Isolation of peripheral blood mononuclear cells and the expression of toll-like receptors in Betong chickens
- 1. Kasetsart University
- 2. Walailak University
Description
Background and Aim: Toll-like receptors (TLRs) comprise microbial sensing receptors present on cell surfaces that are capable of detecting pathogens. The present study aims to examine the expression of TLRs within the peripheral blood mononuclear cell (PBMC) of the Betong chickens. Materials and Methods: Blood samples were harvested from 12 Betong (KU line) chickens. Hematological values were calculated. PBMC was isolated from the blood utilizing a Histopaque solution and stored in a RPMI1640 culture medium. Cell viability was investigated using a Trypan Blue dye exclusion test. DNA was extracted from PBMC and the expression of the DNA's TLRs was examined using a polymerase chain reaction. Results: Hematological values were determined from the blood samples collected in this study obtained from healthy Betong chickens. PBMC that was isolated from the Betong chickens possessed cell viability higher than 95% (95.37±1.06). From the examination of TLRs gene expression, results revealed instances of TLR1.1, TLR1.2, TLR2.1, TLR2.2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR 7, TLR15, and TLR21 that were present in the PBMC of Betong chickens. Conclusion: PBMC isolated from the blood of healthy Betong chickens possessed excellent cell quality. All chicken TLRs were discovered within the PBMC of Betong chickens. Hence, PBMC stands out as one of the premier sources for in vitro studies of chicken immune response.
Translated Descriptions
Translated Description (Arabic)
الخلفية والهدف: تشتمل المستقبلات الشبيهة بالرسوم (TLRs) على مستقبلات استشعار ميكروبية موجودة على أسطح الخلايا القادرة على اكتشاف مسببات الأمراض. تهدف الدراسة الحالية إلى فحص تعبير TLRs داخل الخلية أحادية النواة في الدم المحيطي (PBMC) لدجاج Betong. المواد والطرق: تم حصاد عينات الدم من 12 دجاجة بيتونغ (خط KU). تم حساب قيم أمراض الدم. تم عزل PBMC من الدم باستخدام محلول هيستوبيك وتخزينه في وسط زراعة RPMI1640. تم التحقيق في صلاحية الخلية باستخدام اختبار استبعاد صبغة تريبان بلو. تم استخراج الحمض النووي من PBMC وتم فحص تعبير TLRs في الحمض النووي باستخدام تفاعل سلسلة البلمرة. النتائج: تم تحديد قيم أمراض الدم من عينات الدم التي تم جمعها في هذه الدراسة والتي تم الحصول عليها من دجاجات بيتونج الصحية. تمتلك PBMC التي تم عزلها عن دجاجات بيتونغ صلاحية خلية أعلى من 95 ٪ (95.37±1.06). من فحص التعبير الجيني لـ TLRs، كشفت النتائج عن حالات TLR1.1 و TLR1.2 و TLR2.1 و TLR2.2 و TLR3 و TLR4 و TLR5 و TLR 7 و TLR15 و TLR21 التي كانت موجودة في PBMC لدجاج Betong. الاستنتاج: يتمتع PBMC المعزول من دم دجاجات بيتونغ الصحية بجودة خلايا ممتازة. تم اكتشاف جميع TLRs الدجاج داخل PBMC من الدجاج بيتونغ. وبالتالي، يبرز PBMC كواحد من المصادر الرئيسية للدراسات المختبرية للاستجابة المناعية للدجاج.Translated Description (French)
Contexte et objectif : Les récepteurs de type Toll (TLR) comprennent les récepteurs de détection microbienne présents sur les surfaces cellulaires qui sont capables de détecter les agents pathogènes. La présente étude vise à examiner l'expression des TLR dans la cellule mononucléée du sang périphérique (PBMC) des poulets Betong. Matériels et méthodes : Des échantillons de sang ont été prélevés sur 12 poulets Betong (lignée KU). Les valeurs hématologiques ont été calculées. La PBMC a été isolée du sang à l'aide d'une solution histopaque et stockée dans un milieu de culture RPMI1640. La viabilité cellulaire a été étudiée à l'aide d'un test d'exclusion de colorant Trypan Blue. L'ADN a été extrait de PBMC et l'expression des TLR de l'ADN a été examinée à l'aide d'une réaction en chaîne par polymérase. Résultats : Les valeurs hématologiques ont été déterminées à partir des échantillons de sang prélevés dans cette étude obtenus à partir de poulets Betong sains. Les PBMC isolées des poulets Betong possédaient une viabilité cellulaire supérieure à 95 % (95,37±1,06). À partir de l'examen de l'expression génique des TLR, les résultats ont révélé des cas de TLR1.1, TLR1.2, TLR2.1, TLR2.2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR 7, TLR15 et TLR21 qui étaient présents dans les PBMC des poulets Betong. Conclusion : les PBMC isolées à partir du sang de poulets Betong sains possédaient une excellente qualité cellulaire. Tous les TLR de poulet ont été découverts dans le PBMC des poulets Betong. Par conséquent, PBMC se distingue comme l'une des principales sources d'études in vitro de la réponse immunitaire du poulet.Translated Description (Spanish)
Antecedentes y objetivo: los receptores tipo Toll (TLR) comprenden receptores de detección microbianos presentes en las superficies celulares que son capaces de detectar patógenos. El presente estudio tiene como objetivo examinar la expresión de TLR dentro de las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de los pollos Betong. Materiales y métodos: Se recolectaron muestras de sangre de 12 pollos Betong (línea KU). Se calcularon los valores hematológicos. Las PBMC se aislaron de la sangre utilizando una solución Histopaque y se almacenaron en un medio de cultivo RPMI1640. La viabilidad celular se investigó utilizando una prueba de exclusión de colorante azul tripano. Se extrajo ADN de PBMC y se examinó la expresión de los TLR del ADN utilizando una reacción en cadena de la polimerasa. Resultados: Los valores hematológicos se determinaron a partir de las muestras de sangre recolectadas en este estudio obtenidas de pollos Betong sanos. Las PBMC que se aislaron de los pollos Betong poseían una viabilidad celular superior al 95% (95,37±1,06). A partir del examen de la expresión génica de TLR, los resultados revelaron casos de TLR1.1, TLR1.2, TLR2.1, TLR2.2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR 7, TLR15 y TLR21 que estaban presentes en las PBMC de pollos Betong. Conclusión: Las PBMC aisladas de la sangre de pollos Betong sanos poseían una excelente calidad celular. Todos los TLR de pollo se descubrieron dentro de las PBMC de pollos Betong. Por lo tanto, las PBMC se destacan como una de las principales fuentes de estudios in vitro de la respuesta inmune de los pollos.Files
17.pdf.pdf
Files
(226 Bytes)
| Name | Size | Download all |
|---|---|---|
|
md5:5360980bad11bf9723da89687501effc
|
226 Bytes | Preview Download |
Additional details
Additional titles
- Translated title (Arabic)
- عزل الخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي والتعبير عن المستقبلات الشبيهة بالرسوم في دجاج بيتونج
- Translated title (French)
- Isolement des cellules mononucléées du sang périphérique et expression de récepteurs de type toll chez les poulets Betong
- Translated title (Spanish)
- Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica y expresión de receptores tipo toll en pollos Betong
Identifiers
- Other
- https://openalex.org/W3042553941
- DOI
- 10.14202/vetworld.2020.1372-1375
References
- https://openalex.org/W1602466500
- https://openalex.org/W1981643578
- https://openalex.org/W1983959087
- https://openalex.org/W1991872651
- https://openalex.org/W1992546679
- https://openalex.org/W2041199873
- https://openalex.org/W2085313087
- https://openalex.org/W2086453496
- https://openalex.org/W2134073973
- https://openalex.org/W2140467540
- https://openalex.org/W2157339124
- https://openalex.org/W2290718049
- https://openalex.org/W2612680817
- https://openalex.org/W2806580017
- https://openalex.org/W2893467759
- https://openalex.org/W2904709752
- https://openalex.org/W3104242698
- https://openalex.org/W399764880
- https://openalex.org/W65533086
- https://openalex.org/W87082738