبة لتوليد الأجسام المضادة ضد الحواتم على سطح الخلايا المصابة بالمتفطرة السلية. تم تحديد النهج المحتملة للمضي قدمًا في تطوير الأجسام المضادة في العلاج المناعي للسل في المناقشة.Translated Description (French)
Les lymphocytes T reconnaissant les épitopes à la surface des macrophages infectés par les mycobactéries peuvent conférer une protection, mais avec un risque associé de réactivation de la pathologie pulmonaire. Nous avons cherché à identifier des anticorps spécifiques de ces épitopes, qui présentent un potentiel de développement vers de nouvelles constructions thérapeutiques. Étant donné que les épitopes présentés dans le contexte des allèles du complexe majeur d'histocompatibilité sont rarement reconnus par les anticorps produits naturellement, nous avons utilisé une bibliothèque d'affichage de phages pour l'identification de clones monoclonaux humains produisant des anticorps à domaine unique. Le clone 2C sélectionné présentait une reconnaissance semblable au récepteur des lymphocytes T d'un peptide 199KLVANNTRL207 lié à HLA-A*0201 à partir de l'antigène Ag85B, qui est connu pour être un épitope immunodominant pour les lymphocytes T humains. La spécificité de l'anticorps de domaine sélectionné a été démontrée par immunodosage en phase solide et par coloration de surface immunofluorescente de cellules chargées de peptides de la lignée cellulaire T2. La liaison de l'affinité des anticorps a été déterminée par interférométrie de la couche biologique. Nos résultats ont validé les technologies utilisées comme étant adaptées à la génération d'anticorps contre les épitopes à la surface des cellules infectées par Mycobacterium tuberculosis. Les approches potentielles pour le développement d'anticorps dans l'immunothérapie de la tuberculose ont été décrites dans la discussion.Translated Description (Spanish)
Las células T que reconocen epítopos en la superficie de los macrófagos infectados por micobacterias pueden impartir protección, pero con el riesgo asociado de reactivación de la patología pulmonar. Nuestro objetivo fue identificar anticuerpos específicos para dichos epítopos, que tienen potencial para el desarrollo de nuevas construcciones terapéuticas. Dado que los epítopos presentados en el contexto de los alelos del complejo mayor de histocompatibilidad rara vez son reconocidos por los anticuerpos producidos naturalmente, utilizamos una biblioteca de presentación en fagos para la identificación de clones productores de anticuerpos monoclonales humanos de dominio único. El clon 2C seleccionado mostró un reconocimiento similar al receptor de linfocitos T de un péptido 199KLVANNTRL207 unido a HLA-A*0201 del antígeno Ag85B, que se sabe que es un epítopo inmunodominante para linfocitos T humanos. La especificidad del anticuerpo de dominio seleccionado se demostró mediante inmunoensayo en fase sólida y mediante tinción de superficie inmunofluorescente de células cargadas con péptido de la línea celular T2. La unión por afinidad del anticuerpo se determinó mediante interferometría de biocapa. Nuestros resultados validaron las tecnologías utilizadas como adecuadas para la generación de anticuerpos contra epítopos en la superficie de células infectadas por Mycobacterium tuberculosis. Los posibles enfoques para el desarrollo de anticuerpos en la inmunoterapia de la tuberculosis se han descrito en la discusión.Files
pdf.pdf
Files
(2.7 MB)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:74d797120a9278fe920e5f4df8463135
|
2.7 MB | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- اختيار جسم مضاد أحادي المجال، خاص بحاتمة HLA المرتبطة بمستضد Ag85B الفطري
- Translated title (French)
- Sélection d'un anticorps à domaine unique, spécifique d'un épitope lié à HLA de l'antigène Ag85B mycobactérien
- Translated title (Spanish)
- Selección de un anticuerpo de dominio único, específico para un epítopo unido a HLA del antígeno Ag85B micobacteriano
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W3090517274
- DOI
- 10.3389/fimmu.2020.577815
References
- https://openalex.org/W128869094
- https://openalex.org/W1506397040
- https://openalex.org/W1591828451
- https://openalex.org/W1640293576
- https://openalex.org/W1764859632
- https://openalex.org/W1799584846
- https://openalex.org/W1936199022
- https://openalex.org/W1941694730
- https://openalex.org/W1970173052
- https://openalex.org/W1981734925
- https://openalex.org/W1989639228
- https://openalex.org/W1991227620
- https://openalex.org/W2001656273
- https://openalex.org/W2004191453
- https://openalex.org/W2008845432
- https://openalex.org/W2023436582
- https://openalex.org/W2035845712
- https://openalex.org/W2041848678
- https://openalex.org/W2049675690
- https://openalex.org/W2057542215
- https://openalex.org/W2061040031
- https://openalex.org/W2066321034
- https://openalex.org/W2067327881
- https://openalex.org/W2075024118
- https://openalex.org/W2078722792
- https://openalex.org/W2110352873
- https://openalex.org/W2126498651
- https://openalex.org/W2140605074
- https://openalex.org/W2143543601
- https://openalex.org/W2159414611
- https://openalex.org/W2164423040
- https://openalex.org/W2164835880
- https://openalex.org/W2169044551
- https://openalex.org/W2187563245
- https://openalex.org/W2296051580
- https://openalex.org/W2601322833
- https://openalex.org/W2609826536
- https://openalex.org/W2756187578
- https://openalex.org/W2768053621
- https://openalex.org/W2788753373
- https://openalex.org/W2848276025
- https://openalex.org/W2891649691
- https://openalex.org/W2910150952
- https://openalex.org/W2913862398
- https://openalex.org/W2922935831
- https://openalex.org/W2943075536
- https://openalex.org/W2943998306
- https://openalex.org/W2974814036
- https://openalex.org/W3002977256
- https://openalex.org/W3007049485
- https://openalex.org/W3014203722
- https://openalex.org/W637632257